本文關(guān)鍵詞：納米載體介導(dǎo)沉默Survivin基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞增殖凋亡及放療敏感性的影響

  更多相關(guān)文章： 鼻咽癌 Survivin基因 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡 放療敏感性

【摘要】：目的:探討納米載體轉(zhuǎn)染沉默鼻咽癌CNEII細(xì)胞中Survivin基因后,CNEII細(xì)胞增殖、凋亡及對放療敏感性的改變。方法:制備聚乙烯亞胺(PEI)-四氧化三鐵(Fe3O4)磁性納米粒,用PEI-Fe3O4磁性納米粒包被miRNA-Survivin質(zhì)粒(納米干擾質(zhì)粒),將CNEII細(xì)胞分為空白對照組(不加質(zhì)粒,C組)、加納米干擾質(zhì)粒組(S組)及加miRNA-NC對照質(zhì)粒組(NC組);3組細(xì)胞轉(zhuǎn)染48 h后,熒光顯微鏡下觀察質(zhì)粒所帶綠色熒光蛋白EGFP的表達,進行細(xì)胞計數(shù),計算轉(zhuǎn)染效率;利用Real Time RT-PCR及Western Blot方法檢測Survivin mRNA及蛋白表達抑制情況;轉(zhuǎn)染24、48、72及96 h時用MTT法檢測3組細(xì)胞的增殖情況,轉(zhuǎn)染48 h時用放射線照射3組,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測3組細(xì)胞放射線照射前后的細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:轉(zhuǎn)染48 h后,加入包被miRNA-Survivin質(zhì)粒的PEI-Fe3O4磁性納米粒的CNEII細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率為(60.9±3.9)%、mRNA表達抑制率為96.5%、蛋白表達抑制率為82.5%,均高于C組和NC組(P0.05),說明構(gòu)建PEI-Fe3O4磁性納米粒成功;MTT結(jié)果顯示48 h以后S組細(xì)胞的吸光度值低于NC組和C組,說明細(xì)胞增殖被抑制;轉(zhuǎn)染48~72 h CNEII細(xì)胞施以6Gy的放射線照射,射線照射后S組細(xì)胞凋亡率高于S組照射前(P0.05),S組細(xì)胞凋亡率高于NC組和C組(P0.05)。結(jié)論:鼻咽癌CNEII細(xì)胞沉默Survivin基因后的細(xì)胞的增殖被抑制、凋亡數(shù)增加,放射線照射凋亡更明顯。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué);貴州醫(yī)科大學(xué)分子生物學(xué)重點實驗室;貴州醫(yī)科大學(xué)附院耳鼻咽喉科;
【關(guān)鍵詞】： 鼻咽癌 Survivin基因 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡 放療敏感性
【基金】：國家自然科學(xué)基金地區(qū)科學(xué)基金項目(NO.81260353)
【分類號】：R739.63
【正文快照】： 鼻咽癌是中國常見的惡性腫瘤之一,以南方地區(qū)為主,是頭頸部惡性腫瘤的首位。目前臨床上放射治療鼻咽癌多采用調(diào)強放射治療,患者的5年生存率為70%[1],但仍有部分患者經(jīng)放射治療后不能得到滿意效果,如何提高鼻咽癌的放射敏感性已成為目前臨床治療的難點和研究的重點。凋亡相關(guān)基

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