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miR-346在鼻咽癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能

發(fā)布時(shí)間:2018-10-08 11:57
【摘要】:目的:探討miR-346在鼻咽癌中的表達(dá)及在鼻咽癌中的生物學(xué)功能。方法:收集63例鼻咽癌組織以及34例鼻咽部非癌組織標(biāo)本,Real-time PCR檢測(cè)組織和6株人鼻咽癌細(xì)胞系及1株人正常鼻咽部永生化上皮細(xì)胞株NP69中miR-346表達(dá)量,選取人鼻咽癌細(xì)胞系中表達(dá)量居中的兩種細(xì)胞系,并轉(zhuǎn)染miR-346 inhibitor,設(shè)置對(duì)照組(NC組)并轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照質(zhì)粒,Real-time PCR檢測(cè)兩種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染miR-346 inhibitor和對(duì)照組miR-346表達(dá)量,細(xì)胞增殖、凋亡分別采用Brdu-ELISA和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲。結(jié)果:與鼻咽非癌組織比較,鼻咽癌組織中miR-346表達(dá)量顯著升高(P=0.000);以正常人鼻咽部上皮細(xì)胞NP69比較,各鼻咽癌細(xì)胞株中miR-346相對(duì)表達(dá)量均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。選擇6種鼻咽癌細(xì)胞株中miR-346表達(dá)量居中的兩種,分別為CNE-1和CNE-2,轉(zhuǎn)染miR-346 inhibitor后,兩種鼻咽癌細(xì)胞株miR-346相對(duì)表達(dá)量均顯著降低,與NC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。兩種鼻咽癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-346inhibitor下調(diào)miR-346表達(dá)后鼻咽癌細(xì)胞的增殖受到抑制,均在轉(zhuǎn)染第3天差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。下調(diào)miR-346表達(dá)后鼻咽癌細(xì)胞CNE-1和CNE-2的凋亡顯著增加,遷移細(xì)胞數(shù)和侵襲細(xì)胞數(shù)顯著降低,與NC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:miR-346在鼻咽癌中高表達(dá),下調(diào)miR-346表達(dá)會(huì)抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,促進(jìn)凋亡,miR-346可能作為一種癌基因在鼻咽癌的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要的作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of miR-346 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and its biological function. Methods: Real-time PCR was collected from 63 nasopharyngeal carcinoma tissues and 34 nasopharyngeal non-cancerous tissues to detect the expression of miR-346 in NP69, 6 human nasopharyngeal carcinoma cell lines and 1 normal nasopharyngeal immortalized epithelial cell line. Two kinds of cell lines with intermediate expression in human nasopharyngeal carcinoma cell line were selected and transfected with miR-346 inhibitor, to set control group (NC group) and transfected with negative control plasmid miR-346 inhibitor, Real-time PCR to detect the expression of miR-346 inhibitor and miR-346 in the two cell lines and the proliferation of the cells. Cell migration and invasion were detected by Brdu-ELISA and flow cytometry, respectively. Results: the expression of miR-346 in nasopharyngeal carcinoma tissues was significantly higher than that in nasopharyngeal non-carcinoma tissues (P0. 000), and the relative expression of miR-346 in nasopharyngeal epithelial cells was significantly higher than that in normal nasopharyngeal epithelial cells (P0.05). Two of the six nasopharyngeal carcinoma cell lines, CNE-1 and CNE-2, transfected with miR-346 inhibitor, showed significant decrease in the relative expression of miR-346, which was significantly lower than that in NC group (P0.05). 2. The expression of miR-346 in 6 NPC cell lines was in the middle. After transfection of miR-346 inhibitor with CNE-1 and CNE-2, the relative expression of miR-346 in these two NPC cell lines was significantly lower than that in NC group (P0.05). The proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells was inhibited by down-regulation of miR-346 expression in miR-346inhibitor transfected with two kinds of nasopharyngeal carcinoma cells, and the difference was statistically significant on the 3rd day after transfection (P0.05). After down-regulation of miR-346 expression, the apoptosis of CNE-1 and CNE-2 in nasopharyngeal carcinoma cells increased significantly, the number of migration cells and invasive cells decreased significantly, compared with NC group, the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion the high expression of miR-346 in nasopharyngeal carcinoma and the down-regulation of miR-346 expression may inhibit the proliferation, migration and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells and promote apoptosis. MiR-346 may play an important role in the genesis and development of nasopharyngeal carcinoma as a kind of oncogene.
【作者單位】: 蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;蚌埠醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【基金】:2015年度安徽省高等學(xué)校自然科學(xué)研究一般項(xiàng)目(No.KJ2015B019by)資助
【分類號(hào)】:R739.63

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6 馬,

本文編號(hào):2256658


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