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bFGF與KCC1在不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2017-10-10 09:35

  本文關(guān)鍵詞:bFGF與KCC1在不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制研究


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【摘要】:目的:觀察堿性成纖維生長(zhǎng)因子(Basic fibroblast growth factor,b FGF)及氯鉀共轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(K-Cl cotransporter,KCC1)在不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障(age-related cataract,ARC)患者晶狀體上皮細(xì)胞(Lens epithelial cells,LECs)中的分布及表達(dá)。探討氯鉀共轉(zhuǎn)運(yùn)體在晶狀體上皮細(xì)胞中的作用及信號(hào)調(diào)節(jié)通路。方法:1.收集2013年11月至2014年12月,在福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院眼科確診為ARC并行手術(shù)治療患者的晶狀體前囊膜組織,共46例52眼,按晶狀體混濁部位法將年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體組分皮質(zhì)性白內(nèi)障組、核性白內(nèi)障組、混合性白內(nèi)障組。以不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體前囊膜組織上的單層晶狀體上皮細(xì)胞作為研究對(duì)象,一部分用4%多聚甲醛固定,另一部分直接置于-80℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?.應(yīng)用免疫熒光實(shí)驗(yàn)觀察b FGF及KCC1在各組患者晶狀體上皮細(xì)胞中的分布位置及蛋白表達(dá)趨勢(shì)。3.利用蛋白印跡實(shí)驗(yàn)半定量檢測(cè)不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體上皮細(xì)胞中b FGF及KCC1表達(dá)情況的差異性。結(jié)果:1.免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn):不同類型的年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體上皮細(xì)胞胞漿中均存在b FGF及KCC1的表達(dá),核性白內(nèi)障組的熒光強(qiáng)度無(wú)論是KCC1還是b FGF都相對(duì)于皮質(zhì)性白內(nèi)障組和混合型白內(nèi)障組強(qiáng)。2.蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn):在不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞中,目標(biāo)蛋白相對(duì)表達(dá)量在核性白內(nèi)障組最大。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各實(shí)驗(yàn)組間的相對(duì)蛋白表達(dá)量不全相同,核性白內(nèi)障組與皮質(zhì)性白內(nèi)障組間差異顯著(P0.05)。b FGF及KCC1相對(duì)表達(dá)量呈正相關(guān),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且相關(guān)程度較高(P0.01,r=0.875)。結(jié)論:1.不同類型年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞均存在b FGF及KCC1的表達(dá)且主要分布在胞漿中。2.b FGF及KCC1的表達(dá)水平在不同類型的年齡相關(guān)性白內(nèi)障中存在差異性和相關(guān)性。3.b FGF可能通過(guò)MAPK/ERK1/2和PI3K/AKT途徑影響KCC1的表達(dá),參與調(diào)控年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞的生理、病理性代謝。
【關(guān)鍵詞】:白內(nèi)障 氯鉀共轉(zhuǎn)運(yùn)體 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 晶狀體上皮細(xì)胞 容積調(diào)控
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R776.1
【目錄】:
  • 中英文縮略詞表4-5
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 前言9-10
  • 材料和方法10-18
  • 1. 實(shí)驗(yàn)材料10-13
  • 1.1 標(biāo)本來(lái)源10
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)分組10-11
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及來(lái)源11-12
  • 1.4 主要儀器組12-13
  • 2. 實(shí)驗(yàn)方法13-18
  • 2.1 部分試劑配置13-14
  • 2.2 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)14-15
  • 2.3 Western blot技術(shù)15-18
  • 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理18
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-21
  • 1. 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)18-19
  • 2. Western Blot技術(shù)19-21
  • 討論21-25
  • 結(jié)論25-26
  • 參考文獻(xiàn)26-32
  • 綜述32-52
  • 參考文獻(xiàn)43-52
  • 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

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1 孔s,

本文編號(hào):1005638


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