【摘要】：目的:通過觀察在模擬5000m高海拔缺氧條件下大鼠視網(wǎng)膜組織病理形態(tài)改變、細(xì)胞早期凋亡率、caspase-3和p53的表達(dá),探討急性高海拔視網(wǎng)膜病變的發(fā)生機(jī)制。方法:成年雌性wistar大鼠70只,隨機(jī)分入對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組10只,飼養(yǎng)于海拔高度為1500m的室內(nèi)環(huán)境(蘭州市海拔高度,氧分壓為17.6 k Pa);實(shí)驗(yàn)組60只,分為6組,每組10只,分別飼養(yǎng)于模擬海拔高度為5000m的高原環(huán)境模擬實(shí)驗(yàn)艙(氧分壓為11.3 k Pa)中2h、6h、12h、24h、48h、72h。各組大鼠處死后,迅速摘除眼球行HE染色觀察大鼠視網(wǎng)膜病理形態(tài)的改變;行免疫組化染色觀察大鼠視網(wǎng)膜caspase-3和p53的表達(dá),采用IPP軟件計(jì)算陽性細(xì)胞的平均吸光度值(A),并分析caspase-3與p53表達(dá)的相關(guān)性;通過流式細(xì)胞儀檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞早期凋亡率。結(jié)果:1.HE染色結(jié)果:對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜各層組織結(jié)構(gòu)清楚、完整,厚度均勻一致,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈單層排列,細(xì)胞核較大,呈橢圓形;實(shí)驗(yàn)組大鼠視網(wǎng)膜各層組織水腫疏松,視網(wǎng)膜厚度增加,排列層次紊亂,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層出現(xiàn)空泡變性,并隨著缺氧時(shí)間延長視網(wǎng)膜病理損傷越明顯。2.視網(wǎng)膜caspase-3、p53表達(dá)結(jié)果:對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜組織中p53、caspase-3僅在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層有微量表達(dá)或不表達(dá);實(shí)驗(yàn)組caspase-3和p53在模擬缺氧損傷2h后即檢測到表達(dá),并隨著缺氧時(shí)間延長,兩者表達(dá)逐漸增加,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。通過Spearman相關(guān)性分析,大鼠視網(wǎng)膜組織中caspase-3與p53的表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.832,P0.001)。3.視網(wǎng)膜細(xì)胞早期凋亡率檢測結(jié)果:對(duì)照組平均細(xì)胞早期凋亡率為0.46%;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞早期凋亡率隨缺氧時(shí)間延長逐漸升高,48h組升高明顯。2h組與對(duì)照組比較無顯著性差異(P=0.213);其余各組兩兩比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1.模擬5000m高海拔缺氧條件可造成大鼠視網(wǎng)膜的組織損傷,導(dǎo)致視網(wǎng)膜出現(xiàn)病理形態(tài)改變。2.細(xì)胞凋亡可能參與了模擬高海拔缺氧的大鼠視網(wǎng)膜損傷機(jī)制,并通過caspase-3依賴的凋亡通路發(fā)揮作用。
【圖文】：

學(xué)碩士學(xué)位論文 急性高海拔視網(wǎng)膜病變機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究12圖-1 模擬 5000m 高海拔缺氧不同時(shí)間點(diǎn)的大鼠視網(wǎng)膜的組織病理圖像（HE ×400）（1A:對(duì)照組；1B:2h 組；1C:6h 組；1D：12h 組；1E:24h 組；1F:48h 組；1G：72h 組）

學(xué)碩士學(xué)位論文 急性高海拔視網(wǎng)膜病變機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究16圖-2 模擬 5000m高海拔缺氧不同時(shí)間點(diǎn)的大鼠視網(wǎng)膜免疫組織化學(xué)染色圖像（DBA×400）。（p53 的表達(dá)：2A:對(duì)照組；2B:2h 組；2C:6h 組；2D：12h 組；2E:24h 組；2F:48h 組；2G：72h 組。caspase-3 的表達(dá)：3A:對(duì)照組；3B:2h 組；3C:6h 組；3D：12h 組；3E:24h 組；3F:48h組；3G：72h 組。）表-1 模擬 5000m 高海拔缺氧不同時(shí)間點(diǎn)的大鼠視網(wǎng)膜 p53、caspase-3 表達(dá)比較 ( x sn=5)p53 caspase-3組別 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組 0.087±0.031 — 0.076±0.012 —2h — 0.121±0.011 — 0.113±0.0076h — 0.162±0.014 — 0.158±0.03212h — 0.213±0.021 — 0.273±0.05724h — 0.356±0.063 — 0.394±0.02148h — 0.391±0.037 — 0.429±0.01872h — 0.421±0.028 — 0.461±0.063注：模擬 5000m 高海拔缺氧不同時(shí)間點(diǎn)的各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，p53 和 caspase-3 的表達(dá)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，，P<0.05。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R774.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2551970