【摘要】：目的探討人喉癌細胞Hep2細胞來源外泌體(Hep2-exo)負載樹突細胞(DC)后體外刺激細胞毒T細胞對Hep2細胞的殺傷作用。方法利用蔗糖密度梯度超速離心法從Hep2細胞培養(yǎng)上清液中分離Hep2-exo。透射電子顯微鏡鑒定Hep2-exo形態(tài),Western印跡分析Hep2-exo表面CD9分子表達。分離培養(yǎng)喉癌患者外周血單個核細胞誘導(dǎo)的DC,流式細胞術(shù)鑒定細胞表型。用MTT法檢測負載Hep2-exo的DC刺激T淋巴細胞增殖情況及細胞毒T細胞對Hep2細胞的殺傷作用。結(jié)果透射電鏡下見Hep2-exo呈典型的杯狀,大小相對均一,平均直徑30~100 nm。Hep2-exo表面有CD9CD63分子表達。單個核細胞DC有CD1a分子表達說明誘導(dǎo)成功,邊緣有絨毛樣突起,呈典型的PC形態(tài)。負載Hep2-exo的DC刺激T細胞增殖能力及T細胞對靶細胞的殺傷效應(yīng)明顯強于未負載Hep2-exo的DC(P0.05)。結(jié)論負載Hep2-exo的DC能促進T細胞增殖,可體外誘導(dǎo)細胞毒T細胞應(yīng)答抑制喉癌細胞生長。
【圖文】：

p2細胞分泌的Exo呈圓形或橢圓形，大小相對均一，其外可見有脂質(zhì)膜包裹，內(nèi)部為低電子密度物質(zhì)，平均直徑30～100nm，同國外文獻報道〔1，2〕一致。Hep2細胞裂解物和Hep2-exo均表達CD9和CD63分子，Hep2-exo表達CD9和CD63灰度值比Hep2細胞裂解物高。見圖1，圖2。2.2DC表型分析來源于PBMC的CD14+經(jīng)過細胞因子(rh-GM-CSF，，rhIL-4，TNF-α)誘導(dǎo)培養(yǎng)至第7天，顯微鏡見大部分細胞貼壁生長，出現(xiàn)毛刺樣突起，呈現(xiàn)典型的樹枝狀突樣。通過流式細胞儀分析顯示DCs表面高表達CD1a分子，則證明DC誘導(dǎo)成功。見圖3。圖1Hep2細胞來源Exo電鏡圖(×20000)圖2Western印跡結(jié)果分析·1828·中國老年學(xué)雜志2017年4月第37卷

小相對均一，其外可見有脂質(zhì)膜包裹，內(nèi)部為低電子密度物質(zhì)，平均直徑30～100nm，同國外文獻報道〔1，2〕一致。Hep2細胞裂解物和Hep2-exo均表達CD9和CD63分子，Hep2-exo表達CD9和CD63灰度值比Hep2細胞裂解物高。見圖1，圖2。2.2DC表型分析來源于PBMC的CD14+經(jīng)過細胞因子(rh-GM-CSF，rhIL-4，TNF-α)誘導(dǎo)培養(yǎng)至第7天，顯微鏡見大部分細胞貼壁生長，出現(xiàn)毛刺樣突起，呈現(xiàn)典型的樹枝狀突樣。通過流式細胞儀分析顯示DCs表面高表達CD1a分子，則證明DC誘導(dǎo)成功。見圖3。圖1Hep2細胞來源Exo電鏡圖(×20000)圖2Western印跡結(jié)果分析·1828·中國老年學(xué)雜志2017年4月第37卷
【作者單位】： 永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部;湖南科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：永州市2015年度第二批指導(dǎo)性科技計劃項目(永科發(fā)[2015]10號)
【分類號】：R739.65

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 嚴宜明;鐘富有;童競亞;;樹突細胞及其與腫瘤的相互影響[J];贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2007年01期

2 關(guān)心;冷希圣;彭吉潤;魏玉華;王卉;袁蘭;;肝癌融合細胞疫苗的快速制備[J];中華實驗外科雜志;2007年12期

3 錢新明;;“樹突細胞”潛藏著治癌新秘密[J];中學(xué)生物教學(xué);2012年Z1期

4 陳定寶;宋秋靜;沈丹華;;肝樹突細胞腫瘤2例報道并文獻復(fù)習(xí)[J];臨床與實驗病理學(xué)雜志;2012年12期

5 ;作為治療癌腫反應(yīng)劑的樹突細胞[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;1998年01期

6 馬麟麟;豐瑯;武俊杰;解澤林;唐雅望;孫雯;郭宏波;林俊;張磊;田野;;腎移植后移形細胞癌患者外周血中樹突細胞的變化[J];實用器官移植電子雜志;2013年04期

7 關(guān)心;冷希圣;彭吉潤;魏玉華;王卉;袁蘭;;融合快速培養(yǎng)的樹突細胞體外誘導(dǎo)特異性抗肝癌免疫反應(yīng)[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年47期

8 呂丹;黃云峰;楊慧;劉世喜;王海洋;王敏;;鼻及咽部樹突細胞腫瘤4例臨床分析并文獻復(fù)習(xí)[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2014年08期

9 李爽;顧敏;劉卓剛;郝良純;王弘;;慢性粒細胞白血病不同藥物治療后樹突細胞的變化[J];實用藥物與臨床;2013年04期

10 葛薇,李長虹,張偉,韓欽,鄧為民,陳磊,尤勝國,趙春華;樹突細胞與細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞共培養(yǎng)增強其體內(nèi)外抗腫瘤活性[J];中華血液學(xué)雜志;2004年05期

相關(guān)會議論文 前9條

1 尹曉晴;唐海燕;范衛(wèi)新;張美華;;以紅皮病為首發(fā)表現(xiàn)的指狀突樹突細胞腫瘤[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

2 楊新靜;黃建安;雷偉;朱一蓓;張學(xué)光;;共培養(yǎng)的樹突細胞和細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞體內(nèi)外抗肺癌的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

3 王薇;劉U

本文編號：2551181