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Mfn2對TGF-β2誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用

發(fā)布時(shí)間:2021-05-08 10:01
  目的:線粒體融合蛋白基因2(mitofusin2,Mfn2)是存在于線粒體外膜與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜內(nèi)的一種不可或缺的調(diào)控線粒體的形態(tài)和操控線粒體融合的保守蛋白。其與多種生物學(xué)進(jìn)程如機(jī)體能量代謝、細(xì)胞增殖和凋亡等緊密相關(guān)。同時(shí),眼科中的許多常見病如白內(nèi)障、青光眼,視網(wǎng)膜疾病以及角膜疾病等都與線粒體的功能改變以及細(xì)胞的增殖凋亡等存在著密不可分的聯(lián)系。本研究主要探討Mfn2在轉(zhuǎn)化生長因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens epithelial cells,HLECs)發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)過程中的表達(dá)及作用。方法:本研究首先將不同濃度(10ng·m L-1、50ng·mL-1、100ng·mL-1)TGF-β2分別作用于HLECs用以建立后發(fā)性白內(nèi)障的后囊膜渾濁(posterior capsular opacification,PCO)模型并作為TGF-β2處理組,實(shí)時(shí)熒光定量PCR分別檢測不同濃度(10ng·mL-1... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1前言
2 材料和方法
    2.1 建立實(shí)驗(yàn)?zāi)P秃头纸M
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑與實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)和處理
        2.3.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.3.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.3.4 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)檢測
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 TGF-β2處理組和對照組HLECs中Mfn2表達(dá)變化
        3.1.1 各TGF-β2處理組和對照組HLECs中Mfn2mRNA表達(dá)量變化
        3.1.2 TGF-β2處理組和對照組HLECs中Mfn2蛋白表達(dá)變化情況
    3.2 TGF-β2處理組和對照組HLECs中上皮標(biāo)志物變化
        3.2.1 TGF-β2處理組和對照組HLECs中E-Cadherin和Vimentin mRNA表達(dá)量變化
        3.2.2 TGF-β2處理組和對照組HLECs中E-Cadherin和Vimentin蛋白表達(dá)變化情況
    3.3 Mfn2轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)染組和對照組HLECs上皮標(biāo)志物變化
        3.3.1 Mfn2轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)染組和對照組HLECs中 E-Cadherin和Vimentin mRNA表達(dá)量變化
        3.3.2 Mfn2轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)染組和對照組HLECs中 E-Cadherin和Vimentin蛋白表達(dá)變化情況
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間所取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長因子-β2誘導(dǎo)的后發(fā)性白內(nèi)障的分子機(jī)制研究[J]. 葛茸茸,沈煒.  海軍醫(yī)學(xué)雜志. 2016(06)
[2]腎小管上皮細(xì)胞線粒體氧化損傷在腎間質(zhì)纖維化中的作用及機(jī)制[J]. 黃繼義,鐘鴻斌,逯富華,朱茂述.  中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2016(20)
[3]MMPs抑制劑GM6001、MMP-2/9抑制劑Ⅰ及Ⅱ?qū)θ司铙w上皮細(xì)胞移行的抑制作用[J]. 劉冬梅,李俊紅.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2015 (09)
[4]燈盞花素對轉(zhuǎn)化生長因子-β2誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[J]. 崔琨明,張鳳妍,祈穎,王蒙蒙,高航.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2013 (10)
[5]轉(zhuǎn)化生長因子β2對人晶狀體上皮細(xì)胞E-鈣黏素和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)的影響[J]. 朱艷,朱玉廣,鐘瑩瑩,杜孝楠,張榮,王杰.  中國組織工程研究. 2012(46)
[6]高糖刺激對人晶狀體上皮細(xì)胞中KLF6基因表達(dá)的影響[J]. 王洪濤,鮑永珍.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2012 (02)
[7]線粒體融合蛋白2研究新進(jìn)展[J]. 趙光舉,盧中秋,姚詠明.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(03)

博士論文
[1]Smad2與Smad3參與TGF-β誘導(dǎo)的后發(fā)性白內(nèi)障發(fā)生的研究[D]. 李華.天津醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]CTGF基因干擾對轉(zhuǎn)化生長因子β2誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化的調(diào)控研究[D]. 張麗.浙江大學(xué) 2009

碩士論文
[1]下調(diào)Smac通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的影響研究[D]. 孔德倩.鄭州大學(xué) 2017
[2]慢病毒載體介導(dǎo)mTOR沉默對體外人晶狀體上皮細(xì)胞作用的研究[D]. 王逸涵.第二軍醫(yī)大學(xué) 2014
[3]MG132抑制人晶狀體上皮細(xì)胞增殖、移行和分化的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 雷在枝.山西醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào):3175138

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