本文關(guān)鍵詞：二十二碳六烯酸抑制氧化應(yīng)激狀態(tài)下人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡

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【摘要】：目的:觀察二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)對(duì)外源性H2O2誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡的影響及分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞系A(chǔ)RPE-19,加入終濃度為12.5 mol/L的H2O2誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,隨后用30~100μmol/L DHA作用細(xì)胞4~24 h;real-time PCR和Western blot分別檢測(cè)血紅素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)mRNA和蛋白的表達(dá);比色法分析HO-1酶活性;熒光探針檢測(cè)活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的產(chǎn)生;免疫熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)的核轉(zhuǎn)位。最后通過(guò)HO-1 siRNA干擾后,流式細(xì)胞術(shù)觀察其對(duì)ARPE-19細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:DHA能以濃度依賴性方式誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞表達(dá)HO-1 mRNA和蛋白,同時(shí),HO-1的酶活性也隨著DHA濃度的遞增而增強(qiáng);DHA處理也能誘導(dǎo)Nrf2核轉(zhuǎn)位。此外,H2O2處理可促進(jìn)ARPE-19細(xì)胞凋亡,并誘導(dǎo)其產(chǎn)生ROS。同時(shí)給予100μmol/L DHA處理后,細(xì)胞凋亡率和ROS生成顯著降低。轉(zhuǎn)染HO-1 siRNA或用HO-1抑制劑Zn PP處理后,可明顯降低DHA對(duì)細(xì)胞凋亡率和ROS的抑制作用。結(jié)論:DHA可能通過(guò)Nrf2途徑誘導(dǎo)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞表達(dá)HO-1,從而發(fā)揮對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用。
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬十堰市太和醫(yī)院眼科中心;湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬十堰市太和醫(yī)院心胸外科;
【基金】：十堰市科學(xué)技術(shù)研究與開(kāi)發(fā)項(xiàng)目(No.14Y40)
【分類號(hào)】：R774.5
【正文快照】： 年齡相關(guān)性黃斑變性(age-related macular dege-neration,AMD)是一種黃斑神經(jīng)疾病,好發(fā)于50歲以上人群,其病理生理特征是患者出現(xiàn)雙側(cè)進(jìn)行性視網(wǎng)膜黃斑部退行性病變,是老年人群常見(jiàn)的致盲性眼病之一[1-2]。目前AMD的病因和發(fā)病機(jī)制尚不完全明了。流行病學(xué)研究表明它是一種與環(huán)，

本文編號(hào)：1303775