本文關鍵詞： 非動脈炎性前部缺血性視神經(jīng)病變 嚙齒類動物模型 糖皮質激素 巨噬細胞 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞　出處：《河北醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:非動脈炎性前部缺血性視神經(jīng)病變(nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy,NAION)是多發(fā)生于中老年人、嚴重影響患者視功能的常見視神經(jīng)疾病。目前在臨床上尚無被眼科學界廣泛認可的有效治療手段來改善患眼的視功能和防止對側眼的發(fā)病。NAION確切的發(fā)病機制尚不完全清楚,多數(shù)學者認為是由于睫狀后短動脈供血不足引起包括視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglion cells,RGCs)軸突在內(nèi)的視神經(jīng)梗死以及RGCs的凋亡。近年來的多項研究表明,炎癥機制參與了NAION的發(fā)展過程,在視神經(jīng)缺血損傷中發(fā)揮著重要的作用,但是在臨床上是否應該應用糖皮質激素治療NAION尚存在較大爭議。這在一定程度上是由于NAION理想實驗動物模型的缺乏,無法對糖皮質激素的治療效果進行準確的評價。近些年來,光動力方法用于NAION實驗動物模型的制備已取得了較大發(fā)展,為評價糖皮質激素的治療效果帶來了可行性,國外已經(jīng)開始有少量的研究報道,但是研究結果的差別較大,臨床參考價值有限。本研究采用先進的光動力方法制備NAION實驗動物模型,觀察炎癥機制的參與特征,并給予合適的糖皮質激素干預治療,用于觀察糖皮質激素對NAION的治療作用,以期為臨床應用提供基礎和依據(jù)。方法:將63只SD大鼠按照完全隨機化法平均分成3組,空白對照組、生理鹽水組和地塞米松組各21只。空白對照組不給予造模,同時在整個觀察期間不給予任何干預處理。生理鹽水組和地塞米松組應用孟加拉玫瑰紅(Rose Bengal,RB)聯(lián)合多波長激光進行造模,選用波長532nm、功率75mW、光斑直徑500μm光斑連續(xù)照射視盤上半?yún)^(qū)域15s。每組15只大鼠用于觀察造模后第1、3、7、14和28天ED1(+)細胞的變化,每個時間點3只;6只大鼠用于觀察造模后第14和28天RGCs的變化,每個時間點3只。所有實驗動物均選取右眼為實驗眼。在大鼠NAION(rat NAION,rNAION)造模成功后,生理鹽水組每天給予生理鹽水0.2ml腹腔注射,用藥至觀察天數(shù),最長14天;地塞米松組每天給予地塞米松磷酸鈉注射液腹腔注射,0.25mg逐漸減量至停藥,用藥至觀察天數(shù),最長14天。在rNAION造模后不同時間點觀察空白對照組、生理鹽水組和地塞米松組的眼底熒光血管造影(fundusfluoresceinangiography,ffa)、視神經(jīng)巨噬細胞以及rgcs數(shù)量的變化。視神經(jīng)切片的免疫組化和熒光觀察應用ed1(抗-cd68)抗體識別巨噬細胞,rgcs樣本的免疫熒光觀察應用brn3a抗體來標記,分別應用免疫熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡觀察和拍照,應用imagej圖像分析軟件計數(shù),最后進行統(tǒng)計學分析。結果:1視盤及其周圍視網(wǎng)膜血管的ffa觀察空白對照組在觀察期間的各個時間點均未見異常熒光改變。生理鹽水組在造模后第1和3天視盤熒光素滲漏較重,視網(wǎng)膜靜脈迂曲擴張明顯,地塞米松組在造模后第1和3天視盤熒光素滲漏較輕,視網(wǎng)膜靜脈迂曲擴張不明顯。生理鹽水組在造模后第7天視盤仍有較明顯的熒光素滲漏,地塞米松組在造模后第7天視盤熒光素滲漏不明顯。生理鹽水組和地塞米松組在在造模后第14和28天,視盤呈現(xiàn)不同程度的持續(xù)低熒光,提示視神經(jīng)萎縮。2視神經(jīng)篩板區(qū)周圍ed1(+)細胞的變化空白對照組視神經(jīng)篩板區(qū)周圍幾乎沒有ed1(+)細胞。生理鹽水組造模后第1天,在視神經(jīng)篩板前區(qū)及篩板區(qū)可見到少量ed1(+)細胞;造模后第3天,篩板區(qū)ed1(+)細胞數(shù)明顯增加,在篩板后區(qū)出現(xiàn)散在的ed1(+)細胞;造模后第7天,篩板區(qū)周圍的ed1(+)細胞數(shù)較前減少,同時發(fā)現(xiàn)ed1(+)細胞向篩板后視神經(jīng)延伸,分布較為集中;造模后第14天,篩板區(qū)的ed1(+)細胞數(shù)量明顯減少,但篩板后視神經(jīng)內(nèi)的ed1(+)細胞數(shù)量相對增多,分布較為稀疏;造模后第28天,視神經(jīng)篩板區(qū)僅見極少數(shù)ed1(+)細胞,但在篩板后區(qū)仍有少量ed1(+)細胞。地塞米松組ed1(+)細胞在造模后整個過程出現(xiàn)的變化同生理鹽水組相同,只是地塞米松組ed1(+)細胞的數(shù)量在不同觀察時間點與生理鹽水組不同。造模后第1天,視神經(jīng)篩板區(qū)周圍ed1(+)細胞數(shù)量,生理鹽水組和地塞米松組與空白對照組相比較,均有顯著性差異(p0.05),但是生理鹽水組和地塞米松組之間無顯著性差異(p=0.16);在造模后第3、7、14和28天,三組之間兩兩比較均有顯著性差異(p0.05)。在造模后整個觀察期間,三組ED1(+)細胞數(shù)量平均值的兩兩比較均有顯著性差異(P0.05)。3 RGCs密度的變化在造模后第14天的RGCs密度,生理鹽水組和地塞米松組與空白對照組比較均顯著降低(P0.05),生理鹽水組與地塞米松組比較也顯著降低(P0.05)。在造模后第28天的RGCs密度,生理鹽水組和地塞米松組與空白對照組比較均顯著降低(P0.05),生理鹽水組與地塞米松組比較也顯著降低(P0.05)。在造模后第14天和第28天RGCs密度的比較,空白對照組沒有顯著性差異(P0.05),生理鹽水組和地塞米松組均有顯著性差異(P0.05)。結論:在rNAION的模型中,具有炎癥機制的參與,糖皮質激素治療對于減輕炎癥反應,快速消除視盤水腫,抑制RGCs的凋亡具有一定作用。
[Abstract]:Objective : To evaluate the effect of glucocorticoid on the treatment of NAION in rats with acute ischemic optic neuropathy ( NAION ) . The results showed that the number of ed1 ( + ) cells around the sieve plate increased significantly after the molding , and the number of ed1 ( + ) cells in the optic nerve was similar to that of physiological saline group . can quickly eliminate the edema of the optic disc and inhibit the apoptosis of RGCs .

【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R774.6

【參考文獻】

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本文編號：1481966