本文選題：角膜膠原交聯(lián)術(shù) + 角膜新生血管　； 參考：《遵義醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文

【摘要】：目的:本研究擬通過觀察兔眼堿燒傷誘導(dǎo)角膜新生血管模型經(jīng)核黃素聯(lián)合紫外光A行角膜膠原交聯(lián)(corneal collagen cross linking,CXL)后新生血管的生長,探索CXL對角膜新生血管的影響及機制。方法:健康家兔60只,隨機分為6組,每組10只,右眼為實驗眼;A組為單純堿燒傷對照組,B、C、D、E、F組為實驗組,其中B組為堿燒傷后即刻標準CXL(標準CXL方法為紫外光光照30分鐘)、C組為堿燒傷后即刻CXL紫外光光照時間15分鐘、D組為堿燒傷后即刻CXL紫外光光照時間45分鐘、E組為堿燒傷后1天標準CXL、F組為堿燒傷后3天標準CXL,表麻下予1 mol/L的氫氧化鈉建立堿燒傷模型及膠原交聯(lián)干預(yù)各組模型。堿燒傷模型建成后分別于第4、7、10、14天觀察并記錄角膜新生血管面積、角膜水腫、感染、潰瘍,于第7、14天分別各取5只家兔角膜組織,采用Western-Blotting分析VEGF、MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表達量。結(jié)果:1.術(shù)后裂隙燈觀察:第14天處死各組家兔,單純堿燒傷對照組10眼中有5只眼(50%)發(fā)生角膜中央基質(zhì)溶解、后彈力層膨出;實驗組共50只眼,其中有7只眼(14%)出現(xiàn)角膜中央變薄,3只眼(6%)出現(xiàn)角膜溶解,各組均未發(fā)生角膜穿孔。2.角膜新生血管(CRNV)面積比較:第4天:各組間比較無顯著差異(P0.05);第7天:各組間比較有顯著差異(P0.05),其中以A組CRNV面積最大、D組CRNV面積最小;第10天:A與D組、A與E組間相比有顯著差異(P0.05),D、E組CRNV面積較A組顯著減小。第14天:A與D組、B與D組間及F與D組間相比較有顯著差異(P0.05),D組較A、B、F組的CRNV面積顯著減小。3.Werstern-Blotting檢測VEGF、MMP-2、MMP-9和TIMP-1表達量的比較:在兔眼角膜堿燒傷后第7天,對照組與各實驗組之間VEGF、MMP-2在角膜組織中的表達量無顯著差異(P0.05);MMP-9的表達量在A組顯著低于各個實驗組(P0.05);TIMP-1的表達量比較中A組顯著低于D、F組(P0.05);在角膜堿燒傷后第14天,對照組A組角膜組織中VEGF、MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表達量均較前上升,其中對照組A組VEGF表達量顯著高于各個實驗組(P0.05),A組角膜中MMP-2表達量顯著高于B、D、E組(P0.05);A組角膜組織中MMP-9、TIMP-1表達量均高于各個實驗組,但未達到顯著差異水平(P0.05)。結(jié)論:1.本研究進一步證實了紫外光A聯(lián)合核黃素膠原交聯(lián)具有抗角膜基質(zhì)溶解的作用;2.紫外光A聯(lián)合核黃素膠原交聯(lián)45分鐘可以減輕角膜新生血管的形成,其可能通過下調(diào)VEGF、MMP-2、MMP-9的表達而抑制角膜新生血管生長。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect and mechanism of CXL on corneal neovascularization by observing the growth of corneal neovascularization induced by alkali burn in rabbits by riboflavin combined with ultraviolet light A (UV).Methods: sixty healthy rabbits were randomly divided into 6 groups (n = 10 in each group).Group B was the standard CXLimmediately after alkali burn (the standard CXL method was UV illumination for 30 minutes, group C was UV light time immediately after alkali burn for 15 minutes, group D was for 45 minutes CXL ultraviolet illumination time immediately after alkali burn, group E was treated with ultraviolet light for 30 minutes after alkali burn).The model of alkali burn was established 1 day after alkali burn with sodium hydroxide of 1 mol/L in standard CXLF group 3 days after alkali burn and collagen crosslinking was used to interfere each group model.The corneal neovascularization area, corneal edema, infection and ulcer were observed and recorded on the 4th day, 7th day, 10th day after the establishment of alkali burn model. The corneal tissues of 5 rabbits were taken respectively on day 714, and the expression of TIMP-1 was analyzed by Western-Blotting.The result is 1: 1.Postoperative slit lamp observation: the rabbits of each group were killed on the 14th day, 5 eyes of 10 eyes of the control group were treated with simple soda burn, and 50 eyes of the control group were treated with corneal central stroma dissolution and posterior elastic layer swelling, 50 eyes of the experimental group were observed.There were 7 eyes with central corneal thinning, 3 eyes with central corneal thinning and 6 eyes with corneal dissolution, and no corneal perforation occurred in all groups.Comparison of corneal neovascularization area: on the 4th day, there was no significant difference among the three groups (P 0.05), and on the 7th day, there was significant difference between the groups (P 0.05). The CRNV area of group A was the largest and that of group D was the smallest.On the 10th day, there was a significant difference between group A and group D in the area of CRNV between group A and group E. the area of CRNV in group E was significantly lower than that in group A.On the 14th day, there were significant differences between group B and D and between group F and group D. The area of CRNV in group D was significantly reduced than that in group A and group D. Werstern-blotting was used to detect the expression of VEGF, MMP-2, MMP-9 and TIMP-1: on the 7th day after corneal alkali burn, the expression of VEGF MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 in rabbit cornea were measured by Werstern-blotting.There was no significant difference in the expression of VEGF MMP-2 in corneal tissue between the control group and the experimental groups. The expression of VEGF MMP-2 in group A was significantly lower than that in group A (P 0.05) and in group A was significantly lower than that in group D (P 0.05), and on the 14th day after corneal alkali burn, the expression of VEGF MMP-2 in group A was significantly lower than that in group D (P 0.05).In group A, the expression of VEGF, MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 in corneal tissue were increased.The expression of VEGF in group A was significantly higher than that in group A (P 0.05). The expression of MMP-9 and TIMP-1 in cornea of group A was significantly higher than that of group A (P 0.05), but the expression of TIMP-1 in cornea of group A was significantly higher than that of group A (P 0.05), but the expression of TIMP-1 in cornea of group A was significantly higher than that of group A (P 0.05).Conclusion 1.This study further confirmed that UV A combined with riboflavin collagen crosslinking can inhibit corneal stroma dissolution.Ultraviolet A combined with riboflavin collagen crosslinked for 45 minutes can reduce corneal neovascularization, which may inhibit corneal neovascularization by down-regulating the expression of VEGF MMP-2 and MMP-9.
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R779.1

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本文編號：1751298