本文關(guān)鍵詞：介導(dǎo)pcDNA-IGF-1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞兩種方法比較

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【摘要】：目的比較陽離子聚合物Xfect與PDS-1000基因槍系統(tǒng)轉(zhuǎn)染人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)的轉(zhuǎn)染效率及兩種方法對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響。方法應(yīng)用貼壁法原代培養(yǎng)hBMSCs,取第3代細(xì)胞以流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面抗原CD29、CD34、CD45、CD90,并分別用Xfect與PDS-1000基因槍系統(tǒng)將pcDNA-胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)質(zhì)粒轉(zhuǎn)導(dǎo)入hBMSCs中。轉(zhuǎn)染后在不同時(shí)間點(diǎn)使用倒置熒光顯微鏡觀察綠色熒光,計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞,計(jì)算細(xì)胞轉(zhuǎn)染率及細(xì)胞漂浮率;以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)IGF-1分泌量。結(jié)果 hBMSCs培養(yǎng)成功后,高表達(dá)CD29、CD90,低表達(dá)CD34、CD45。在轉(zhuǎn)染后1、2d,兩種方法細(xì)胞轉(zhuǎn)染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.734、5.324,P0.05)。兩種方法轉(zhuǎn)染后細(xì)胞IGF-1分泌量均較轉(zhuǎn)染前增加,但兩種方法間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.220~10.678,P0.05)。兩種方法轉(zhuǎn)染均有部分細(xì)胞脫落。結(jié)論兩種方法均可將pcDNA-IGF-1基因轉(zhuǎn)染入hBMSCs內(nèi),轉(zhuǎn)染后細(xì)胞能分泌IGF-1。Xfect轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率較高,PDS-1000基因槍系統(tǒng)轉(zhuǎn)染效率較低,兩者對(duì)細(xì)胞都造成一定損傷。
【作者單位】： 青島大學(xué)附屬醫(yī)院關(guān)節(jié)外科;
【關(guān)鍵詞】： 陽離子聚合物 生物彈道技術(shù) 轉(zhuǎn)染 胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ 質(zhì)粒 骨髓祖代細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171774;81272056)
【分類號(hào)】：R684.3
【正文快照】： 骨關(guān)節(jié)炎是人體關(guān)節(jié)軟骨退行性變進(jìn)而影響軟骨下骨、骨膜、滑膜等組織,以關(guān)節(jié)邊緣骨贅形成為特征的疾病,而軟骨退變是由于降解因子多于合成因子及軟骨細(xì)胞的凋亡等原因造成[1]。通過將基因修飾過的種子細(xì)胞移植替代受損的軟骨細(xì)胞,改善軟骨局部代謝,有可能修復(fù)受損的軟骨組織,

【相似文獻(xiàn)】

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