干擾胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白1表達(dá)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
本文關(guān)鍵詞: 鼻咽腫瘤 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白質(zhì)類 RNA干擾 細(xì)胞生物學(xué) 細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶 出處:《腫瘤》2017年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的 :采用RNA干擾技術(shù)抑制胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein related protein 1,IGFBP-rP 1)表達(dá)后,觀察鼻咽癌細(xì)胞系CNE1和CNE-2Z生物學(xué)行為的變化,并探討其可能的分子機(jī)制。方法 :通過免疫組織化學(xué)法檢測25例鼻咽癌組織和22例慢性鼻咽炎組織中IGFBP-r P1蛋白的表達(dá)情況。將針對(duì)IGFBP-r P1基因的特異性si RNA(即IGFBP-r P1 si RNA)及其陰性對(duì)照si RNA分別轉(zhuǎn)染鼻咽癌CNE1和CNE-2Z細(xì)胞,然后采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法鑒定IGFBPr P1基因的沉默效果,并采用蛋白印跡法檢測各組細(xì)胞中總的細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶(extracellular regulated kinase,ERK)和磷酸化ERK(phosphorylated ERK,p-ERK)的表達(dá)。采用CCK-8法、細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell小室法分別檢測干擾IGFBP-r P1基因表達(dá)對(duì)鼻咽癌CNE1和CNE-2Z細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響。結(jié)果 :鼻咽癌組織中IGFBP-r P1蛋白的表達(dá)水平明顯高于慢性鼻咽炎組織(P0.05)。IGFBP-r P1 si RNA轉(zhuǎn)染后,鼻咽癌CNE1和CNE-2Z細(xì)胞中IGFBP-r P1基因的表達(dá)均被明顯抑制(P值均0.05),細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力均明顯降低(P值均0.05);同時(shí)2種細(xì)胞中p-ERK表達(dá)水平明顯下調(diào)(P值均0.01),而總ERK的表達(dá)水平不變(P值均0.05)。結(jié)論 :下調(diào)IGFBP-r P1基因表達(dá)可能通過調(diào)控ERK通路,抑制鼻咽癌細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲。提示IGFBP-r P1有望成為鼻咽癌基因治療的一個(gè)新靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective: to observe the biological behavior of nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE1 and CNE-2Z after inhibiting the expression of insulin-like growth factor-binding protein related protein 1IGFBP-rP1 by RNA interference. Methods: the expression of IGFBP-r P1 protein in 25 cases of nasopharyngeal carcinoma and 22 cases of chronic nasopharyngitis was detected by immunohistochemical method. The specific siRNAs specific to IGFBP-r P1 gene (IGFBP-r) were used to detect the expression of P1 protein in the tissues of nasopharyngeal carcinoma (NPC) and chronic nasopharyngitis (22 cases). P1 siRNAs and si RNA were transfected into nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 and CNE-2Z cells, respectively. Then real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot were used to determine the silencing effect of IGFBPr P1 gene. The expression of total extracellular regulated kinase (ERK) and phosphorylated ERK(phosphorylated ERK (p-ERK) were detected by Western blot. Cell scratch healing assay and Transwell chamber assay were used to detect the proliferation of nasopharyngeal carcinoma CNE1 and CNE-2Z cells by interfering IGFBP-r P1 gene expression. Results: the expression of IGFBP-r P1 protein in nasopharyngeal carcinoma was significantly higher than that in chronic nasopharyngitis after transfection with P0.05. IGFBP-r P1 si RNA. The expression of IGFBP-r P1 gene in nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE1 and CNE-2Z cells was significantly inhibited by 0.05 P values, and the proliferation of NPC cells was observed. The expression level of p-ERK was decreased significantly in both cells, while the expression level of total ERK was unchanged (P = 0.05). Conclusion: down-regulation of IGFBP-r P1 gene expression may be by regulating the ERK pathway. The inhibition of proliferation, migration and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells suggests that IGFBP-r P1 may be a new target for gene therapy of nasopharyngeal carcinoma.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科;新疆巴音郭楞蒙古自治州人民醫(yī)院耳鼻咽喉科;山東省立醫(yī)院西院耳鼻咽喉科;
【基金】:重慶市永川區(qū)2013年科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):Ycstc,2013nc8014) 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院2013年度院內(nèi)科研課題(編號(hào):YJYB201309)~~
【分類號(hào)】:R739.63
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