發(fā)布時間：2018-03-13 20:12

  本文選題：糖尿病性白內(nèi)障　切入點：晶狀體蛋白　出處：《吉林大學》2012年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：糖尿病性白內(nèi)障是糖尿病患者眼部最常見的并發(fā)癥之一，也是糖尿病患者致盲的重要原因。與年齡相關(guān)性白內(nèi)障相比，糖尿病患者發(fā)病較早，且進展迅速。 在基因水平上對白內(nèi)障形成因素的研究較多,而有關(guān)蛋白質(zhì)組學的研究則很少見,但是只局限于基因水平來研究白內(nèi)障的形成是遠遠不夠的,通過研究由基因編碼和翻譯的蛋白質(zhì),才可能真正揭示白內(nèi)障的發(fā)病機制。后基因組時代,蛋白質(zhì)組學作為功能基因組學研究的核心技術(shù)之一,已成為生物醫(yī)學領(lǐng)域強大的技術(shù)支撐,并為白內(nèi)障疾病的研究提供了一個新的平臺。目的： 本實驗研究采用蛋白質(zhì)組學方法對糖尿病性白內(nèi)障晶狀體核不同組分晶狀體蛋白的組成進行研究，探討糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)病機制。方法： 運用小劑量鏈脲佐菌素（STZ）+特殊膳食喂養(yǎng)法飼養(yǎng)同一周齡的ＳD大鼠20只，，每組10只，另取10只同周齡SD大鼠作對照組。后分別取造模后6周、20周及對照組大鼠晶狀體各10只作為樣本。提取晶狀體核中的水溶性蛋白，應(yīng)用蛋白質(zhì)組學手段，即熒光差異凝膠電泳（2D-DIDG）、圖像分析、MALDI TOF MS分析及數(shù)據(jù)庫搜索，進行差異表達蛋白質(zhì)的研究。結(jié)果： 熒光差異凝膠電泳結(jié)果顯示,糖尿病性白內(nèi)障晶狀體核中水溶性蛋白大部分為相對分子質(zhì)量14400~97400, pI3~9。高豐度蛋白質(zhì)斑點相對分子質(zhì)量分布在20000~31000, pI4~7區(qū)域內(nèi)。糖尿病性白內(nèi)障晶狀體蛋白二維電泳圖識別出65個差異點，其中上調(diào)表達39個，下調(diào)表達26個。其中差異明顯的點（差異量達3倍以上）共19個。選取重復(fù)性及分辨率較好的圖譜進行后續(xù)的圖譜分析。鑒定出5種蛋白質(zhì),其中2種蛋白質(zhì)表達上調(diào)(β-A3晶狀體蛋白、β-A4晶狀體蛋白)，3種蛋白質(zhì)表達下調(diào)(β-B2晶狀體蛋白、α-A2晶狀體蛋白、α-B2晶狀體蛋白)。結(jié)論： 本研究獲得了糖尿病性白內(nèi)障大鼠蛋白質(zhì)差異凝膠電泳圖譜，并成功鑒定了部分蛋白斑點,其中2種蛋白質(zhì)表達上調(diào)(β-A3晶狀體蛋白、β-A4晶狀體蛋白)，3種蛋白質(zhì)表達下調(diào)(β-B2晶狀體蛋白、α-A晶狀體蛋白、α-B晶狀體蛋白)，研究有關(guān)糖尿病性白內(nèi)障形成過程中蛋白質(zhì)表達的差異，從新的角度探討糖尿病性白內(nèi)障形成的病理機制,以期為白內(nèi)障的預(yù)防和藥物治療提供更多的依據(jù)和途徑。
[Abstract]:Diabetic cataract is one of the most common complications in the eyes of diabetic patients, and it is also an important cause of blindness in diabetic patients. There are many studies on the factors of cataract formation at the gene level, while proteomics studies are rare, but it is far from enough to study cataract formation only at the gene level. By studying proteins encoded and translated by genes, it is possible to truly reveal the pathogenesis of cataract. In the post-genome era, proteomics is one of the core technologies in functional genomics. Has become a powerful technical support in the field of biomedicine, and provides a new platform for the research of cataract diseases. In this study, proteomics was used to study the composition of lens nuclei of diabetic cataract, and to explore the pathogenesis of diabetic cataract. Twenty Sprague-Dawley rats of the same week age were fed with a special diet with low dose streptozotocin (STZ) for 10 rats in each group. In addition, 10 SD rats of the same age were taken as control group. The lens samples were taken from the rats 6 weeks to 20 weeks after model making and 10 rats from the control group respectively. The water-soluble protein in the lens nucleus was extracted, and the proteomics method was used to extract the water-soluble protein from the lens nucleus. The results showed that: fluorescence differential gel electrophoresis 2D-DIDGG, image analysis, MALDI TOF MS analysis and database search were used to study the differential expression of proteins. The results of fluorescence differential gel electrophoresis showed that, Most of the water-soluble proteins in the lens nucleus of diabetic cataract were relative molecular weight 14400 ~ 97400 and Pi _ 3N _ 9. The distribution of relative molecular weight of high abundance protein spots was in the region of 20000n31000, pI4~7. Two-dimensional Electrophoretic Mapping of Diabetic Cataract Crystalloprotein. Don't make 65 differences, Among them, 39 were up-regulated and 26 were down-regulated. Among them, there were 19 points with obvious difference (the amount of difference was more than 3 times). Two proteins were up-regulated (尾 -A3, 尾 -A4, 尾 -A4) and three proteins were down-regulated (尾 -B2, 偽 -A2, 偽 -B2, 偽 -B2, 偽 -B2). In this study, the protein differential gel electrophoresis patterns of diabetic cataract rats were obtained, and some protein spots were successfully identified. Two proteins were up-regulated (尾 -A3, 尾 -A4, 尾 -A4, 尾 -A4, 尾 -A4, 尾 -B2, 偽 -A, 偽 -B, 偽 -B, etc.) in order to study the difference of protein expression in diabetic cataract formation, and the expression of 尾 -A3, 尾 -A4 and 尾 -A4 were down-regulated (尾 -B2, 偽 -A, 偽 -B, 偽 -B). To explore the pathological mechanism of diabetic cataract from a new point of view, in order to provide more evidences and approaches for the prevention and drug treatment of cataract.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R776.1;R587.1

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本文編號：1607959