目的:應用體外合成的重組慢病毒干擾載體,特異性抑制肥大細胞細胞上CCR3表達,體內觀察過敏性鼻炎小鼠鼻粘膜病理形態(tài)改變和肥大細胞浸潤數(shù)目變化,并比較骨髓、外周血、鼻黏膜中肥大細胞CCR3及釋放介質的差異情況,以期了解沉默CCR3基因對肥大細胞功能的作用及影響程度,為過敏性鼻炎的基因治療奠定基礎。方法:將Balb/c小鼠隨機分為4組:正常對照組、過敏性鼻炎組、controlshRNA處理組和CCR3shRNA處理組。以卵清蛋白(OVA)致敏、激發(fā)建立小鼠過敏性鼻炎模型,采用局部滴鼻給藥的方式,將體外合成的針對CCR3基因的重組慢病毒載體應用于小鼠過敏性鼻炎模型。末次鼻腔激發(fā)之后的30分鐘內對各組小鼠進行癥狀學評估,并收集各組小鼠的骨髓、外周血、鼻粘膜標本。應用western blot和qPCR檢測各組小鼠骨髓、外周血及鼻粘膜中肥大細胞CCR3mRNA和CCR3蛋白的水平變化。采用HE染色、甲苯胺藍染色檢測鼻粘膜的組織病理形態(tài)及鼻黏膜中肥大細胞的浸潤情況,同時利用電鏡觀察鼻粘膜纖毛形態(tài)。應用Elisa方法測定小鼠骨髓、外周血、鼻粘膜中組胺(Histamine)、類胰蛋白酶(Tryptase... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

鼻腔激發(fā)后小鼠抓鼻行為

與 Normal 組比較，**P＜0.01，與R3 抑制動物標本中 CCR3 蛋白的組、過敏性鼻炎組、慢病毒 controlshR中獲取小鼠的骨髓、外周血和鼻粘膜標白水平，結果如圖 3.3 所示。

3.2 鼻腔激發(fā)后小鼠癥狀評分，與 Normal 組比較，**P＜0.01，與 AR 組比較，#P＜2 干擾基因 CCR3 抑制動物標本中 CCR3 蛋白的表達分別從正常對照組、過敏性鼻炎組、慢病毒 controlshRNA 處理組、慢病R3shRNA 處理組中獲取小鼠的骨髓、外周血和鼻粘膜標本，檢測四組小鼠本中 CCR3 的蛋白水平，結果如圖 3.3 所示。

【參考文獻】：
碩士論文
[1]RNAi抑制CCR3基因對小鼠肥大細胞的影響[D]. 彭海森.南昌大學 2018



本文編號：2943884