高糖環(huán)境下mircoRNA-200b影響視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2017-12-19 06:15
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【摘要】:目的探討高糖環(huán)境下micro RNA-200b(mi R-200b)影響人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(h RECs)功能的作用機(jī)制。方法在正常和高糖環(huán)境下培養(yǎng)h RECs,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)mi R-200b表達(dá)。分別用mi R-200b和特異性mi R-200b抑制劑轉(zhuǎn)染h RECs,并且用噻唑藍(lán)法檢測(cè)高糖環(huán)境下mi R-200b對(duì)h RECs增殖的影響。用Western blot測(cè)定h RECs轉(zhuǎn)染mi R-200b和mi R-200b抑制劑后對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)蛋白和m RNA的表達(dá)的影響。結(jié)果高糖組VEGF、TGF-β1 m RNA和蛋白表達(dá)較對(duì)照組增加(P0.05)。轉(zhuǎn)染mi R-200b后,h RECs中mi R-200b表達(dá)升高,而VEGF、TGF-β1 m RNA和蛋白的表達(dá)降低。與高糖組比較,h RECs增殖受到抑制(P0.05)。結(jié)論 mi R-200b通過(guò)改變VEGF和TGF-β1的表達(dá),調(diào)節(jié)h RECs生長(zhǎng)和增殖,延緩糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)生、發(fā)展。
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院眼科;中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院;
【基金】:湖南省科技廳項(xiàng)目(No:2014TT2024、2012TT2029)
【分類號(hào)】:R774.1
【正文快照】: 附表PCR反應(yīng)相關(guān)引物基因引物序列GADPH正向:5'-AGTGCCAGCCTCGTCTCATAG-3'反向:5'-CGTTGAACTTGCCGTGGGTAG-3'mi R-200b正向:5'-AGCGGCTCATCTAAACAATGG-3'反向:5'-GGCGCACATTCTCTCCGTA-3'正向:5'-AAACTGTCAGCTCGGTCAGA-3'反向:5'-TCAGGGGCCGATTAAAGCTC-3'VEGFTGF-β1正向:5'-GC,
本文編號(hào):1307185
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