背景:視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（Retinal pigment epithelium cells,RPE）通過發(fā)揮營養(yǎng)、支持及屏障等關(guān)鍵作用來維持視網(wǎng)膜功能和代謝的穩(wěn)態(tài)。視網(wǎng)膜變性疾�。≧etinal Degenerative diseases,RD）的發(fā)生,伴隨視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的凋亡和功能障礙[1]。視網(wǎng)膜下腔移植人胚胎干細(xì)胞衍生的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（Human Embryonic Stem Cells derived RPE,hESC-RPE）是目前治療此類疾病的最佳臨床策略之一[2,3]。大量動(dòng)物和臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí),hESC-RPE的移植對(duì)于視網(wǎng)膜變性疾病有明確的短期療效,是良好的種子細(xì)胞[4],既往研究報(bào)道,超過百分之95的治療細(xì)胞移植后主要是通過細(xì)胞間物質(zhì)交換,自分泌、旁分泌機(jī)制發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[5]。外泌體作為一種幾乎所有活細(xì)胞都可產(chǎn)生的納米級(jí)囊泡,分泌出胞后可在全身循環(huán)中傳遞,其內(nèi)部搭載有蛋白質(zhì)、核酸及脂質(zhì)等物質(zhì)[6],通過將上述生物活性分子傳遞給靶細(xì)胞從而改變靶細(xì)胞的行為和狀態(tài)[7,8]。作為移植后細(xì)胞間物質(zhì)交換和信息傳遞的重要載體,現(xiàn)階段對(duì)hESC-RPE衍生的外泌體在變性視... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１?ｈＥＳＣ－ＲＰＥ光鏡下形態(tài)學(xué)觀察??圖Ａ為ｈＥＳＣ－ＲＰＥ完全融合后細(xì)胞形態(tài)（１００ｘ）；圖Ｂ為ｈＥＳＣ－ＲＰＥ完全融合后細(xì)胞形態(tài)（２００ｘ）

移植延緩ＲＣＳ大鼠視功能的喪失??為了明確Ｎｏｒ－ＥＸＯ是否具有保護(hù)ＲＣＳ大鼠變性視網(wǎng)膜的功能，本實(shí)驗(yàn)于變性??早期（ｄ２１）向ＲＣＳ大鼠視網(wǎng)膜下腔移植Ｎｏｒ－ＥＸＯ，并在移植當(dāng)天術(shù)前（Ｐｒｅ－ｓｕｒｇｅｒｙ，??ＰＲＥ）及移植后每周通過ｆ－ＥＲＧ及光柵行為學(xué)評(píng)估Ｎｏｒ－ＥＸＯ對(duì)ＲＣＳ大鼠視功能的??影響，直到Ｎｏｒ－ＥＸ？移植組與ＰＢＳ移植組的ｆ－ＥＲＧ幅值與視敏度的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)??上沒有意義為止。??①Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植延緩ＲＣＳ大鼠視網(wǎng)膜電生理反應(yīng)丟失??相較于ＰＢＳ移植組（圖３－５，?Ａ），Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植組的ＲＣＳ大鼠在移植后ｌｗ??（Ｐｌｗ），２ｗ?（Ｐ２ｗ）和３ｗ?（Ｐ３ｗ）三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯示出更高的ａ波幅值（圖３－５，??Ｂ），盡管這種差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上并沒有顯著性意義；而ｂ波對(duì)于這種趨勢(shì)的差異則??體現(xiàn)得更為顯著（圖３－５，?Ｃ），結(jié)果顯示，Ｎｏｒ－ＥＸ？移植組的ＲＣＳ大鼠在上述三個(gè)??時(shí)間節(jié)點(diǎn)ｂ波幅值都顯著髙于ＰＢＳ移植組（ｐ＜０．０５）。??Ａ???Ｂ??ＰＢＳ?＾ｏｒ?ＥＸＯ?￣｜?？?１５〇ｌ?—ｘ。??［：??ｐｉｗ?ｓ?＿，＿＿．＿＿，＿＿???—????ｃ?＾?＾?＾?＾?＾??：Ｉ：ｌ］???％?，??／ｖ，??ｉ?２ＱＱ－?．??Ｐ３ｗ?ｔ??Ｚ?ｉ??Ｐ４ｗ?一＾＼＿?＿，＿，＿，＿＿＿?????＾?＾?／?／??圖３－５外泌體移植對(duì)ＲＣＳ大鼠視網(wǎng)膜電生理功能的影響??圖Ａ采用ｆ－ＥＲＧ記錄暗適應(yīng)后ＲＣＳ大鼠接受外泌體或ＰＢＳ移植后不同時(shí)間點(diǎn)ｆ－ＥＲＧ波形圖；圖Ｂ為ｌ．Ｏｄｂ??光強(qiáng)下ａ波幅值統(tǒng)計(jì)；圖

４±１５．７１?２１３．１８±１４．３６?１６１．１２±２４．２７?１２２．６２±１４．００??Ｐ?值?１．００?０．０４?０．０１?０．０４?０．６６??②Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植保護(hù)變性早期ＲＣＳ大鼠的視敏度??視覺行為學(xué)反應(yīng)相較于閃光視網(wǎng)膜電圖能夠相對(duì)更靈敏的反應(yīng)局部視功能的??變化，在進(jìn)一步評(píng)估Ｎｏｒ－ＥＸＯ對(duì)視功能的維持情況時(shí)，本實(shí)驗(yàn)選擇了光柵行為學(xué)??作為檢測(cè)手段。相較于ＰＢＳ移植組，Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植組的ＲＣＳ大鼠在移植后三周??內(nèi)平均視敏度顯著更高（ｐ＜０．０５；圖３－６，Ａ－Ｂ），但到移植后４ｗ?（Ｐ４ｗ）時(shí)，這??種差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??以上結(jié)果提示：Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植使ＲＣＳ大鼠保有更高的ｆ－ＥＲＧ波幅和視敏??度，延緩了?ＲＣＳ大鼠視功能喪失。??＿＿??圖３－６外泌體移植對(duì)ＲＣＳ大鼠視敏度的影響??圖Ａ光柵行為學(xué)檢測(cè)大鼠視敏度示意圖；圖Ｂ?ＲＣＳ大鼠接受外泌體或ＰＢＳ移植后光柵行為學(xué)視敏度統(tǒng)計(jì)值??（ｎ＝５）。ＰＲＥ代表ｄ２１移植術(shù)前，Ｐｌｗ、Ｐ２ｗ、Ｐ３ｗ、Ｐ４ｗ分別代表接受外泌體或ＰＢＳ移植后ｌｗ、２ｗ、３ｗ、??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]RCS大鼠視網(wǎng)膜色素變性過程中視網(wǎng)膜免疫微環(huán)境的改變[J]. 唐環(huán)宇,盧紫陽,何軍材,郜原,陰正勤.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2018 (11)
[2]Mesenchymal stem cells-derived exosomes ameliorate blue light stimulation in retinal pigment epithelium cells and retinal laser injury by VEGF-dependent mechanism[J]. Guang-Hui He,Wei Zhang,Ying-Xue Ma,Jing Yang,Li Chen,Jian Song,Song Chen.  International Journal of Ophthalmology. 2018(04)
[3]干細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜變性疾病面臨的挑戰(zhàn)和前景[J]. 陰正勤.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(15)



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