本文關(guān)鍵詞：RNAi干擾Twist基因?qū)眵[狀細胞癌Hep-2細胞株增殖與侵襲力及E-鈣黏蛋白甲基化的影響

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【摘要】：目的探討RNAi干擾Twist基因?qū)眵[狀細胞癌Hep-2細胞株增殖、侵襲力及E-鈣黏蛋白甲基化的影響。方法培養(yǎng)人喉鱗狀細胞癌Hep-2細胞株,分別轉(zhuǎn)染siRNA-Twist(siRNA-Twist組)、陽性對照siRNAGAPDH(陽性對照組)和陰性對照錯義鏈(陰性對照組),利用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測各轉(zhuǎn)染組細胞中Twist和E-cad基因表達,Western blot法檢測各轉(zhuǎn)染組細胞中Twist和E-cad蛋白表達,MTT比色法檢測各轉(zhuǎn)染組細胞增殖情況,Transwell小室檢測細胞遷移和侵襲能力,甲基化特異性聚合酶鏈式反應(yīng)(MSP)檢測不同轉(zhuǎn)染組細胞中Ecad甲基化表達。結(jié)果 siRNA-Twist組細胞中Twist mRNA和Twist蛋白表達量均低于陽性對照組和陰性對照組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);siRNA-Twist組細胞中E-cad mRNA和E-cad蛋白表達量均高于陽性對照組和陰性對照組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與陽性對照組和陰性對照組相比,siRNA-Twist組細胞轉(zhuǎn)染48 h~96 h時細胞增殖能力明顯減弱,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);siRNA-Twist組細胞遷移細胞數(shù)和侵襲細胞數(shù)均低于陽性對照組和陰性對照組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);MSP檢測結(jié)果顯示,siRNA-Twist組細胞中E-cad甲基化擴增條帶呈弱陽性,表達強度顯著低于陽性對照組和陰性對照組,而非甲基化擴增條帶呈陽性。結(jié)論特異性抑制Twist基因表達可能通過影響E-cad甲基化而上調(diào)E-cad表達,從而抑制細胞增殖及侵襲能力,有望為喉鱗狀細胞癌基因治療提供新的靶點。
【作者單位】： 平頂山市第二人民醫(yī)院耳鼻咽喉科;中國醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【關(guān)鍵詞】： 喉鱗狀細胞癌 RNAi干擾 Twist基因 侵襲力
【基金】：遼寧省自然科學(xué)基金(2013021008)
【分類號】：R739.65
【正文快照】： 沈陽110032)喉鱗狀細胞癌作為頭頸部常見惡性腫瘤,惡性程度高、侵襲力強,占所有惡性腫瘤的2%左右,已成為僅次于肺癌的呼吸道第二位高發(fā)惡性腫瘤[1]。隨著臨床診療技術(shù)的進步,該病治療效果得到很大改善,但患者預(yù)后仍不佳,遠期生存率較低[2]。Twist基因是胚胎發(fā)育過程中關(guān)鍵性調(diào)

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本文編號：1016597