本文關鍵詞：鼻咽癌細胞來源外泌體的提取和鑒定

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【摘要】：目的從鼻咽癌細胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分離外泌體,并對CNE-2所得外泌體進行鑒定。方法使用Exo Quick-TC(SBI)試劑盒法從鼻咽癌細胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培養(yǎng)上清液分離出外泌體,使用透射電鏡觀察其形態(tài)特征,BCA法進行蛋白定量,Western blot進行外泌體特異性抗原分子CD63及筏蛋白-1鑒定。結果 3種鼻咽癌細胞系培養(yǎng)上清液中均分離出大量泡狀物,透射電鏡下觀察呈圓形的囊泡,直徑為40~130 nm,具有完整胞膜。且CNE-2來源的此種泡狀物表達外泌體特異性膜筏蛋白-1、CD63。10mL對數(shù)生長期CNE-2培養(yǎng)上清液得到487μg/m L(以蛋白計)的外泌體200μL。結論本實驗室保存的3種鼻咽癌細胞系很可能均能產生外泌體,Exo Quick-TC(SBI)法能夠簡便快速地從鼻咽癌細胞系中提取到外泌體,不需要超速離心,為鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶點。
【作者單位】： 廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;廣東醫(yī)學院生物化學與分子生物學研究所;
【關鍵詞】： 鼻咽癌細胞 外泌體 分離 鑒定
【基金】：廣東省醫(yī)學科研基金資助課題(編號:B2014297) 廣東省湛江市科技計劃項目(編號:2014B01070)
【分類號】：R739.63
【正文快照】： 524023)鼻咽癌是位于頭頸部的上皮細胞源性惡性腫瘤,惡性程度高,診療困難,病死率高,嚴重危害人類健康。鼻咽癌好發(fā)于非洲北部、東南亞以及中國南方各省,尤其是廣東省。放療或放化療聯(lián)合是早期鼻咽癌的主要治療方案。放療及綜合化療策略的改進改善了初期鼻咽癌患者的預后[1]。

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本文編號：1136069