Dopamine抑制人喉癌Hep-2細(xì)胞增殖作用的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2018-05-03 08:14
本文選題:喉癌 + 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 ; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文
【摘要】:目的研究?jī)翰璺影奉?lèi)神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺(Dopamine)對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞的增殖抑制作用并探討其可能的作用機(jī)制。 方法將Hep-2細(xì)胞接種于含10%小牛血清、100U/mL雙抗(青霉素、鏈霉素)的DMEM培養(yǎng)基中,37℃、飽和濕度、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h,三種不同藥物濃度(0.05、0.5、5.0mmol/L)的Dopamine分別處理Hep-2細(xì)胞,采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)檢測(cè)Dopamine對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖活性的影響;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析Dopamine對(duì)Hep-2細(xì)胞周期分布的影響;Hoechst NO.33258熒光染色法熒光倒置顯微鏡觀察Hep-2細(xì)胞凋亡形態(tài);酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)濃度。 結(jié)果MTT法檢測(cè)提示不同濃度的Dopamine作用于Hep-2細(xì)胞時(shí),濃度在0.5~5mmol/L時(shí),對(duì)Hep-2細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用(P0.05),,但當(dāng)濃度低于0.5mmol/L時(shí),則無(wú)明顯抑制作用(P0.05)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,隨著Dopamine濃度的增加,處于G0~G1期細(xì)胞的比例逐漸升高(P0.05),最高濃度時(shí)較空白對(duì)照組細(xì)胞比例升高了(18.28±6.66)%(P0.05);S期細(xì)胞的比例逐漸降低,最高濃度時(shí)較空白對(duì)照組細(xì)胞比例降低了(17.00±1.23)%(P0.05);而G2~M期細(xì)胞比例變化則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。ELISA法提示最高濃度(5mmol/L)時(shí)VEGF濃度較空白對(duì)照組下降了38.5%(P0.05)。熒光倒置顯微鏡可觀察到染色質(zhì)邊集、核碎裂等典型細(xì)胞凋亡形態(tài)。 結(jié)論Dopamine可能通過(guò)抑制內(nèi)生性VEGF的表達(dá)對(duì)Hep-2細(xì)胞的增殖有抑制作用,有望成為治療喉癌的有效藥物。
[Abstract]:Objective to study the inhibitory effect of dopamine on the proliferation of human laryngeal carcinoma Hep-2 cells and its possible mechanism. Methods Hep-2 cells were inoculated into DMEM medium containing 10% bovine serum 100 U / mL double antibody (penicillin, streptomycin) at 37 鈩
本文編號(hào):1837715
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