二亞硝基哌嗪上調AGR2促進鼻咽癌細胞轉移
本文關鍵詞:二亞硝基哌嗪上調AGR2促進鼻咽癌細胞轉移
【摘要】:目的:探討二亞硝基哌嗪(DNP)通過調控AGR2表達參與鼻咽癌轉移的分子機制。方法:以具有低轉移潛能的鼻咽癌細胞6-10B作為研究材科,應用四甲基噻唑藍(MTT)法檢測DNP對6-10B細胞的非毒性濃度;分別采用間接免疫熒光法、Western blot和實時熒光定量PCR法檢測DNP對6-10B細胞中AGR2蛋白及m RNA表達的影響;采用針對AGR2基因的特異性小干擾RNA(si RNA)沉默6-10B細胞AGR2的表達,并用Transwell小室法檢測其對細胞侵襲和遷移能力的影響。結果:MTT法檢測DNP對6-10B細胞的非毒性濃度為0~10.0μmol/L;8.0μmol/L DNP處理6-10B細胞后,間接免疫熒光法檢測發(fā)現(xiàn)AGR2蛋白表達明顯上調,且以在細胞質中表達為主;不同濃度的DNP處理6-10B細胞24 h或用8.0μmol/L的DNP處理6-10B細胞不同時間后,Western blot結果發(fā)現(xiàn)AGR2蛋白的表達水平增加且呈濃度和時間依賴性(P0.05);si RNA-AGR2沉默6-10B細胞屮AGR2基因的表達后,DNP誘導6-10B細胞的侵襲及遷移能力較干擾前明顯降低(P0.05)。結論:DNP可能通過在轉錄水平上調AGR2的表達,影響鼻咽癌細胞的侵襲和轉移能力。
【作者單位】: 珠海市人民醫(yī)院/暨南大學附屬珠海醫(yī)院檢驗科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81402265)
【分類號】:R739.63;R730.43
【正文快照】: 鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我國南用0.2%胰蛋白酶消化后傳代培養(yǎng)1~2 d。方地域比較常見的惡性腫瘤之一[1],其發(fā)生以南方的1.2.2 MTT法篩選DNP處理6-10B細胞的非毒性濃度廣東、廣西、湖南等地發(fā)病率最高,具有顯著的種族●將6-10B細胞按每孔2×10 3個的密度接種至9
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