本文關(guān)鍵詞：人喉癌細(xì)胞系Hep-2中CD133陽性腫瘤干細(xì)胞的分離及意義

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【摘要】：目的:研究喉癌細(xì)胞系Hep-2中CD133的表達;比較CD133~+細(xì)胞、未分選細(xì)胞、CD133~-細(xì)胞的體外增殖、克隆形成能力及其在裸鼠體內(nèi)的成瘤能力;探討喉癌肝細(xì)胞對化療藥物順鉑(cisplatin,DDP)的抵抗作用。方法:采用流式細(xì)胞儀檢測CD133在Hep-2細(xì)胞系中的表達;免疫磁珠分選技術(shù)純化CD133陽性腫瘤細(xì)胞;使用四甲基偶氮唑藍(MTT)法和平板克隆形成實驗檢測分選所得各細(xì)胞亞群細(xì)胞以及未分選細(xì)胞的體外增殖能力和克隆形成能力;將CD133陽性腫瘤細(xì)胞和CD133陰性腫瘤細(xì)胞以一定的數(shù)量級注入重癥聯(lián)合免疫缺陷小鼠腹部皮下,比較其成瘤差異性;此外,使用DDP干預(yù)分選所得各細(xì)胞亞群細(xì)胞,檢測比較CD133陽性腫瘤細(xì)胞和CD133陰性腫瘤細(xì)胞的體外增殖能力與體內(nèi)成瘤能力。結(jié)果:流式細(xì)胞儀示CD133在Hep-2細(xì)胞系中呈微量恒定表達,表達概率為40.12±1.32%;CD133陽性腫瘤細(xì)胞的體外增殖能力顯著強于CD133陰性腫瘤細(xì)胞的增殖能力(P0.05),且其克隆形成能力也強于CD133陰性腫瘤細(xì)胞;體內(nèi)成瘤實驗結(jié)果顯示CD133陽性腫瘤細(xì)胞較CD133陰性細(xì)胞、未分選細(xì)胞在重癥聯(lián)合免疫缺陷小鼠體內(nèi)具有更強的成瘤性(P0.05);在DDP的干預(yù)下,相對于CD133陰性腫瘤細(xì)胞,CD133陽性腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出更強的抵抗力。結(jié)論:喉癌Hep-2細(xì)胞系中,CD133陽性癌細(xì)胞具有強的體外增殖能力、體內(nèi)成瘤能力且對化療藥物具有較強的抵抗性,可作為喉癌腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)志之一。
【作者單位】： 同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院耳鼻喉科上海市同濟醫(yī)院;同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院檢驗科;同濟大學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心上海市同濟醫(yī)院同濟大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：上海市自然科學(xué)基金項目(12ZR1428500)
【分類號】：R739.65
【正文快照】： 前言喉癌是一種患病率較高的惡性腫瘤,發(fā)病率約占全身惡性腫瘤的1-5%和耳鼻喉科惡性腫瘤的7-35%[1]。雖然臨床上所采用的手術(shù)和放化療法使喉癌患者的生存率有了顯著提高,但仍面臨著術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的風(fēng)險。臨床治療顯示,放化療法在保全喉部結(jié)構(gòu)和功能方面具有明顯優(yōu)勢,但不容忽

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