本文關(guān)鍵詞：小瞼裂綜合癥相關(guān)基因SOX14在4株宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)研究　出處：《濰坊醫(yī)學(xué)院》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 小瞼裂綜合征 SOX14 基因表達(dá)

【摘要】：背景:小瞼裂綜合征(BPES)是一種常染色體顯性遺傳病,其病變基因定位于人3號(hào)染色體長臂端23位點(diǎn),典型的BPES包括上瞼下垂、瞼裂狹小和倒向型內(nèi)眥贅皮等特征。正常成年人在水平方向上的瞼裂長度應(yīng)該是25至30毫米,而小瞼裂綜合征患者常為20至22毫米。上瞼下垂是由于上瞼提肌腱膜發(fā)育異常導(dǎo)致上瞼提肌功能缺陷引起的。小瞼裂綜合征患者還常表現(xiàn)出其他眼外特征,除了不育之外,最常見的是小頭畸形和肢體畸形。基因檢測發(fā)現(xiàn),幾乎所有伴有小頭畸形和肢體畸形的小瞼裂綜合征患者都有3號(hào)染色體的中間缺失,缺失部分包括3q23。SOX14基因定位在人類染色體3q23位點(diǎn)上,編碼一個(gè)在脊椎動(dòng)物中高度保守的轉(zhuǎn)錄抑制因子。近年來國外許多學(xué)者在小瞼裂綜合征患者中發(fā)現(xiàn)了這個(gè)基因變異,也印證了它與該疾病患者肢體畸形、小頭畸形等表現(xiàn)有關(guān)。本課題主要研究小瞼裂綜合癥相關(guān)基因SOX14在幾株宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況。目的:考慮到SOX14主要在胚胎期表達(dá),本課題通過RT-PCR,熒光定量PCR和免疫印跡技術(shù)檢測小瞼裂綜合癥相關(guān)基因SOX14在幾株宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況。以討論小瞼裂綜合癥相關(guān)基因SOX14,作為宮頸癌標(biāo)記分子的潛在可能性。材料與方法:通過Trizol法分別提取293T,Hela,HT-3,Caski,Si Ha的總RNA并用甲醛瓊脂糖變性凝膠電泳鑒定提取的總RNA質(zhì)量。之后,用fermentas逆轉(zhuǎn)錄試劑盒提供的oligo(d T)18作為引物,逆轉(zhuǎn)錄總RNA中的全部m RNA,得到c DNA。以c DNA為模板,用設(shè)計(jì)好的SOX14引物,做普通PCR,檢測各個(gè)細(xì)胞株中是否存在SOX14基因表達(dá),并通過凝膠電泳鑒定結(jié)果。在用熒光定量PCR檢測SOX14在m RNA水平上各個(gè)細(xì)胞株中的表達(dá)差異,做擴(kuò)增曲線和溶解曲線鑒定擴(kuò)增質(zhì)量。并以293T細(xì)胞為參照,計(jì)算其他4株宮頸癌細(xì)胞系中SOX14在m RNA水平的相對(duì)表達(dá)量。最后,通過免疫印跡法,證實(shí)SOX14在蛋白水平是否存在表達(dá)及相對(duì)表達(dá)差異。結(jié)果:甲醛瓊脂糖變性凝膠電泳結(jié)果顯示,提純的細(xì)胞總RNA質(zhì)量較好,可以繼續(xù)進(jìn)行下一步的逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)。逆轉(zhuǎn)錄PCR凝膠電泳結(jié)果顯示,在幾株細(xì)胞系中都檢測到了SOX14基因的m RNA,說明SOX14基因在m RNA水平存在表達(dá)。以293T細(xì)胞系為參照的熒光定量PCR結(jié)果顯示,SOX14在m RNA水平的表達(dá)量遠(yuǎn)低于作為內(nèi)參的beta-actin基因。在本研究采用的宮頸癌細(xì)胞系中,Si Ha細(xì)胞系SOX14基因的m RNA表達(dá)量最大,Hela細(xì)胞系和HT-3細(xì)胞系的SOX14基因的m RNA表達(dá)量次于Si Ha細(xì)胞系。Caski細(xì)胞系的SOX14基因表達(dá)量最少。免疫印跡結(jié)果顯示,SOX14蛋白在5種細(xì)胞株中都有表達(dá)。SOX14的蛋白表達(dá)量遠(yuǎn)低于beta-actin蛋白,這點(diǎn)與熒光定量PCR的結(jié)果一致。在幾株細(xì)胞系中,Caski的Sox14蛋白表達(dá)量最低,在免疫印跡中的條帶有些模糊。結(jié)論:本研究證實(shí)了SOX14在所選取的幾株宮頸癌細(xì)胞中都存在表達(dá)。意外的是,我們也在293T細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了SOX14的表達(dá)。我們便以293T細(xì)胞為參照,探討了SOX14在各個(gè)宮頸癌細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量。熒光定量PCR的結(jié)果顯示Si Ha細(xì)胞的SOX14基因表達(dá)量最大,而Caski細(xì)胞的SOX14基因表達(dá)量最小,而免疫印跡的結(jié)果則顯示了Hela,Si Ha,HT-3細(xì)胞在蛋白表達(dá)層面無差異,Caski細(xì)胞的SOX14基因表達(dá)量最小�？紤]到SOX14基因只在正常組織的胚胎期表達(dá),本研究的結(jié)果初步暗示了SOX14基因,作為小瞼裂綜合癥的相關(guān)基因,成為宮頸癌標(biāo)志基因的潛在可能性。
【學(xué)位授予單位】：濰坊醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R777.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李印宣;猛祥文;張榮奎;莊振西;王煥芝;楊淑英;;小瞼裂患者一家系[J];遺傳與疾病;1987年03期

2 段峰,杜曉巖,谷永安;小瞼裂綜合征的手術(shù)治療體會(huì)[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2001年06期

3 楊少武,高廣勝;手術(shù)矯治小瞼裂綜合征[J];中華眼科雜志;2002年06期

4 迪利拜,張致中;一個(gè)遺傳性小瞼裂畸形家系[J];西北國防醫(yī)學(xué)雜志;1989年01期

5 黃發(fā)明,湯明芳;先天性小瞼裂綜合征整形術(shù)[J];中國實(shí)用眼科雜志;1997年09期

6 羅紅,柳七霞,金晶;三聯(lián)術(shù)治療小瞼裂畸形[J];中國實(shí)用眼科雜志;2001年04期

7 劉德成 ,侯習(xí)武,李援東;無眼球性小瞼裂畸形的矯正[J];臨床醫(yī)學(xué);2003年08期

8 石巖,周靜圣,范先群,王云蓮;先天性小瞼裂綜合癥的臨床特征與手術(shù)治療[J];國際眼科雜志;2003年02期

9 焦永紅;盧煒;閔燕;;小瞼裂綜合征的臨床觀察[J];中國眼耳鼻喉科雜志;2004年03期

10 唐建兵;李勤;柳大烈;程飚;余文林;;小瞼裂綜合征的治療體會(huì)[J];中國美容醫(yī)學(xué);2010年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前2條

1 酈惠燕;;分期手術(shù)矯正先天性小瞼裂綜合征[A];2008年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

2 于浩;王佳琦;王太玲;郭鑫;鄭行躍;宋維銘;楊文爽;吳佳君;;針對(duì)小瞼裂綜合征患者的外眥開大新方法[A];第七屆中國醫(yī)師協(xié)會(huì)美容與整形醫(yī)師大會(huì)論文集[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 酈惠燕;先天性小瞼裂綜合征家系突變基因檢測及功能研究[D];浙江大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 劉興龍;小瞼裂綜合征相關(guān)基因Foxl2對(duì)Hela和Siha的生物學(xué)作用[D];濰坊醫(yī)學(xué)院;2014年

2 李斐;小瞼裂綜合癥相關(guān)基因SOX14在4株宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)研究[D];濰坊醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：1326346