本文選題：耳聾　切入點：生物量　出處：《大連醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:研究聽力正常老年人與老年性耳聾患者耳道微生態(tài)系菌群生物量與生物多樣性,探索耳道微生態(tài)系菌群構成,為深入研究各個微生態(tài)細菌群協(xié)同作用打下堅實的基礎,也為臨床耳道感染的防治和指導抗生素精準使用提供依據(jù)。方法:1.選擇2015年1月到2016年1月于大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院耳鼻喉頭頸外科門診就診的人群29例,分為二組,老年性耳聾組(耳聾組)和聽力正常組(對照組)。耳聾組患者13例,對照組患者16例。二組患者就診前的3個月各有2例有抗生素使用史,分別為阿米卡星、阿奇霉素、頭孢菌素(劑量和出廠商不詳),其余沒有。2.采用傳統(tǒng)稀釋滴定培養(yǎng)法、PCR-DGGE法檢測聽力正常老年人和老年性耳聾患者耳道微生態(tài)系菌群的生物量和多樣性。3.采用分區(qū)劃線分離培養(yǎng)、全自動微生物鑒定與藥敏系統(tǒng),對老年人耳道微生態(tài)系菌群進行藥物敏感實驗。結果:1.老年人耳道微生態(tài)系菌群生物量結果顯示,經(jīng)傳統(tǒng)稀釋滴定培養(yǎng),計數(shù)106稀釋倍數(shù)下,耳聾組菌落數(shù)為71.5±10.73cfu/g,正常對照組菌落數(shù)為72.83±6.24cfu/g,兩組比較,耳聾組與正常對照組菌落數(shù)無顯著差異(p0.05);即耳聾組與正常對照組菌落數(shù)生物量一致。2.老年人耳道微生態(tài)系菌群需氧和厭氧培養(yǎng)菌落數(shù)結果顯示,耳聾組需氧培養(yǎng)菌落數(shù)為77.67±8.50cfu/g,厭氧培養(yǎng)菌落數(shù)為65.33±10.7cfu/g;對照組需氧培養(yǎng)菌落數(shù)為71.67±3.06cfu/g,厭氧培養(yǎng)菌落數(shù)為74.00±9.17cfu/g,兩組比較,沒有統(tǒng)計學差異(p0.05);即耳聾組需氧培養(yǎng)菌落數(shù)與對照組需氧培養(yǎng)菌落數(shù)一致,耳聾組厭氧培養(yǎng)菌落數(shù)與對照組厭氧培養(yǎng)菌落數(shù)一致,說明兩組的菌群分布基本一致。3.老年人耳道微生態(tài)系菌群形態(tài)樣品經(jīng)培養(yǎng)24h和48h后,觀察cba平板的菌落形態(tài),耳聾組需氧培養(yǎng)可見圓形凸起,邊緣整齊,白色,無溶血環(huán)的菌落;耳聾組厭氧培養(yǎng)可見圓形凸起,表面光滑,淡黃色,菌落周圍有全透明溶血環(huán)的菌落和白色,無溶血環(huán)的菌落;正常對照組需氧培養(yǎng)可見圓形凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,白色菌落;正常對照組厭氧培養(yǎng)可見圓形凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,白色菌落。挑取菌落,經(jīng)革蘭染色,顯微鏡下觀察,可見耳聾組需氧細菌形態(tài)為革蘭陽性、矛頭狀成對排列、短鏈狀排列、無芽孢、無莢膜;耳聾組厭氧細菌形態(tài)為革蘭陽性、葡萄狀排列、無芽孢、無莢膜;正常對照組需氧細菌形態(tài)為革蘭氏陽性,矛頭狀成對排列、短鏈狀排列、無芽孢、無莢膜;正常對照組厭氧細菌形態(tài)為革蘭陽性、葡萄狀排列無芽孢、無莢膜。4.老年人耳道微生態(tài)系菌群核酸dna總量變化結果顯示,經(jīng)qiaampdnastoolminikit提取,分光光度計檢測,計算后,可見耳聾組總核酸dna為281.50±26.60(mg/ml),正常對照組總核酸dna為366.50±28.62(mg/ml),兩組比較,差異顯著,具有統(tǒng)計學意義(p0.05),耳聾組總核酸dna量低,正常對照組核酸dna總量高,說明耳聾患者的微生態(tài)菌群的數(shù)量少。5.老年人耳道微生態(tài)系菌群pcr-dgge電泳與聚類分析結果結果顯示,二組耳道微生態(tài)系菌群的pcr-dgge電泳圖譜可見,耳聾組患者的優(yōu)勢條帶為28.46±2.76條;正常對照組的優(yōu)勢條帶為29.88±2.96條,兩組比較,優(yōu)勢條帶數(shù)沒有差別(P0.05),但是其條帶的明暗程度不同,說明在二組同一細菌的含量有差別。6.老年人耳道微生態(tài)系菌群多樣性分析結果顯示,利用Quantity One軟件對耳聾組與對照組耳道菌群樣本PCR-DGGE圖譜進行UPGMA樹狀圖聚類分析,從二組耳道微生態(tài)系菌群的PCR-DGGE電泳圖譜的凝膠聚類分析可見,耳聾組與正常對照組微生態(tài)菌群聚為一類,說明兩組的微生態(tài)菌群的多樣性是一致的。7.老年人耳道微生態(tài)系菌群特異性條帶測序結果結果顯示,利用測序方法,對老年人耳道微生態(tài)系菌群檢測可見:表皮葡萄球菌、山羊葡萄球菌、里昂葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、dentisani鏈球菌、argensis葡萄球菌、痤瘡丙酸桿菌和tengchongensis棲熱菌。8.兩組所分離培養(yǎng)的菌落進行自動鑒定和藥敏實驗結果結果顯示,對老年人耳道微生態(tài)系菌群發(fā)現(xiàn):兩組所分離的菌落藥敏實驗結果表明,糞腸球菌對青霉素、氨芐西林敏感,對氨基糖苷類抗生素耐藥,對萬古霉素敏感;金黃色葡萄球(耐甲氧西林菌株MRSA)菌對青霉素、慶大霉素、紅霉素、四環(huán)素耐藥,對克林霉素、利福霉素耐藥,對萬古霉素、呋喃妥因和替考拉明敏感;表皮葡萄球菌對青霉素、紅霉素、復方新諾明耐藥,萬古霉素、利奈唑胺敏感;肺炎鏈球菌對紅霉素、阿奇霉素、對克林霉素耐藥、四環(huán)素、復方新諾明耐藥,對萬古霉素、利奈唑胺敏感。結論1.老年性耳聾患者與聽力正常老年人耳道微生態(tài)系菌群需氧和厭氧的種類沒有明顯改變,耳聾組與正常對照組菌落數(shù)生物量一致,耳聾組總核酸DNA量低,正常對照組核酸DNA總量高,耳聾患者的微生態(tài)菌群的數(shù)量少。2.老年性耳聾患者與聽力正常老年人耳道微生態(tài)系菌群的多樣性是一致的。3.老年人耳道菌群細菌未見特殊耐藥性變異株。
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【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R764.436

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本文編號：1693806