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噪聲引起的耳蝸損傷及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的防護作用

發(fā)布時間:2017-10-17 19:23

  本文關(guān)鍵詞:噪聲引起的耳蝸損傷及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的防護作用


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【摘要】:噪聲可使聽功能發(fā)生不可逆性喪失,導(dǎo)致噪聲性聾(Noise Induced Hearing Loss, NIHL)。噪聲暴露后,耳蝸內(nèi)產(chǎn)生大量自由基,其發(fā)生氧化應(yīng)激導(dǎo)致毛細胞死亡。如一氧化氮自由基(NO)被氧化為過氧亞硝基陰離子,后者進一步硝基化,生成3-硝基酪氨酸(3-NT)。綠茶中的荼多酚有很強的抗氧化活性,表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate, EGCG)是其中抗氧化作用最強的成分,具有抗炎、抗衰老、抗突變、抗癌、保護神經(jīng)及清除體內(nèi)自由基等作用。在本課題中,我們對豚鼠行預(yù)防性腹腔注射EGCG,從聽功能和形態(tài)學(xué)兩方面研究其對噪聲性聾的防護作用。一、噪聲引起的聽力損失及EGCG對聽功能的保護目的:建立噪聲性聾動物模型,探究EGCG對豚鼠噪聲性聽力損失的防護作用。方法:45只豚鼠隨機分為3組:EGCG+噪聲組,生理鹽水+噪聲組,正常對照組。EGCG+噪聲組和生理鹽水+噪聲組豚鼠在接受噪聲暴露(120 dB SPL,4h)前一日及每次暴露前1h分別腹腔注射EGCG和生理鹽水(25mg/1000g),正常對照組不予噪聲暴露。噪聲暴露后,檢測三組豚鼠聽性腦干反應(yīng)(ABR)來評估豚鼠聽力下降程度。結(jié)果:正常對照組豚鼠ABR閾值為22±2.74 dB SPL, EGCG+噪聲組豚鼠ABR閾值為52.00±9.03 dB SPL,生理鹽水+噪聲組豚鼠ABR閾值為71.00±4.18 dB SPL,兩組間有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。噪聲暴露后的第1、3、7和14天進行ABR檢測,EGCG+噪聲組和生理鹽水+噪聲組豚鼠ABR閾值均有一定程度的恢復(fù),但前者ABR閾值均較后者更低(P0.01)。以短純音(Toneburst)為刺激聲,兩組豚鼠ABR閾值在2k、4k、8k、16k各頻率均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:預(yù)防性腹腔注射EGCG可減輕噪聲引起的聽力損失。二、噪聲引起的耳蝸形態(tài)學(xué)變化及EGCG的防護作用目的:觀察噪聲引起的耳蝸3-NT增加及其導(dǎo)致的外毛細胞損傷,探究預(yù)防性腹腔注射EGCG的防護作用。方法:通過DAPI染色細胞核、鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)染色細胞骨架并行外毛細胞計數(shù),3-硝基酪氨酸(3-NT)染色、外毛細胞運動蛋白(Prestin)染色對比各組豚鼠耳蝸內(nèi)3-NT差異及細胞結(jié)構(gòu)的變化。最后進行半定量,比較組間差異。結(jié)果:60倍激光共聚焦顯微鏡下成像并計數(shù)外毛細胞,正常對照組為60.1±0.71個,生理鹽水+噪聲組為43.5±2.39個,EGCG+噪聲組為53.9±1.63個。組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。IHC染色顯示,與生理鹽水+噪聲組相比,EGCG+噪聲組豚鼠外毛細胞形態(tài)較好,Prestin染色清晰,3-硝基酪氨酸(3-NT)染色較輕。半定量結(jié)果顯示兩組間具統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論:預(yù)防性腹腔注射EGCG可降低耳蝸內(nèi)一氧化氮自由基(NO)含量,減輕噪聲引起的外毛細胞損傷。
【關(guān)鍵詞】:噪聲損傷 表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG) 3-硝基酪氨酸 抗氧化
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R764.43
【目錄】:
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-15
  • 參考文獻12-15
  • 第一部分 噪聲引起的聽力損失及EGCG對聽功能的保護15-26
  • 引言15-16
  • 材料與方法16-18
  • 結(jié)果18-21
  • 討論21-24
  • 參考文獻24-26
  • 第二部分 噪聲引起的耳蝸形態(tài)學(xué)變化及EGCG的防護作用26-48
  • 引言26
  • 材料與方法26-31
  • 結(jié)果31-41
  • 討論41-44
  • 參考文獻44-48
  • 文獻綜述48-58
  • S每嘉南,

    本文編號:1050594

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