發(fā)布時(shí)間：2017-11-30 11:13

  本文關(guān)鍵詞：沉默SAA表達(dá)對(duì)CNE2細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響

  更多相關(guān)文章： 血清淀粉樣蛋白A CNE2細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 生長(zhǎng)增殖

【摘要】：目的:沉默SAA基因在鼻咽癌CNE2細(xì)胞中的表達(dá),研究分析SAA基因表達(dá)降低,對(duì)CNE2細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、BCL-2、Caspase-3及NF-КB表達(dá)的影響,初步探討SAA基因的功能及分子機(jī)制。方法:本研究將前期已成功構(gòu)建的SAA表達(dá)干擾載體p GPU6/GFP/Neo-SAA,采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染CNE2細(xì)胞,G418篩選,克隆挑選,建立SAA穩(wěn)定低表達(dá)的p GPU6/GFP/Neo-SAACNE2細(xì)胞系,以p GPU6/GFP/Neo-CNE2細(xì)胞系、未轉(zhuǎn)染的CNE2細(xì)胞系為對(duì)照組;運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)三組細(xì)胞的細(xì)胞周期改變;使用平皿克隆實(shí)驗(yàn),檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖能力;以western blotting檢測(cè)BCL-2、Caspase-3及NF-КB在p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系的表達(dá)水平。1、western blotting檢測(cè)結(jié)果示,SAA在p GPU6/GFP/Neo-SAACNE2細(xì)胞系中表達(dá)降低;2、流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,在p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系中,處于分裂期的CNE2細(xì)胞數(shù)目減少;3、平皿克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖能力降低;4、western blotting檢測(cè)結(jié)果示,p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系中的BCL-2表達(dá)降低,Caspase-3及NF-КB的表達(dá)增多。結(jié)論:1、成功建立SAA穩(wěn)定低表達(dá)的p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系;2、SAA基因在CNE2細(xì)胞中沉默表達(dá)后,CNE2細(xì)胞表現(xiàn)為生長(zhǎng)增殖速度減慢及分裂能力降低,BCL-2蛋白表達(dá)減少,Caspase-3及NF-КB蛋白表達(dá)增多。結(jié)果:
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.63

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本文編號(hào)：1239097