本文關(guān)鍵詞：NgR在糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)RGC凋亡中的作用

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【摘要】：目的離體培養(yǎng)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cell,RGC),檢測并明確糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)視網(wǎng)膜RGC細(xì)胞凋亡的潛在機(jī)制。方法體外培養(yǎng)RGC,實(shí)驗(yàn)分4組:(1)對照組;(2)激素組;(3)激素-si Ng R組;(4)激素-sc RNA對照組。對照組用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RGC,激素組在對照組的基礎(chǔ)上添加0.1μmol/L可的松,激素-si Ng R組在激素組的基礎(chǔ)上給予Ng R反義核苷酸序列,激素-sc RNA對照組在激素組的基礎(chǔ)上給予陰性核苷酸序列。3 d后四甲基噻唑藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)檢測各組細(xì)胞活力的變化,顯微鏡觀察各組視網(wǎng)膜RGC細(xì)胞的形態(tài)改變,利用Hoechst 33342染色法檢測各組細(xì)胞凋亡變化,Western blot檢測Nogo受體(Nogo receptor,Ng R)表達(dá),探討細(xì)胞凋亡的機(jī)制。結(jié)果MTT法檢測結(jié)果顯示,對照組、激素組、激素-sc RNA組、激素-si Ng R組細(xì)胞活力分別為(100.0±0.0)%、(76.3±6.8)%、(79.4±9.0)%和(96.7±9.8)%,Ng R蛋白表達(dá)量分別為(20.0±2.7)%、(36.3±1.8)%、(39.5±4.0)%和(18.7±2.5)%,與對照組相比,激素組和激素-sc RNA組視網(wǎng)膜RGC活力降低,Ng R蛋白表達(dá)上調(diào)(P0.01),視網(wǎng)膜RGC體積變小,而激素-si Ng R組視網(wǎng)膜RGC體積變化不明顯(P0.05)。Hoechst 33342染色顯示,激素組及激素-sc RNA組可見大量呈亮藍(lán)色的凋亡細(xì)胞,而對照組及激素-si Ng R組細(xì)胞淡藍(lán)色,未見亮藍(lán)凋亡細(xì)胞。結(jié)論糖皮質(zhì)激素能通過上調(diào)Ng R表達(dá)誘導(dǎo)RGC凋亡。
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.2;R774.1

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本文編號(hào)：1271332