本文選題：miR-21 + 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤�。� 參考：《南昌大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：目的:研究微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,RB)Weri-RB-1細(xì)胞惡性生物學(xué)行為中的影響作用,及其與同源磷酸酶-張力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/AKT信號(hào)通路、p53/p21信號(hào)通路之間的關(guān)系。方法:本研究采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)、實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)(qRT-PCR)對(duì)RB及Weri-RB-1細(xì)胞miR-21的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè);并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)、免疫蛋白印跡法對(duì)細(xì)胞凋亡比率及相關(guān)蛋白表達(dá)水平進(jìn)行了研究。結(jié)果:與視網(wǎng)膜正常組織相比,RB組織中miR-21過(guò)表達(dá),并具有顯著差異(P0.01)。在Weri-Rb-1細(xì)胞中,miR-21抑制劑明顯降低了miR-21的水平,并降低了細(xì)胞存活率(P0.01)。與miR-21陰性對(duì)照組(negative control,NC)相比,miR-21抑制劑增加了細(xì)胞凋亡比率,并提高了凋亡相關(guān)蛋白PDCD4和Bax的表達(dá)(P0.01)。而且mi R-21抑制劑不僅抑制了細(xì)胞的遷移與侵襲,而且降低了MMPs的蛋白表達(dá)水平(P0.01)。此外miR-21抑制劑還通過(guò)調(diào)節(jié)p53/p21蛋白通路,促進(jìn)了細(xì)胞的周期阻滯。結(jié)論:miR-21抑制劑通過(guò)干擾PTEN/PI3K/AKT信號(hào)通路以及p53/p21蛋白通路,抑制了細(xì)胞的存活、遷移與侵襲以及細(xì)胞周期阻滯。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:RB中miR-21為促癌基因,為RB的有效治療提供了新的作用靶點(diǎn)與方法。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of microRNA-21 miR-21) on the malignant biological behavior of retinoblastomaoma RBeri-RB-1 cells and its relationship with the homologous phosphatase tension protein PTENU / phosphatidylinositol 3 kinase PI3KN / AKT signaling pathway p53p21. Methods: the expression of miR-21 in RB and Weri-RB-1 cells was detected by liposome transfection and real-time quantitative PCR, and the expression of miR-21 in RB and Weri-RB-1 cells was detected by flow cytometry. The rate of apoptosis and the expression of related proteins were studied by Western blot. Results: the expression of miR-21 in RB was significantly higher than that in normal retina (P 0.01). In Weri-Rb-1 cells, the inhibitor of miR-21 significantly reduced the level of miR-21 and the cell survival rate. Compared with the negative control group (miR-21 negative control group), mmiR-21 inhibitor increased the apoptosis rate and increased the expression of PDCD4 and Bax. Moreover, mi R-21 inhibitor not only inhibited cell migration and invasion, but also decreased the protein expression level of MMPs. In addition, miR-21 inhibitors promote cell cycle arrest by regulating the p53/p21 pathway. Conclusion the cell survival, migration, invasion and cell cycle arrest were inhibited by interfering with the PTEN / PI3K / AKT signaling pathway and the p53/p21 protein pathway. These results indicate that miR-21 is the oncogene and provides a new target and method for the effective treatment of RB.
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R739.7

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本文編號(hào)：2002724