發(fā)布時間：2018-03-03 08:21

  本文選題：叔丁基過氧化氫　切入點：葉黃素　出處：《中國病理生理雜志》2016年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:觀察葉黃素(lutein)對叔丁基過氧化氫(t-BHP)處理的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGC-5細胞系)的保護效應(yīng)并探討其作用機制。方法:用免疫熒光染色檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)特異性蛋白Brn-3和神經(jīng)微管結(jié)合蛋白MAP-2的表達來鑒定RGC-5細胞;將RGC-5細胞隨機分為對照組、t-BHP處理組、t-BHP和lutein共同處理組、lutein處理組,培養(yǎng)24 h,MTT實驗檢測細胞活力;Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡;免疫細胞化學(xué)技術(shù)檢測caspase-3蛋白的活化情況;Western blot檢測Bcl-2/Bax、cleaved caspase-3、JNK和c-Jun蛋白的變化。結(jié)果:MTT實驗和流式細胞檢測結(jié)果顯示,lutein能提高t-BHP處理的RGC-5細胞的活力,并降低t-BHP誘導(dǎo)的RGC-5細胞凋亡;免疫熒光結(jié)果顯示lutein能抑制t-BHP誘導(dǎo)的caspase-3的活化;與對照組比較,t-BHP處理后RGC-5細胞抗凋亡蛋白Bcl-2表達下調(diào)(P0.05),Bax/Bcl-2比率升高,cleaved caspase-3表達上調(diào)(P0.05),JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平增加(P0.05),t-BHP的上述作用可被lutein部分逆轉(zhuǎn)。結(jié)論:Lutein能夠降低t-BHP誘導(dǎo)的RGC-5細胞凋亡,其機制與其上調(diào)Bcl-2的表達、抑制caspase-3的活化并降低JNK和c-Jun蛋白的磷酸化有關(guān)。
[Abstract]:Objective: To observe the effect of lutein (Lutein) of tert butyl hydroperoxide (t-BHP) treatment of retinal ganglion cells (RGC-5 cell line) the protective effect and explore its mechanism. Methods: to identify the RGC-5 cell binding protein MAP-2 expression by immunofluorescence staining of retinal ganglion specific protein Brn-3 and microtubule RGC-5 cells were divided; for the control group, t-BHP treatment group, t-BHP and lutein treatment group, lutein treatment group, cultured for 24 h, the cell viability by MTT assay; Annexin V-FITC/PI double staining flow cytometry; activation of caspase-3 protein was detected by immunocytochemical technique; Western blot Bcl-2/Bax cleaved Caspase-3, change detection, JNK and c-Jun protein. Results: MTT assay and flow cytometry assay showed that lutein can improve the t-BHP treated RGC-5 cell viability and reduced apoptosis induced by low t-BHP RGC-5 Apoptosis; immunofluorescence results showed that activation of lutein can inhibit t-BHP induced caspase-3; compared with the control group, Bcl-2 protein expression of RGC-5 cell apoptosis after t-BHP treatment (P0.05), Bax/Bcl-2 ratio increased, cleaved expression of Caspase-3 (P0.05), JNK and c-Jun protein phosphorylation level increased (P0.05), the role of t-BHP can be partially reversed lutein. Conclusion: Lutein can reduce the RGC-5 induced apoptosis of t-BHP cells, its mechanism is associated with upregulation of Bcl-2 expression, inhibited the activation of Caspase-3 and JNK and decrease the phosphorylation of c-Jun protein.

【作者單位】： 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系國家中藥管理局三級科研實驗室;安徽人口職業(yè)學(xué)院護理系;
【基金】：國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃)(No.2011CB707501) 國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81371442) 廣州市科技計劃項目重大專項(No.11Bpp ZXaa2070006)
【分類號】：R774.1

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本文編號：1560248