【摘要】：目的通過(guò)體外三維培養(yǎng)人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞株OCM-1,觀(guān)察其生成血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry,VM)時(shí),PI3K、Eph A2蛋白的表達(dá),探討VM發(fā)生的可能機(jī)制。方法體外三維培養(yǎng)OCM-1細(xì)胞,于三維培養(yǎng)7 d進(jìn)行過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng)(periodic acid schiff reaction,PAS)染色,觀(guān)察PAS陽(yáng)性的環(huán)狀結(jié)構(gòu)的形成(即其形成VM的能力),于1 d、4 d、7 d進(jìn)行PI3 K和Eph A2免疫組織化學(xué)染色并觀(guān)察其結(jié)果。結(jié)果OCM-1細(xì)胞三維培養(yǎng)4 d,細(xì)胞大部分呈多角形,胞漿較豐富,核圓形,可見(jiàn)核仁,少部分腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)梭形,可見(jiàn)3~5個(gè)長(zhǎng)梭形細(xì)胞彼此連接圍成半環(huán)狀結(jié)構(gòu)。7 d后,腫瘤細(xì)胞幾乎均變成長(zhǎng)梭形,沿著膠原支架生長(zhǎng),細(xì)胞伸出長(zhǎng)的突起,彼此之間相互接觸圍成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。PAS染色可見(jiàn)瘤細(xì)胞大多呈彌散排列,腫瘤細(xì)胞模仿機(jī)體血管生成而形成瘤細(xì)胞條索并圍成管道,一層細(xì)胞外基質(zhì)(PAS陽(yáng)性物質(zhì))圍成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。與培養(yǎng)1 d的細(xì)胞相比,培養(yǎng)4 d和7 d的PI3K和Eph A2蛋白表達(dá)量均明顯增加(均為P0.05),并隨著時(shí)間的推移增加(7 d4 d1 d,P0.05)。結(jié)論Eph A2和PI3 K可能在三維培養(yǎng)人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞株OCM-1的VM形成過(guò)程中具有重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of PI3K,Eph A2 protein during angiogenic mimicry (vasculogenic mimicry,VM) of human choroidal melanoma cell line OCM-1, in vitro, and to explore the possible mechanism of VM. Methods OCM-1 cells were cultured in vitro for 7 days. The formation of PAS positive ring structure (that is, its ability to form VM) was observed by (periodic acid schiff reaction,PAS staining. PI3 K and Eph A2 immunohistochemical staining were performed on 7 days and the results were observed. Results for 4 d, most of OCM-1 cells were polygonal, with abundant cytoplasm, round nucleus, long fusiform of a few tumor cells, and 3 ~ 5 long fusiform cells connected with each other to form a semicircular structure 7 days later. Almost all tumor cells become fusiform, grow along collagen scaffolds, the cells extend long protuberances, and contact with each other to form a circular structure. PAS staining shows that most of the tumor cells are distributed. Tumor cells mimic the angiogenesis of the body and form tumor cell lines and enclosing pipes, and a layer of extracellular matrix (PAS positive substances) is surrounded by a circular structure. Compared with the cells cultured for 1 day, the expression of PI3K and Eph A2 protein increased significantly at 4 and 7 days (P0.05), and increased with the passage of time (P0.05 on 7 d 4 d 1 d). Conclusion Eph A2 and PI3 K may play an important role in the formation of VM in human choroidal melanoma cell line OCM-1.
【作者單位】： 天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院眼科;天津市眼科醫(yī)院;天津醫(yī)科大學(xué)眼科醫(yī)院;
【分類(lèi)號(hào)】：R739.7

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本文編號(hào)：2420472