本文選題：非聚焦超聲　切入點(diǎn)：鼓室給藥　出處：《中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2015年博士論文

【摘要】：目的：應(yīng)用聽(tīng)性腦干反應(yīng)(auditory brainstem response, ABR)、耳蝸熒光染色等方法觀察低強(qiáng)度的非聚焦超聲(Non-focused ultrasound, NFU)作用于豚鼠圓窗膜在輔助經(jīng)鼓室—內(nèi)耳給藥中的安全性。應(yīng)用液相質(zhì)譜法檢測(cè)豚鼠外淋巴液中的藥物濃度,觀察NFU對(duì)圓窗膜的促滲作用及其藥代動(dòng)力學(xué)改變。進(jìn)一步明確NFU輔助經(jīng)鼓室—內(nèi)耳給藥的有效性,以期探索該技術(shù)的臨床應(yīng)用價(jià)值與可行性。方法：1、聽(tīng)覺(jué)電生理測(cè)試：選取健康豚鼠,先行測(cè)量ABR閾值和Ⅲ波潛伏期,隨后分組接受不同強(qiáng)度和時(shí)間的NFU照射,完成后30分鐘再次接受ABR檢查。對(duì)照射前后的ABR閾值和Ⅲ波潛伏期進(jìn)行比較,了解有無(wú)聽(tīng)力損害發(fā)生。2、耳蝸毛細(xì)胞熒光染色觀察：將豚鼠分組接受不同強(qiáng)度的NFU短時(shí)間照射,隨后取出聽(tīng)泡,對(duì)耳蝸進(jìn)行AO/EB染色,基底膜鋪片,熒光顯微鏡下觀察胞核的染色,了解細(xì)胞受損的情況。3、外淋巴高效液相質(zhì)譜儀分析：首先建立液相質(zhì)譜儀濃度-面積曲線。在豚鼠的聽(tīng)泡內(nèi)注入地塞米松溶液,并使用不同強(qiáng)度的NFU照射聽(tīng)泡。10分鐘后取出聽(tīng)泡,提取外淋巴液進(jìn)行液相質(zhì)譜檢測(cè),計(jì)算濃度并分組比較,分析NFU照射對(duì)外淋巴液中藥物濃度的影響。結(jié)果：1、電生理檢查發(fā)現(xiàn),在本研究設(shè)定強(qiáng)度下(1.0-3.5 W/cm2) 1MHz的NFU照射1-3min后,豚鼠ABR反應(yīng)閾、潛伏期與照射前相比并未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的改變(p0.05) 。2、耳蝸基底膜鋪片熒光染色觀察,1-3.5W/cm2強(qiáng)度下1MHz的NFU照射3mmin后,豚鼠耳蝸?lái)敾�、中回與底回均未見(jiàn)毛細(xì)胞明顯受損,與對(duì)照組比較,毛細(xì)胞損傷的數(shù)量未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異(p0.05)。3、根據(jù)液相質(zhì)譜儀的檢測(cè)結(jié)果,照射強(qiáng)度為2W/cm2組外淋巴液的平均藥物濃度為213.07ng/ml,3W/cm2組的平均濃度為568.5ng/ml,3.5W/cm2組的平均濃度為1635.61ng/ml,而空白對(duì)照組的平均濃度為86.57ng/ml。各組之間比較,p值均0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯,最大濃度差可達(dá)18.89倍。結(jié)論：1、3.5W/cm2強(qiáng)度以下的NFU短時(shí)程照射不會(huì)造成豚鼠ABR的顯著改變。短時(shí)程、低強(qiáng)度的非聚焦超聲聽(tīng)泡照射這一無(wú)損傷技術(shù)對(duì)豚鼠的聽(tīng)力是安全的。2、低于3.5W/cm2強(qiáng)度的非聚焦超聲短時(shí)暴露未見(jiàn)導(dǎo)致豚鼠毛細(xì)胞的形態(tài)學(xué)損傷。3、非聚焦超聲輔助可以有效提高圓窗膜的通透性,這一促滲透作用可以增加經(jīng)鼓室—內(nèi)耳藥物投放的有效性,相同照射時(shí)間下,該效應(yīng)與超聲的強(qiáng)度呈正相關(guān)。
[Abstract]:Objective: to observe the safety of low-intensity non-focused ultrasound (NFU) acting on guinea pig round window membrane in transtympanic and inner ear administration by means of auditory brainstem response (ABR), auditory brainstem response (ABR) and cochlear fluorescence staining. Detection of drug concentration in perilymph of guinea pigs, To observe the effect of NFU on the permeation of circular window membrane and its pharmacokinetic changes, to further determine the effectiveness of NFU assisted transtympanic and inner ear administration. In order to explore the clinical application value and feasibility of the technique, methods: 1, auditory electrophysiological test: select healthy guinea pigs, first measure the threshold value of ABR and the latency of wave 鈪，

本文編號(hào)：1654394