本文關(guān)鍵詞：甲基強的松龍對脊髓損傷后凋亡和自噬作用的影響

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【摘要】：目的研究甲基強的松龍對大鼠脊髓損傷的神經(jīng)保護作用及其可能的分子機制,為脊髓損傷的藥物治療提供實驗依據(jù)。方法1、選用改良Allen's法建立大鼠脊髓(T10)損傷模型,利用透射電鏡觀察大鼠正常脊髓及脊髓損傷后1d,3d,7d的神經(jīng)組織超微結(jié)構(gòu),觀察自噬體水平。2、利用BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)評分法分別對sham、SCI及SCI+MP組大鼠在1d,3d,7d,14d,21d,28d的不同時間點的運動功能進行評估。3、體外培養(yǎng)N2a細胞,經(jīng)MTT檢測MP對H_2O_2誘導(dǎo)的N2a細胞的氧化損傷的保護作用。4、將體外培養(yǎng)的N2a細胞加入10μM的MP預(yù)處理30 min,再加入100μM H_2O_2干預(yù)24 h。倒置生物相差顯微鏡觀察各組細胞生長狀態(tài)和形態(tài)變化。5、流式細胞術(shù)和Western blot法檢測各組神經(jīng)細胞凋亡情況。6、免疫熒光檢測自噬標志性蛋白LC3-B的表達定位,Western blot法檢測自噬相關(guān)蛋白表達情況。結(jié)果1、透射電鏡結(jié)果顯示脊髓損傷后1天自噬體明顯增多。2、MP作用于脊髓損傷后,大鼠BBB評分明顯提高。3、MTT檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),MP預(yù)處理可保護N2a細胞免受H_2O_2誘導(dǎo)的氧化損傷。4、倒置生物相差顯微鏡下我們發(fā)現(xiàn)MP能夠維持損傷N2a細胞形態(tài)和數(shù)量。5、流式細胞術(shù)和Western Blot表明MP能顯著降低神經(jīng)細胞凋亡。6、免疫熒光結(jié)果顯示自噬標志性蛋白LC3B主要定位在細胞胞漿,Western blot結(jié)果表明MP能夠下調(diào)神經(jīng)細胞自噬標志性蛋白LC3-B和Beclin-1表達。結(jié)論1.甲基強的松龍對大鼠脊髓損傷具有一定的神經(jīng)保護作用。2.甲基強地松龍通過抑制自噬和凋亡來對抗神經(jīng)細胞的氧化損傷。
【關(guān)鍵詞】：甲基強的松龍 脊髓損傷 凋亡 自噬 氧化應(yīng)激 神經(jīng)保護
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R651.2
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語表8-9
• 前言9-10
• 實驗材料和方法10-15
• 結(jié)果15-23
• 討論23-25
• 結(jié)論25-26
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價26-27
• 參考文獻27-30
• 附錄30-41
• 一、文獻綜述 脊髓損傷的研究進展30-38
• 參考文獻35-38
• 二、在學(xué)期間科研成績38-39
• 三、致謝39-40
• 四、個人簡介40-41

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本文編號：875307