本文關(guān)鍵詞：沉默SAA表達(dá)對CNE2細(xì)胞生長增殖的影響

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【摘要】：目的:沉默SAA基因在鼻咽癌CNE2細(xì)胞中的表達(dá),研究分析SAA基因表達(dá)降低,對CNE2細(xì)胞生長增殖、BCL-2、Caspase-3及NF-КB表達(dá)的影響,初步探討SAA基因的功能及分子機(jī)制。方法:本研究將前期已成功構(gòu)建的SAA表達(dá)干擾載體p GPU6/GFP/Neo-SAA,采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染CNE2細(xì)胞,G418篩選,克隆挑選,建立SAA穩(wěn)定低表達(dá)的p GPU6/GFP/Neo-SAACNE2細(xì)胞系,以p GPU6/GFP/Neo-CNE2細(xì)胞系、未轉(zhuǎn)染的CNE2細(xì)胞系為對照組;運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測三組細(xì)胞的細(xì)胞周期改變;使用平皿克隆實驗,檢測細(xì)胞的生長增殖能力;以western blotting檢測BCL-2、Caspase-3及NF-КB在p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系的表達(dá)水平。1、western blotting檢測結(jié)果示,SAA在p GPU6/GFP/Neo-SAACNE2細(xì)胞系中表達(dá)降低;2、流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,在p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系中,處于分裂期的CNE2細(xì)胞數(shù)目減少;3、平皿克隆實驗結(jié)果顯示,p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞的生長增殖能力降低;4、western blotting檢測結(jié)果示,p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系中的BCL-2表達(dá)降低,Caspase-3及NF-КB的表達(dá)增多。結(jié)論:1、成功建立SAA穩(wěn)定低表達(dá)的p GPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細(xì)胞系;2、SAA基因在CNE2細(xì)胞中沉默表達(dá)后,CNE2細(xì)胞表現(xiàn)為生長增殖速度減慢及分裂能力降低,BCL-2蛋白表達(dá)減少,Caspase-3及NF-КB蛋白表達(dá)增多。結(jié)果:
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.63

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本文編號：1239097