本文關(guān)鍵詞：siRNA沉默Gankyrin基因?qū)眵[癌Hep-2細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

  更多相關(guān)文章： 喉腫瘤 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 Gankyrin

【摘要】：目的 :觀察小干擾RNA(small interference RNA,si RNA)沉默Gankyrin基因?qū)眵[癌Hep-2細(xì)胞的生物學(xué)行為影響。方法:用si RNA沉默喉鱗癌Hep-2細(xì)胞中的Gankyrin基因,運(yùn)用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)及蛋白印跡法(Western blot)技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后Gankyrin m RNA及蛋白的表達(dá)。采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期,細(xì)胞劃痕損傷實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力,Western blot檢測(cè)Gankyrin下調(diào)后p53蛋白的表達(dá)。結(jié)果:q RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示,Gankyrin si RNA組Gankyrin m RNA和蛋白的相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照si RNA組和未處理組(P0.001)。CCK-8法顯示Gankyrin si RNA組細(xì)胞增殖速度明顯下降(P0.001)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明,Gankyrin si RNA組細(xì)胞凋亡率[(7.70±1.12)%]明顯高于對(duì)照si RNA組[(2.34±0.32)%]和未處理組[(1.82±0.29)%],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001);與兩對(duì)照組相比,Gankyrin si RNA組G1期比例增加,S期比例減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。細(xì)胞劃痕損傷實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)顯示Gankyrin si RNA組的細(xì)胞遷移能力明顯減弱(P0.01);Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)顯示Gankyrin si RNA組細(xì)胞侵襲能力與對(duì)照si RNA組和未處理組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Gankyrin表達(dá)下調(diào)增加了Hep-2細(xì)胞中p53蛋白的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論:Gankyrin表達(dá)下調(diào)能抑制Hep-2細(xì)胞的增殖和遷移,可能與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期改變及p53的表達(dá)密切相關(guān)。
【作者單位】： 徐州醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院;徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;南京醫(yī)科大學(xué)附屬江蘇省腫瘤醫(yī)院頭頸外科;
【關(guān)鍵詞】： 喉腫瘤 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 Gankyrin
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金(BK20151561)
【分類號(hào)】：R739.65
【正文快照】： 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)Gankyrin是近年新發(fā)現(xiàn)的癌基因。2000年,日本學(xué)者Higashitsuji等[1]在人肝癌組織c DNA文庫(kù)中發(fā)現(xiàn)了Gankyrin基因,通過對(duì)比肝癌組織與正常組織,首次提出Gankyrin m RNA在肝癌組織中高表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn),Gankyrin可通過多種信號(hào)通路影響肝癌細(xì)胞的生物學(xué)行為,對(duì)腫

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本文編號(hào)：1071372