發(fā)布時間：2017-03-23 00:03

  本文關(guān)鍵詞：WRN的表達及表觀遺傳學(xué)改變與年齡相關(guān)性白內(nèi)障的關(guān)系，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本文旨在探索DNA氧化損傷修復(fù)基因WRN在年齡相關(guān)性白內(nèi)障(age-related cataract,ARC)患者晶狀體上皮細胞(lens epithelial cells,LECs)和晶狀體皮質(zhì)中的表達及甲基化狀態(tài)與組蛋白修飾,并分析其表達與表觀遺傳修飾的關(guān)系。方法本實驗設(shè)計為臨床病例對照研究。病例組由2013年8月-2014年8月在南通大學(xué)附屬醫(yī)院眼科診斷為ARC并接受白內(nèi)障手術(shù)的患者組成,包括皮質(zhì)性、核性、后囊下性三種類型ARC,每種各39例39眼;對照組為本院眼科診斷為玻璃體視網(wǎng)膜疾病,因年齡或手術(shù)等因素需要在玻璃體切除手術(shù)中同時作透明晶狀體摘除者,共39例39眼,與病例組患者年齡相匹配。實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分析WRN基因m RNA表達水平,蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)分析蛋白質(zhì)表達量,甲基化特異性PCR法(BSP)檢測WRN的甲基化狀態(tài)。染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)分析檢測WRN的組蛋白修飾狀態(tài)。對人晶狀體上皮細胞株(HLEB-3)進行5-氮雜-2′-脫氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-aza-d C)和曲古霉素(TSA,trichostatin A)處理后檢測WRN表達的變化。結(jié)果與對照組相比,ARC患者LECs中WRN基因m RNA及蛋白質(zhì)表達均下調(diào)(F=162.82,P0.01;F=68.72,P0.01)。但是在病例組和對照組患者的晶狀體皮質(zhì)中均沒有檢測到WRN的表達。在ARC患者LECs中WRN基因啟動子區(qū)Cp G島呈現(xiàn)高甲基化(F=104.01,P0.01)。ARC組患者與對照組患者的晶狀體皮質(zhì)中WRN基因啟動子區(qū)Cp G島甲基化率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與對照組相比,ARC患者LECs中H3乙�；捷^低而H3K9三甲基化水平則較高(F=67.00,P0.01;F=21.40,P0.01)。經(jīng)5-aza-d C和TSA處理后,HLEB-3中WRN蛋白表達升高(t=0.32,P0.01;t=0.36,P0.01)。結(jié)論WRN基因表達的下調(diào)可能與ARC的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。WRN基因啟動子區(qū)Cp G島的DNA甲基化及組蛋白修飾可能調(diào)節(jié)其表達,與ARC的發(fā)病機制相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：WRN 年齡相關(guān)性白內(nèi)障 晶狀體 DNA甲基化 組蛋白修飾 表觀遺傳學(xué)
【學(xué)位授予單位】：南通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R776.1
【目錄】：

• 英文縮寫詞 (Abbreviation)5-7
• 中文摘要 (Abstract in Chinese)7-9
• 英文摘要 (Abstract in English)9-11
• 前言 (Introduction)11-13
• 材料和方法 (Materials and Methods)13-26
• 結(jié)果 (Results)26-36
• 討論 (Discussion)36-39
• 結(jié)論 (Conclusions)39-40
• 參考文獻 (References)40-43
• 綜述 (Review)43-53
• 綜述參考文獻 (References)48-53
• 在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文 (Published Articles)53-54
• A 在國內(nèi)學(xué)術(shù)會議上發(fā)表的論文53
• B 在國內(nèi)外刊物上發(fā)表的論文53
• C 參加的項目53-54
• 在攻讀碩士學(xué)位期間獲得的主要榮譽54-55
• 致謝 (Acknowledgements)55

  本文關(guān)鍵詞：WRN的表達及表觀遺傳學(xué)改變與年齡相關(guān)性白內(nèi)障的關(guān)系，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：262487