研究背景視網(wǎng)膜變性（retinal degeneration,RD）是一類視網(wǎng)膜退行性致盲性疾病。干細(xì)胞移植被認(rèn)為是治療RD最有潛力的治療方案之一,但其治療機(jī)制尚不明確。國(guó)內(nèi)外的研究和我們課題組前期研究都證實(shí)視網(wǎng)膜神經(jīng)祖細(xì)胞（neural progenitor cells,NPCs）在移植后能分化為成熟感光細(xì)胞替代變性的視網(wǎng)膜細(xì)胞并與宿主視網(wǎng)膜整合。近來(lái)發(fā)現(xiàn)參與分化整合的NPCs數(shù)量非常少,故推測(cè)細(xì)胞替代機(jī)制可能不是NPCs發(fā)揮治療作用的主要機(jī)制。多個(gè)課題組的研究發(fā)現(xiàn),移植的NPC和宿主細(xì)胞之間的物質(zhì)交換可能是延緩宿主細(xì)胞變性進(jìn)程的主要機(jī)制。NPC能分泌多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,以及包括外泌體在內(nèi)的各類細(xì)胞外囊泡（Extracellular vesicles,EVs）,以便和微環(huán)境中各類細(xì)胞進(jìn)行調(diào)控和交流。外泌體（exosomes）屬于細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicles,EVs）的一種。多項(xiàng)研究報(bào)道它可以介導(dǎo)移植干細(xì)胞和宿主細(xì)胞間的細(xì)胞間通訊,NPC來(lái)源外泌體（NPC-exos）對(duì)損傷的中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有神經(jīng)保護(hù)作用。尚無(wú)研究探討NPC-exos是否參與介導(dǎo)了NPCs在RD... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：125 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

懸浮生長(zhǎng)的小鼠神經(jīng)祖細(xì)胞克隆球狀態(tài)A:第0代接種后第2天;B:原代接種后第7天;C:第1代傳代后第1天;D:第1代傳代后第4天;E:第2代傳代后第4天;F:第8代傳代后第7 天。標(biāo)尺:100μm。

圖1-1懸浮生長(zhǎng)的小鼠神經(jīng)祖細(xì)胞克隆球狀態(tài)A:第0代接種后第2天;B:原代接種后第7天;C:第1代傳代后第1天;D:第1代傳代后第4天;E:第2代傳代后第4天;F:第8代傳代后第7 天。標(biāo)尺:100μm。2.3.1.2人胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)祖細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定

本研究通過免疫熒光技術(shù)及流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)對(duì)培養(yǎng)至第4代的h NPC進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示,h NPC培養(yǎng)至在第4代時(shí)表達(dá)Nestin(圖1-4A)、PAX6(圖1-4B)、SOX2(圖1-4C)神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記;不表達(dá)感光細(xì)胞標(biāo)記Recoverin(圖1-4D),不表達(dá)Müller細(xì)胞標(biāo)記GS(圖1-4E)和GFAP(圖1-4F)。同時(shí),流式檢測(cè)結(jié)果顯示,培養(yǎng)至第4代的h NPC高表達(dá)Nestin(圖1-4G)、PAX6(圖1-4H)、SOX2(圖1-4I)神經(jīng)干細(xì)胞指標(biāo)。結(jié)果提示:通過此種方法能成功獲得h NPC,可作為后續(xù)提取h NPC-exos的來(lái)源。圖1-4人胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)祖細(xì)胞(第4代)的鑒定A-C:hNPC表達(dá)Nestin、PAX6和SOX2(C);D-F:hNPC不表達(dá)感光細(xì)胞標(biāo)記Recoverin、Müller細(xì)胞標(biāo)記GS和GFAP。G-I:hNPC通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)誘神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記Nestin、PAX6和SOX2。標(biāo)尺:50μm(A-F)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Micro RNA-9 promotes the neuronal differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells by activating autophagy[J]. Guang-yu Zhang,Jun Wang,Yan-jie Jia,Rui Han,Ping Li,Deng-na Zhu.  Neural Regeneration Research. 2015(02)
[2]Molecular hydrogen regulates the expression of miR-9,miR-21 and miR-199 in LPS-activated retinal microglia cells[J]. Guo-Dan Liu,Hong Zhang,Lin Wang,Qing Han,Shi-Feng Zhou,Ping Liu.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2013(03)



本文編號(hào)：3024465