背景:糖尿病性視網(wǎng)膜病變中關(guān)于新生血管的研究多局限于血管內(nèi)皮生長因子,而6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶（phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase,PFKFB3）也有一定的作用。目的:探討PFKFB3小干擾RNA（siRNA）對高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細胞的作用及機制。方法:將人臍靜脈內(nèi)皮細胞分為4組:正常糖組（5.5mmol/L葡萄糖）、正常糖+PFKFB3-siRNA組、高糖組（30mmol/L葡萄糖）、高糖+PFKFB3-siRNA組。正常糖+PFKFB3-siRNA組和高糖+PFKFB3-siRNA組以PFKFB3-siRNA轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細胞。采用Westernblot檢測PFKFB3的沉默表達效果,并選取沉默效果最佳者進行后續(xù)實驗。體外管腔形成實驗檢測細胞成管能力,實時熒光定量PCR檢測PFKFB3的m RNA表達,Western blot檢測PFKFB3及磷酸化AKT/AKT的蛋白表達。結(jié)果與結(jié)論:①PFKFB3-siRNA能明顯抑制PFKFB3的蛋白表達（P <0.01）;②與正常糖組相比,正常... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(14)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

PFKFB3 siRNA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞PFKFB3蛋白表達的影響(Western blot)

圖2 PFKFB3 siRNA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞PFKFB3蛋白表達的影響(Western blot)圖4 PFKFB3 siRNA對高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞中細胞管腔形成能力的影響

圖3 PFKFB3 siRNA對高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞中PFKFB3(A)和AKT(B)表達的影響內(nèi)皮細胞擁有高度的無氧糖酵解活性，促新生血管因子可以明顯上調(diào)內(nèi)皮細胞中PFKFB3的表達[26]，而敲除內(nèi)皮細胞中的PFKFB3可以明顯減少無氧糖酵解，表明PFKFB3在內(nèi)皮細胞中扮演著重要的作用，內(nèi)皮細胞中的PFKFB3同時參與病理性血管生成[12]。作者通過觀察PFKFB3-siRNA對高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細胞管腔形成的影響，發(fā)現(xiàn)高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細胞的PFKFB3蛋白及其mRNA表達均明顯升高，這與作者所在課題組前期研究結(jié)果一致[15]，說明高糖可以刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞的PFKFB3增加。血管內(nèi)皮細胞包括大血管內(nèi)皮細胞和微血管內(nèi)皮，在高糖環(huán)境下細胞功能存在一定的差異[27]，此次實驗使用臍靜脈血管內(nèi)皮細胞不能完全說明PFKFB3在糖尿病性視網(wǎng)膜病變中的作用，作者將在后續(xù)的實驗中將進一步采用微血管血管內(nèi)皮細胞進行相關(guān)實驗，以排除這一可能差異。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3068181