本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外向內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞分化的研究

  更多相關(guān)文章： 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 耳聾 神經(jīng)干細(xì)胞 毛細(xì)胞 分化

【摘要】：感音神經(jīng)性耳聾(sensorineural hearing loss,SNHL)是目前最普遍的感覺器官功能障礙類型,可出現(xiàn)在任何年齡階段的人群中,表現(xiàn)出不同程度的聽力及言語功能障礙。全世界范圍內(nèi)大約有3.6億人存在中度以上的聽力障礙,其中大部分為感音神經(jīng)性耳聾。環(huán)境和遺傳因素均會導(dǎo)致內(nèi)耳毛細(xì)胞及螺旋神經(jīng)元的變性、損傷,造成永久性的聽力障礙。由于成年哺乳動物內(nèi)耳中毛細(xì)胞的再生能力十分有限,因此如果能夠通過誘導(dǎo)其他器官來源的干細(xì)胞向內(nèi)耳感覺上皮方向分化,再通過細(xì)胞移植的方法修復(fù)受損的內(nèi)耳結(jié)構(gòu),進(jìn)而可以達(dá)到改善聽覺的目的。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)不僅具有干細(xì)胞自我更新和多向分化的共性,還具有來源廣泛,無倫理學(xué)爭議,低免疫源性,以及一定的免疫調(diào)節(jié)功能等特性,可向成骨細(xì)胞,軟骨細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞,肝細(xì)胞等多種細(xì)胞類型分化,廣泛應(yīng)用于組織工程和細(xì)胞替代治療。本研究擬在體外條件下探討h UC-MSCs向內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)條件,為干細(xì)胞內(nèi)耳移植治療感音神經(jīng)性耳聾提供新的種子細(xì)胞。目的在體外探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)定向誘導(dǎo)分化為毛細(xì)胞樣細(xì)胞的可行性和方法。方法1、使用實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)有方法,原代分離培養(yǎng)、獲得h UC-MSCs;取培養(yǎng)至3-5代的h UC-MSCs在添加DMEM/F12+N2+B27+EGF+b FGF瓊脂糖包被的抗貼壁培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)3-5天,誘導(dǎo)細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞方向分化,用免疫熒光檢測神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記物Nestin的表達(dá)情況。2、將誘導(dǎo)后的神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)移到明膠(gelatin)特殊包被的培養(yǎng)瓶中,在DMEM/F12+N2+B27+EGF+ATRA培養(yǎng)基中培養(yǎng)2-4周,進(jìn)一步向內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化,免疫熒光及q RT-PCR檢測毛細(xì)胞標(biāo)記物Math1、Myosin VIIa,Brn3c的表達(dá)情況。結(jié)果1、體外h UC-MSCs誘導(dǎo)后形成神經(jīng)球樣結(jié)構(gòu),并表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記物Nestin。2、經(jīng)誘導(dǎo)分化后的神經(jīng)干細(xì)胞在內(nèi)耳感覺上皮誘導(dǎo)培養(yǎng)基中經(jīng)2-4周的分化后表達(dá)Math1、Myosin VIIa,Brn3c等毛細(xì)胞標(biāo)記物,向內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞分化。結(jié)論人臍帶來源間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)能夠在體外跨胚層轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)干細(xì)胞,并可進(jìn)一步定向誘導(dǎo)分化為內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞,可能作為理想的種子細(xì)胞用于感音神經(jīng)性耳聾的內(nèi)耳移植治療。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R764.43

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董明敏;董民聲;婁衛(wèi)華;;鳥類內(nèi)耳毛細(xì)胞的再生[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;1993年06期

2 王磊;;內(nèi)耳毛細(xì)胞有再生的能力[J];國外醫(yī)學(xué)情報(bào);1994年08期

3 ;二次強(qiáng)聲暴露后鳥類內(nèi)耳毛細(xì)胞的再生[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;1995年06期

4 熊敏,翟所強(qiáng);堿性成纖維細(xì)胞生長因子在內(nèi)耳的生物學(xué)作用[J];廣東醫(yī)學(xué);2003年03期

5 婁向新;袁崇剛;;哺乳動物內(nèi)耳毛細(xì)胞損傷再生性修復(fù)的研究進(jìn)展[J];中華耳科學(xué)雜志;2006年02期

6 王斌;遲放魯;高文元;;哺乳類動物內(nèi)耳毛細(xì)胞的分化和再生[J];中國眼耳鼻喉科雜志;2006年06期

7 王靜;施建蓉;;氨基糖甙類抗生素與內(nèi)耳毛細(xì)胞凋亡[J];中國中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科雜志;2007年05期

8 ;科學(xué)家培育出內(nèi)耳毛細(xì)胞有望恢復(fù)聽力[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2009年03期

9 鄧曉聰;楊新明;;哺乳動物內(nèi)耳毛細(xì)胞的再生和功能恢復(fù)的研究進(jìn)展[J];南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年02期

10 王堅(jiān),李倩虹,陳繼生;鈣與內(nèi)耳毛細(xì)胞功能[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1992年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 吳南;;不同類型載體對內(nèi)耳細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染的比較研究[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 李華偉;王正敏;;發(fā)育過程中內(nèi)耳前體細(xì)胞增殖和分化的調(diào)控[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會議論文匯編（上）[C];2007年

3 曲雁;馬穎鈺;張璞;;蛋氨酸對抗和保護(hù)化療藥物引起的內(nèi)耳毛細(xì)胞損傷和死亡作用的研究[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 褚漢啟;黃孝文;甄宏韜;黃紅彥;崔永華;;毛細(xì)胞PMCA2在小鼠內(nèi)耳Ca2+調(diào)節(jié)和聽覺平衡中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會議論文匯編（下）[C];2007年

5 曲雁;薛嬋;馬瑞穎;;蛋氨酸對抗和保護(hù)順鉑引起的內(nèi)耳毛細(xì)胞損傷和死亡作用的研究[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

6 鐘超;黃曉;;內(nèi)耳毛細(xì)胞分化過程中的關(guān)鍵基因Atoh1的下游調(diào)控因子[A];浙江省動物學(xué)會第十二屆會員代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2013年

7 蘇振倫;孫燕榮;王莉;姜泗長;;鈣離子載體ionomycin引起內(nèi)耳毛細(xì)胞胞內(nèi)游離鈣變化的過程[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第七次會議論文摘要匯編[C];1999年

8 楊永明;江紅群;;體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)耳毛細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

9 沈鈞賢;;聽覺毛細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究新進(jìn)展[A];生物膜與重大疾病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉霞;印度用老鼠干細(xì)胞培育出內(nèi)耳[N];科技日報(bào);2013年

2 劉霞;科學(xué)家利用干細(xì)胞培育出內(nèi)耳毛細(xì)胞[N];科技日報(bào);2009年

3 劉霞;美首次培育出功能性內(nèi)耳毛細(xì)胞[N];科技日報(bào);2010年

4 胡德榮;內(nèi)耳毛細(xì)胞可以擴(kuò)殖[N];健康報(bào);2003年

5 胡德榮;內(nèi)耳毛細(xì)胞培植成功 耳聾患者康復(fù)有望[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

6 邵斌;耳聾病人有望恢復(fù)聽力[N];大眾科技報(bào);2004年

7 江波;注意，這些藥物易致耳聾[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2001年

8 仇逸 沈愛琴;耳聾者將有望復(fù)聰[N];新華每日電訊;2003年

9 指導(dǎo)專家 上海曙光醫(yī)院耳鼻喉科 袁波 主治醫(yī)師 張貝;耳朵“嗡嗡”響——不可小覷的健康預(yù)警[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2013年

10 王麗;耳鳴提示什么[N];民族醫(yī)藥報(bào);2009年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳凈芳;內(nèi)耳前體細(xì)胞增殖中的信號通路調(diào)控機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 唐子華;MYO7A基因缺陷的耳聾患者特異性iPS細(xì)胞的建立、基因修復(fù)及向毛細(xì)胞定向分化的研究[D];浙江大學(xué);2015年

3 柳全文;小鼠內(nèi)耳干細(xì)胞分化為毛細(xì)胞的分子機(jī)制及特異性分子標(biāo)志研究[D];浙江大學(xué);2014年

4 胡鈺娟;線粒體DNA4834缺失突變在內(nèi)耳擬老化模型中的作用及其機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2007年

5 婁向新;內(nèi)耳毛細(xì)胞損傷修復(fù)的基礎(chǔ)性研究[D];華東師范大學(xué);2007年

6 袁先道;人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

7 余蓉;gfi1.2基因在斑馬魚內(nèi)耳發(fā)育中的功能研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

8 秦賀;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療藥物性聾的基礎(chǔ)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

9 吳學(xué)文;基于羥基磷灰石的納米基因載體的改良及其內(nèi)耳基因轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2012年

10 岳文杰;Gfi1.2基因在斑馬魚內(nèi)耳的表達(dá)及順鉑的耳毒性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李萌;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外向內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞分化的研究[D];鄭州大學(xué);2016年

2 楊永明;體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)耳毛細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2010年

3 李利;胚胎干細(xì)胞大鼠內(nèi)耳導(dǎo)入后的遷移與分化[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

4 李云;蛋氨酸對抗和保護(hù)化療藥物引起的內(nèi)耳毛細(xì)胞損傷和死亡作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

5 李宏慧;神經(jīng)干細(xì)胞及神經(jīng)生長因子對內(nèi)耳作用的研究[D];鄭州大學(xué);2006年

6 周紅;先天性感音神經(jīng)性聾的相關(guān)免疫因素研究[D];東南大學(xué);2004年

7 張裔良;慶大霉素經(jīng)過內(nèi)、外淋巴途徑給藥后在內(nèi)耳毛細(xì)胞中分布的比較[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

8 宇雅蘋;SMADs基因在小鼠內(nèi)耳聽覺器官發(fā)育中的信號調(diào)控作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2007年

9 李新新;DAPT調(diào)控大鼠耳蝸毛細(xì)胞分化的機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

10 陳敏云;維甲酸誘導(dǎo)內(nèi)耳祖代細(xì)胞分化的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

，

本文編號：1184440