本文關(guān)鍵詞：錳誘導(dǎo)體外培養(yǎng)耳蝸毛細胞的損傷與凋亡研究

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【摘要】：目的探討錳誘導(dǎo)體外培養(yǎng)耳蝸毛細胞損傷與凋亡的關(guān)系。方法將出生3天的新生Sprague Dawley大鼠的耳蝸器官體外培養(yǎng),將貯存濃度為100m M氯化錳用SFM稀釋到終濃度為1m M,3m M,5m M后進行體外染毒處理耳蝸基底膜。應(yīng)用鬼筆環(huán)肽染色特異性顯示耳蝸毛細胞的靜纖毛,同時用β-Tubulin對神經(jīng)纖維進行染色,用TUNEL試劑盒;Cleaved caspase-3抗體對耳蝸基底膜進行染色,在激光共聚焦顯微鏡下分別觀察耳蝸基底膜的毛細胞,神經(jīng)纖維。結(jié)果耳蝸基底膜培養(yǎng)24小時,1m M氯化錳對耳蝸毛細胞及神經(jīng)纖維損傷甚微,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),內(nèi),外毛細胞排列整齊規(guī)律,聽神經(jīng)纖維分布均勻,成束排列。最高濃度5m M氯化錳處理24小時后對神經(jīng)纖維造成明顯的損害,與對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。當濃度逐漸增加,損傷愈加顯著并呈濃度依賴性。2m M氯化錳處理,對耳蝸基底膜底轉(zhuǎn)損傷較中轉(zhuǎn)、頂轉(zhuǎn)明顯。不同濃度氯化錳處理24小時TUNEL染色陽性細胞隨著氯化錳濃度的增加而增多;Cleaved caspase-3染色陽性細胞亦隨著氯化錳濃度的增加而增多。結(jié)論通過大鼠耳蝸器官體外培養(yǎng)方法,發(fā)現(xiàn)氯化錳會造成毛細胞缺失,神經(jīng)纖維變細變少,而這種損傷的機制與細胞凋亡密切相關(guān)。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院耳鼻喉頭頸外科;第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院耳鼻喉頭頸外科;第四軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室;解放軍后勤學(xué)院門診部五官科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81172635)~~
【分類號】：R764
【正文快照】： 錳是人體必需的微量元素之一,涉及人體多種生化功能和代謝過程。但長期攝入過量錳可引起錳中毒,臨床上出現(xiàn)椎體外束損傷表現(xiàn),如手指震顫,肌張力增高,腱反射亢進等癥狀,其表現(xiàn)與帕金森綜合癥類似。流行病學(xué)調(diào)查研究表明長期接觸錳塵的礦工其聽力下降可能與錳中毒有關(guān),動物實驗

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