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干擾內(nèi)皮素-1可抑制鼻咽癌細胞增殖、遷移和侵襲

發(fā)布時間:2017-12-27 20:22

  本文關(guān)鍵詞:干擾內(nèi)皮素-1可抑制鼻咽癌細胞增殖、遷移和侵襲 出處:《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2016年07期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的探討干擾內(nèi)皮素-1(ET-1)基因?qū)Ρ茄拾┘毎鲋场⑦w移及侵襲的影響以及相應(yīng)的分子機制。方法構(gòu)建ET-1sh RNA慢病毒干擾載體,成功包裝慢病毒后感染鼻咽癌5-8F細胞。Western blotting檢測ET-1干擾效率。利用MTT、細胞周期檢測、平板克隆形成實驗、Transwell小室、Boyden小室以及裸鼠皮下成瘤實驗分別檢測細胞增殖、遷移、侵襲能力的改變。Western blotting檢測上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相應(yīng)基因表達改變。結(jié)果與對照組細胞相比,鼻咽癌細胞5-8F感染慢病毒sh RNAET-1后ET-1的表達水平顯著降低。MTT實驗結(jié)果顯示,在抑制ET-1表達后細胞增殖能力顯著下降。流式細胞儀檢測細胞周期顯示干擾ET-1表達,G1細胞數(shù)明顯增多。平板克隆形成實驗結(jié)果顯示干擾ET-1表達,癌細胞克隆形成能力顯著下降。皮下裸鼠成瘤實驗結(jié)果同樣顯示,ET-1表達抑制后癌細胞成瘤能力顯著下降。Transwell和Boyden小室結(jié)果表明,ET-1表達沉默后可顯著降低細胞的遷移和侵襲能力。通過檢測ET-1沉默后EMT相關(guān)分子的表達改變,結(jié)果顯示上皮標志物E-cadherin和CK18表達增高,而間質(zhì)標志物Vimentin和N-cadherin表達降低。結(jié)論 ET-1在鼻咽癌中可通過調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)基因促進細胞增殖、遷移和侵襲能力。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of endothelin -1 (ET-1) gene on proliferation, migration and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells and its molecular mechanism. Methods the ET-1sh RNA lentivirus interference carrier was constructed and the 5-8F cells of nasopharyngeal carcinoma were infected after the lentivirus was successfully packaged. Western blotting detection of ET-1 interference efficiency. The proliferation, migration and invasion ability of cells were detected by MTT, cell cycle detection, plate clone formation test, Transwell chamber, Boyden chamber and subcutaneous tumor formation in nude mice. Western blotting was used to detect the changes in the expression of corresponding gene expression in epithelial mesenchymal transition (EMT). Results compared with the control group, the expression level of ET-1 was significantly decreased after 5-8F infection of lentivirus sh RNAET-1 in nasopharyngeal carcinoma cells. The results of MTT experiment showed that the cell proliferation ability decreased significantly after inhibiting the expression of ET-1. The cell cycle of flow cytometry showed the expression of interference ET-1, and the number of G1 cells increased significantly. The experimental results of the formation of clones showed that the expression of interfering ET-1 and the ability to clone the cancer cells decreased significantly. The results of tumor formation in subcutaneous nude mice also showed that the tumor cell forming ability of cancer cells decreased significantly after the inhibition of ET-1 expression. The results of Transwell and Boyden compartments showed that the expression of ET-1 could significantly reduce the cell migration and invasion ability. By detecting the expression changes of EMT related molecules after ET-1 silencing, the results showed that the expression of E-cadherin and CK18 increased, while the expression of interstitial markers Vimentin and N-cadherin decreased. Conclusion ET-1 can promote cell proliferation, migration and invasion by regulating epithelial mesenchymal transition related genes in nasopharyngeal carcinoma.
【作者單位】: 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院醫(yī)務(wù)處;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81301849)~~
【分類號】:R739.63
【正文快照】: 鼻咽癌是我國南方及東南亞地區(qū)一種常見的惡性腫瘤,臨床以低分化、高轉(zhuǎn)移為主要特征,臨床上75%~90%的鼻咽癌病人初診時已是局部晚期并發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[1]。盡管以調(diào)強放療技術(shù)為主的放化療綜合治療使鼻咽癌的局控率有明顯提高,但目前臨床上仍無法對鼻咽癌轉(zhuǎn)移進行早期預(yù)測

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本文編號:1343067

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