本文選題：GPR30 + 聲帶��； 參考：《復(fù)旦大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：[目的]： 育齡期女性體內(nèi)性激素水平會(huì)隨月經(jīng)周期而呈現(xiàn)周期性波動(dòng),這種雌激素濃度的波動(dòng)可以影響女性的嗓音,研究表明,約有1/3的育齡期婦女會(huì)經(jīng)歷經(jīng)前期發(fā)聲綜合征,表現(xiàn)為發(fā)聲易疲勞、音域降低、一些泛音丟失、以及聲強(qiáng)減弱等；喉鏡下可表現(xiàn)為聲帶粘膜水腫,血管充血及炎癥。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)亦表明,E2缺乏同樣可使大鼠喉部粘膜發(fā)生充血、水腫及炎癥,與育齡期女性聲帶粘膜的周期性表現(xiàn)類似。E2對(duì)嗓音的這種影響機(jī)制,到目前為止還不清楚,多數(shù)研究認(rèn)為聲帶上無(wú)雌激素受體(ER)表達(dá),為數(shù)不多的有關(guān)聲帶中SHRs的文獻(xiàn)樣本樣相對(duì)小,報(bào)道的ER表達(dá)的陽(yáng)性率也低。GPR30是一種能夠與E2特異性結(jié)合的G蛋白,介導(dǎo)某些快速、非基因效應(yīng),最近被認(rèn)為是一種新的雌激素受體,GPR30可存在于很多組織器官中,近來(lái)發(fā)現(xiàn),在一些病理過(guò)程中,GPR30可通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)來(lái)解緩機(jī)體所受到的損傷。因此我們推測(cè)GPR30可能也存在于聲帶,并且參與了E2介導(dǎo)的炎癥過(guò)程,從而使很多育齡期女性在體內(nèi)激素生理性波動(dòng)時(shí),聲帶粘膜出現(xiàn)短暫的充血、水腫等炎癥反應(yīng)。為此,本實(shí)驗(yàn)旨在了解GPR30在人及大鼠聲帶組織中的表達(dá)及其可能的意義。 [方法]： 獲取大鼠聲帶標(biāo)本,收集人良性病變聲帶標(biāo)本及喉切除的喉癌病例中未受腫瘤組織侵犯的瘤周聲帶標(biāo)本。采用Rt-PCR的方法以及免疫組織化學(xué)方法觀察大鼠及人VF組織中GPR30的表達(dá)及分布。利用χ2檢驗(yàn)的方法統(tǒng)計(jì)不同性別、年齡及不同聲帶病變中GPR30表達(dá)有無(wú)差異。結(jié)合近年來(lái)相關(guān)文獻(xiàn),分析GPR30在聲帶因E2波動(dòng)而產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)過(guò)程中可能發(fā)揮的作用。 [結(jié)果]： 1.GPR30mRNA在所有大鼠聲帶標(biāo)本(n=12)中均有表達(dá)；在人聲帶組織中,有19/29例標(biāo)本可見(jiàn)有GPR30mRNA的表達(dá)。 2.免疫組織化學(xué)結(jié)果表明,GPR30蛋白在34/63例中有表達(dá)。GPR30位于VF上皮,可表達(dá)于胞膜,胞質(zhì)和胞核中。 3.GPR30在VF不同病變類型中的表達(dá)：(1)GPR30mRNA在瘤周聲帶中的表達(dá)率為55.6%(5/9例),在VF良性病變組織中GPR30mRNA的陽(yáng)性率為70%(14/20例)。(2)免疫組化結(jié)果表明,在癌前病變聲帶白斑及瘤周聲帶組織中,GPR30蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率為60.9%(14/23例),在其他VF的良性病變中,GPR30蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率為50%(20/40例)。 4.GPR30的表達(dá)部位：(1)在VF良性病變中,GPR30主要表達(dá)于上皮細(xì)胞的胞膜上,少數(shù)表達(dá)于細(xì)胞核。(2)而在瘤周聲帶組織,GPR30主要表達(dá)于上皮,VF固有層及肌層細(xì)胞均未見(jiàn)有表達(dá),上皮細(xì)胞中GPR30定位主要是位于胞核。 5.在VF良性病變標(biāo)中,GPR30在mRNA水平及蛋白水平表達(dá)具有性別及年齡差異,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)論]： 1.本研究通過(guò)Rt-PCR和免疫組化的方法,首次在大鼠及人聲帶中觀察到GPR30的表達(dá)。 2.GPR30主要表達(dá)于VF上皮細(xì)胞,在固有層及肌層均未見(jiàn)表達(dá)；而且,GPR30的表達(dá)部位與所處環(huán)境有關(guān),良性病變主要表達(dá)于胞膜,而白斑及瘤周聲帶組織GPR30主要位于胞核。 3.GPR30可能參與了女性在月經(jīng)周期中因E2波動(dòng)而導(dǎo)的聲帶炎癥反應(yīng)。
[Abstract]:Purpose :

The sex hormone level of female in the childbearing age can fluctuate with the menstrual cycle , and the fluctuation of estrogen concentration can affect the female voice . The study shows that about 1 / 3 of the women in the childbearing age can experience the premenstrual syndrome of phonation , which shows that the vocalization is easy to fatigue , the sound field is reduced , some overtones are lost , and the sound intensity is weakened , etc .
In this paper , it is not clear that the expression of estrogen receptor ( ER ) in the vocal cord is similar to that of the female vocal cord mucosa in the childbearing age .

The method comprises the following steps of :

The expression and distribution of GPR 30 in rat and human VF tissues were observed by means of the method of Rt - PCR and immunohistochemical method . The expression and distribution of GPR 30 in rat and human VF tissues were observed by the method of Rt - PCR and immunohistochemical method .

The results are as follows :

1 . The mRNA was expressed in all rat vocal cord specimens ( n = 12 ) .
In human vocal cord tissue , there were 19 / 29 specimens showing the expression of GPRS 30mRNA .

2 . The results of immunohistochemistry showed that the pr30 protein was expressed in 34 / 63 cases , which could be expressed in the membrane , cytoplasm and nucleus of VF epithelium .

( 2 ) The positive expression rate was 60.9 % ( 14 / 23 ) and 50 % ( 20 / 40 ) in the benign lesions of other VF .

4 . The expression site : ( 1 ) In benign lesions of VF , the majority of the cells were expressed in the membrane of epithelial cells , and a small number was expressed in the nucleus .

5 . In benign lesions of VF , there was no significant difference in mRNA level and protein level in the expression of mRNA and protein level , but there was no statistical significance .

Conclusion :

1 . In this study , the expression of GPRS 30 was first observed in rat and human vocal cords by the method of Rt - PCR and immunohistochemistry .

2 . There was no expression in lamina propria and myometrium , mainly expressed in VF epithelial cells .
Moreover , the expression site of GPRS 30 is related to the environment in which benign lesions are mainly expressed in the cell membrane , while the white spot and the peripheral vocal cord tissue GPRS 30 are mainly located in the nucleus .

3 . gprs 30 may be involved in the vocal cord inflammatory response of women in menstrual cycles due to e2 fluctuations .
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R767

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本文編號(hào)：2014510