本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞色素b5還原酶2對(duì)鼻咽癌細(xì)胞抑制作用的機(jī)制研究　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： CYB5R2 鼻咽癌 抑癌基因 腫瘤相關(guān)通路

【摘要】：細(xì)胞色素b5還原酶2 (cytochrome b5 reductase 2,CYB5R2)含有一個(gè)鐵氧還蛋白還原酶類黃素腺嘌呤二核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域,屬于黃素蛋白的吡啶核苷酸還原酶家族。其參與多種生理反應(yīng),如電子運(yùn)輸、氧化還原、脂質(zhì)代謝、脂肪酸的去飽和延伸以及紅細(xì)胞中高鐵血紅蛋白的還原反應(yīng)等。我們的前期研究發(fā)現(xiàn),CYB5R2基因在鼻咽癌中因啟動(dòng)子區(qū)CpG島DNA高甲基化而轉(zhuǎn)錄失活,外源性表達(dá)CYB5R2可抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖、遷移、克隆形成及其在裸鼠體內(nèi)成瘤的能力,但是其抑癌機(jī)制尚未明確。為了進(jìn)一步探索CYB5R2基因在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其抑癌作用的分子機(jī)制,我們通過Human Cancer PathwayFinder PCR Array技術(shù)分析外源性表達(dá)CYB5R2基因?qū)ONE1細(xì)胞中腫瘤相關(guān)的6個(gè)主要通路中的84個(gè)關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水平的影響,尋找CYB5R2基因抑癌的關(guān)鍵通路。結(jié)果顯示：外源性表達(dá)(:YB5R2基因后HONE1細(xì)胞中共有10個(gè)基因顯著差異表達(dá),其中FAS, CDKN2A, ITGB3, MTSS1和IFNB1基因表達(dá)增高,而ITGB5, VEGF,IGF1,TEK和TGFBR1基因表達(dá)下調(diào)。促凋亡基因FAS的mRNA表達(dá)水平上調(diào)1.81倍；參與細(xì)胞周期控制和DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因CDKN2A的mRNA表達(dá)水平上調(diào)1.57倍；黏附相關(guān)基因如ITGB3,MTSS1的mRNA表達(dá)水平上調(diào),分別是1.68倍和1.59倍,ITGB5的mRNA水平下調(diào)8.72倍；抗血管生成基因IFNB1的mRNA表達(dá)水平上調(diào)1.84倍；促血管生成基因如VEGF, IGF1, TEK和TGFBR1的mRNA表達(dá)水平下調(diào),分別是1.69倍、1.57倍、10.28倍和1.71倍。我們對(duì)10個(gè)基因的差異表達(dá)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果與Human Cancer PathwayFinder PCR Array結(jié)果趨勢(shì)一致。我們通過流式細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)、Caspase活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)、侵襲小室實(shí)驗(yàn)、雞胚絨毛尿囊膜移植瘤模型實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步分析了CYB5R2基因參與調(diào)控的下游通路的腫瘤分子生物學(xué)機(jī)制。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)染CYB5R2基因的鼻咽癌細(xì)胞比轉(zhuǎn)染空載體的鼻咽癌細(xì)胞株發(fā)生凋亡的細(xì)胞數(shù)目明顯增多,并且細(xì)胞中Caspase 8 和 Caspase 9的活性水平增高。轉(zhuǎn)染CYB5R2‘基因的鼻咽癌細(xì)胞比轉(zhuǎn)染空載體的鼻咽癌細(xì)胞發(fā)生周期阻滯的細(xì)胞數(shù)目明顯增多。侵襲小室實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)染CYB5R2基因的鼻咽癌細(xì)胞中發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的細(xì)胞數(shù)目比轉(zhuǎn)染空載體的鼻咽癌細(xì)胞明顯減少。通過雞胚絨毛尿囊膜移植瘤模型實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染CYB5R2基因的鼻咽癌細(xì)胞比轉(zhuǎn)染空載體的鼻咽癌細(xì)胞形成的移植瘤體積明顯減小、移植瘤周圍新生血管所占尿囊膜面積比例明顯下降。分析雞胚移植瘤的組織切片HE染色及免疫組化染色,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染CYB5R2基因的鼻咽癌雞胚移植瘤內(nèi)新生血管明顯減少,VEGF的陽(yáng)性染色明顯減少,說明CYB5R2基因能夠抑制鼻咽癌血管生成。綜上所述,CYB5R2可以在細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控、侵襲轉(zhuǎn)移能力和血管形成能力等多方面抑制鼻咽癌細(xì)胞的腫瘤生物學(xué)行為,從而抑制鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 倪曉光;程榮榮;高黎;賴少清;張蕾;賀舜;張?jiān)旅?王貴齊;;窄帶成像內(nèi)鏡在鼻咽癌診斷中的價(jià)值[J];中國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科;2012年02期

2 蔡靜怡;楊志剛;;DNA甲基化異常與惡性血液病關(guān)系的研究現(xiàn)狀[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年02期

3 桂雄斌;莫立根;張X;黨陽(yáng);;整合素αV與β3在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其意義[J];廣西醫(yī)學(xué);2013年08期

4 郭瑩;趙穎海;羅愛華;景志亮;劉丹;李汝佳;陳小毅;;鼻咽癌細(xì)胞中Fas、FasL蛋白表達(dá)及意義[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2013年08期

5 周寧;胡廣源;梅齊;邱紅;龍國(guó)賢;陳春麗;胡國(guó)清;;Inhibitory Effect of Endostar in Combination with Radiotherapy in a Mouse Model of Human CNE2 Nasopharyngeal Carcinoma[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2011年01期

6 徐向前;張建國(guó);;環(huán)氧化酶-2與鼻咽癌的研究進(jìn)展[J];右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年06期

7 任玉萍;葉子榮;唐泓波;張軍;張珊;陳國(guó)慶;吳毅平;;利用IGF-1基因敲除鼠乳腺癌模型研究IGF-1對(duì)血管生成的影響[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2008年11期

8 李智,林素暇,梁惠珍,梁英杰,何潔華;巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子與鼻咽癌微血管生成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2005年01期

9 ;Expression,deleton and mnutation of ρ16 gene in human gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2001年04期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 吳世卿;RNA干擾酪氨酸激酶受體2對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

2 董欣;鼻咽癌中糖酵解與脂肪酸β氧化異�；罨臋C(jī)制研究[D];中南大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1318683