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視網(wǎng)膜感光細胞cGMP通道對不同光照時間損傷的時效關(guān)系及防護機制的研究

發(fā)布時間:2021-03-12 19:42
  目的:研究視網(wǎng)膜感光細胞cGMP選控通道對不同的光照時間損傷的時效反應(yīng)關(guān)系,闡明防護機制。方法:將661w細胞放置于4500Lux可見光下,分別設(shè)定3天、4天和5天三個光照周期。在三個光照周期中每天只照射相應(yīng)時間段(20分鐘,30分鐘,60分鐘,90分鐘,120分鐘,180分鐘),其余時間放于孵育箱中培養(yǎng),不加其他處理。用Hoechst/PI(二苯甲亞胺/碘化丙啶)染色法檢測細胞活性及計算細胞死亡率;通過Western Blot和熒光定量PCR分別在蛋白水平和m RNA水平檢測cGMP選控通道標志物GCAP1和cGMP的變化。結(jié)果:1.無論在暗處還是光照環(huán)境中,661w細胞在3天內(nèi)的死亡率低且相差不大,從第四天開始死亡率顯著增高,光照細胞比暗處細胞死亡率高,并且光照時間越長,細胞死亡率就越高,到第五天細胞趨近于全部死亡。2.在光照三天時,cGMP調(diào)控通道中的相關(guān)因子GCAP1和cGMP在20分鐘,90分鐘表達顯著;光照四天后,GCAP1和cGMP在20分鐘,60分鐘表達顯著。光照五天后,GCAP1和cGMP僅在30分鐘時有顯著表達,其他時間段沒有明顯表達。結(jié)論:不同光照時間,對661w細胞的損傷有時效反應(yīng)關(guān)系;GCAP1和cGMP的表達變化可能與光誘導(dǎo)的細胞代謝損傷修復(fù)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R774.1
文章目錄
摘要
Abstract
英文縮略詞
第一章 引言
第二章 綜述
    1.視網(wǎng)膜光損傷
    2.光損傷對視網(wǎng)膜感光細胞代謝增殖的影響
        2.1 光損傷對視網(wǎng)膜感光細胞的影響
            2.1.1 感光細胞的正常代謝過程
            2.1.2 光損傷研究中感光細胞的相關(guān)因子
            2.1.3 光損傷中感光細胞的病理改變
    3.cGMP選控通道在視網(wǎng)膜光損傷中的影響
    4.展望
第三章 材料與方法
    3.1 實驗材料
        (1)試劑
        (2)主要儀器和設(shè)備
    3.2 實驗方法
        (1)細胞培養(yǎng)
        (2)光照組和對照組細胞的處理方法
        (3)Hoechst/PI染色
        (4)Western Blot實驗
        (5)實時定量PCR
    3.3 統(tǒng)計學(xué)方法
第四章 實驗結(jié)果
    4.1 661w細胞光照處理的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)
    4.2 Western Blot檢測cGMP調(diào)控通路中蛋白標志物的變化
    4.3 RT-PCR檢測c GMP調(diào)控通路中標志物mRNA的變化
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝
 

【參考文獻】

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本文編號:2538051

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