過(guò)表達(dá)Shootin1的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷
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【摘要】:背景:為解決骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)分化效率低的問(wèn)題,擬聯(lián)合Shootin1基因修飾,希望能有效提高脊髓損傷區(qū)內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)分化的能力,增加細(xì)胞移植治療脊髓損傷的效果。目的:探討過(guò)表達(dá)Shootin1的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植修復(fù)脊髓損傷模型大鼠的神經(jīng)再生能力。方法:(1)通過(guò)腺病毒轉(zhuǎn)染48 h,使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞過(guò)表達(dá)Shootin1;(2)在體外進(jìn)行神經(jīng)誘導(dǎo)分化,免疫熒光檢測(cè)神經(jīng)巢蛋白(Nestin)與神經(jīng)元特異性核蛋白(NeuN)的表達(dá);(3)運(yùn)用改良Allen撞擊裝置制備脊髓撞擊損傷模型,造模后半小時(shí)在蛛網(wǎng)膜下腔注射Shootin1轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,脊髓損傷對(duì)照組僅進(jìn)行脊髓損傷手術(shù)。脊髓損傷5周后取脊髓樣本進(jìn)行冰凍切片檢測(cè)神經(jīng)相關(guān)標(biāo)記。結(jié)果與結(jié)論:(1)腺病毒轉(zhuǎn)染48 h,免疫熒光與Western Blot檢測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)已成功表達(dá)Shootin1蛋白;(2)體外神經(jīng)誘導(dǎo)分化7 d,3組細(xì)胞形態(tài)上均發(fā)生了變化,Shootin1轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組和未轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組Nestin與NeuN的表達(dá)差異不明顯;(3)脊髓撞擊損傷大鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,細(xì)胞移植組BBB評(píng)分增高。移植Shootin1轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組和未轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組均有Nestin,NeuN,GFAP,MAP-2,ChAT,SYN表達(dá)的升高,神經(jīng)再生能力增強(qiáng)。(4)實(shí)驗(yàn)再次認(rèn)證了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷的顯著性效果,Shootin1蛋白對(duì)脊髓損傷后的神經(jīng)再生及神經(jīng)功能性恢復(fù)起到一定作用,但其對(duì)于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞直接移植來(lái)說(shuō)修復(fù)差異仍不太明顯,優(yōu)化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)脊髓損傷的治療仍需進(jìn)一步研究。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳寶安醫(yī)院;深圳市羅湖區(qū)中醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 脊髓損傷 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞移植 神經(jīng)再生 組織工程 干細(xì)胞 移植 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 Shootin
【基金】:深圳市科技創(chuàng)新委員會(huì)資助項(xiàng)目(JCYJ20130329090921096)~~
【分類號(hào)】:R651.2
【正文快照】: 文章快速閱讀:上調(diào)Shootin1蛋白表達(dá)量對(duì)脊髓損傷恢復(fù)的影響Ad5-Shoootin-EGFP-骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Ad5-EGFP-骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離Neurobasal+B27(Medium),堿性成纖維生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、維甲酸聯(lián)合誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染Shootin1體外誘導(dǎo)
【相似文獻(xiàn)】
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4 通訊員 陳亞偉 記者 徐丹鹿;我國(guó)每年脊髓損傷者數(shù)萬(wàn)人[N];光明日?qǐng)?bào);2003年
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8 鄭穎t,
本文編號(hào):845832
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