本文選題：視神經(jīng)　切入點：視網(wǎng)膜　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的：視神經(jīng)損傷是眼科臨床常見的眼外傷，嚴(yán)重者常導(dǎo)致視力永久性的喪失，是重要的致盲性眼病之一。目前臨床上治療本病主要以藥物主，但治療效果不明顯，且副作用較多，因此尋找一種有效的治療藥物備受眼科學(xué)者的關(guān)注。近年來國內(nèi)外學(xué)者在腦損傷的研究中發(fā)現(xiàn)黃體酮替代治療可延緩神經(jīng)細胞的凋亡，減輕水腫，促進神經(jīng)髓鞘的合成，對神經(jīng)系統(tǒng)的損傷和退行性疾病的治療有重要意義。黃體酮作為一種能在神經(jīng)系統(tǒng)合成的神經(jīng)活性甾體，其對神經(jīng)系統(tǒng)的保護作用，越來越受到臨床的關(guān)注。但有關(guān)黃體酮針對視神經(jīng)損傷修復(fù)方面的報道很少見。因此本實驗通過建立大鼠視神經(jīng)損傷模型，給予黃體酮治療，觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的病理形態(tài)，并應(yīng)用免疫組化方法及計算機圖像分析技術(shù)對胰島素樣生長因子-1（Insulin-like growth factor-1, IGF-1）及水通道蛋白-4（Aquaporin-4,AQP4）的表達進行半定量測定，探討黃體酮對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的保護機制，為視神經(jīng)損傷的治療提供實驗依據(jù)。 方法：清潔級健康雄性SD大鼠50只，體重為200g±20g，眼部檢查無眼疾。隨機分為3組：正常組10只（20眼）用于正常對照（不予處理）；對照組20只（右眼制備成視神經(jīng)不完全損傷模型，即沿大鼠顳側(cè)眼球暴露視神經(jīng)，在球后2mm處用78g反向鑷夾持視神經(jīng)20s，1小時后開始給予8mg/kg蒸餾水腹腔注射，每日一次，至實驗結(jié)束）；治療組20只（右眼制備成視神經(jīng)不完全損傷模型，即沿大鼠顳側(cè)眼球暴露視神經(jīng)，在球后2mm處用78g反向鑷夾持視神經(jīng)20s，1小時后開始給予8mg/kg黃體酮注射液腹腔注射，每日一次，至實驗結(jié)束）。按傷后1天、3天、7天、14天、28天分五個時間點，各時間點每組分別取4只眼的視網(wǎng)膜，用與HE染色觀察視網(wǎng)膜的形態(tài)學(xué)變化和應(yīng)用免疫組織化學(xué)法半定量檢測IGF-1及AQP4的平均光密度值。實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，結(jié)果采用方差分析和兩樣本t檢驗，SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果： 1HE染色結(jié)果 1.1正常組視網(wǎng)膜的內(nèi)界膜完整、平滑，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞呈卵圓形，細胞大小一致，核清晰，輪廓規(guī)則，細胞邊界清楚，內(nèi)、外叢狀層的厚度及染色均勻。 1.2對照組損傷后1天，視網(wǎng)膜水腫，神經(jīng)節(jié)細胞層及內(nèi)、外核層的細胞排列稍紊亂，細胞間隙增大。損傷后3天，視網(wǎng)膜的水腫加重，神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目變少，，多數(shù)可見空泡樣改變，胞核呈固縮狀態(tài)，染色質(zhì)染色不均，內(nèi)、外核層細胞排列得疏松、紊亂。損傷后7天視網(wǎng)膜的水腫有減輕，大部分神經(jīng)節(jié)細胞可見空泡樣改變，細胞數(shù)目明顯變少，內(nèi)、外核層的細胞紊亂程度加重。損傷后14天視網(wǎng)膜的水腫略減輕，細胞形態(tài)和數(shù)目于7天組相近，未見進一步大量減少。 1.3治療組損傷后1天，視網(wǎng)膜略見水腫，節(jié)細胞層未見顯著變化，內(nèi)、外核層的細胞排列呈輕微紊亂，內(nèi)核層細胞間隙稍變大。損傷后3天，視網(wǎng)膜有水腫，少數(shù)節(jié)細胞可見空泡樣改變，內(nèi)、外核層的細胞較對照組整齊、緊密。損傷后7天，和對照組相比，視網(wǎng)膜水腫顯著減輕，多數(shù)細胞較整齊排列。損傷后14天，視網(wǎng)膜水腫減輕，視網(wǎng)膜厚度與正常組接近。各時間點節(jié)細胞形態(tài)、數(shù)目的變化及視網(wǎng)膜的水腫程度較對照組均顯著減弱。 2免疫組化結(jié)果 2.1視網(wǎng)膜組織中IGF-1的表達在正常視網(wǎng)膜組織中IGF-1呈弱陽性表達，平均光密度值為0.0716±0.0035，各時間點無變化。對照組在損傷后的1天、3天、7天時IGF-1的表達分別為0.0921±0.0010、0.1303±0.0044、0.1502±0.0054，均較正常組升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05），7天后表達下降，14天時接近于正常組，平均光密度值為0.0750±0.0025，無統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05）。治療組與對照組相比，在損傷后各時間點IGF-1的陽性表達均明顯增強，平均光密度值分別為0.1181±0.0066、0.1999±0.0064、0.2855±0.0074、0.1809±0.0075、0.1041±0.0027，有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。 2.2視網(wǎng)膜組織中AQP4的表達在正常視網(wǎng)膜組織中AQP4呈弱陽性表達，平均光密度值為0.0782±0.0011，各時間點無變化。對照組AQP4在損傷后1天表達開始升高，3天時表達最高，7天開始下降，14天仍高于正常組，平均光密度值分別為0.1946±0.0095、0.4324±0.0078、0.3812±0.0042、0.2066±0.0089，28天時接近于正常組，除28天較正常組無統(tǒng)計學(xué)意（p0.05），其余各時間點較正常組具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。治療組與對照組相比，在實驗的1天、3天、7天、14天AQP4的陽性表達均明顯降低，平均光密度值分別為0.1199±0.0044、0.3205±0.0058、0.2306±0.0145、0.1341±0.0025，高于正常組，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p 0.05)，28天時差異無統(tǒng)計學(xué)意（p0.05）。 結(jié)論： 1正常視網(wǎng)膜組織中AQP4呈弱陽性表達，大鼠視神經(jīng)不完全損傷后視網(wǎng)膜組織中AQP4表達增強，AQP4參與了視神經(jīng)損傷的過程。 2正常視網(wǎng)膜組織中IGF-1呈弱陽性表達，大鼠視神經(jīng)不完全損傷后早期視網(wǎng)膜組織中IGF-1表達增強，IGF-1參與了視神經(jīng)損傷的過程。 3應(yīng)用黃體酮治療能夠降低大鼠視神經(jīng)不完全損傷后視網(wǎng)膜組織中AQP4的表達。 4應(yīng)用黃體酮治療能夠持續(xù)升高大鼠視神經(jīng)不完全損傷后視網(wǎng)膜組織中IGF-1的表達。 5黃體酮對視網(wǎng)膜細胞再生修復(fù)有一定的促進作用。
[Abstract]:Objective: optic nerve injury is a common clinical ocular trauma, which often leads to permanent loss of visual acuity, is one of the important cause of blindness. At present the clinical treatment of the disease mainly on drugs, but the treatment effect is not obvious, and more side effects, so to find an effective drug treatment by ophthalmologists attention. In recent years the domestic and foreign scholars in the study of brain injury was found in apoptosis, progesterone replacement therapy can delay the nerve cell edema, promote the synthesis of myelin, have important significance for treatment of damage and degenerative disease of the nervous system. Progesterone is a steroid synthesis in neural activity of the nervous system. The protective effect on the nervous system, more and more clinical attention. The effects of progesterone on optic nerve injury repair reports are rare. Therefore this experiment through the establishment of rat optic nerve The injury model, given progesterone, observe the pathological retinal ganglion cells, and immunohistochemistry method and image analysis technology of insulin-like growth factor -1 (Insulin-like growth factor-1, IGF-1) and aquaporin -4 (Aquaporin-4, AQP4) by semi quantitative expression, the mechanism of the protective effect of progesterone on retinal ganglion cells and provide experimental basis for the treatment of optic nerve injury.
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本文編號：1653136