姜黃素抑制NF-κB活化過程對顆粒誘導(dǎo)骨溶解影響的體內(nèi)實驗研究
本文關(guān)鍵詞:姜黃素抑制NF-κB活化過程對顆粒誘導(dǎo)骨溶解影響的體內(nèi)實驗研究
更多相關(guān)文章: 骨溶解 無菌性松動 姜黃素 小鼠氣囊植骨模型 NF-κB c-FOS NFATc1 IκBα p-IκBα
【摘要】:目的:通過探討姜黃素對NF-κB活化過程的影響,研究姜黃素對聚乙烯顆粒誘導(dǎo)骨溶解的治療效果及作用機制,為預(yù)防和治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體無菌性松動提供新思路。方法:隨機選取30只4周大雄性BALB/c小鼠并建立背部氣囊,一周后隨機殺死其中10只并取其顱骨片,植入其它小鼠背部氣囊,建立小鼠氣囊植骨模型。動物模型建立后分為以下4組:空白組(A組)、聚乙烯組(B組)、溶劑組(C組)、姜黃素組(D組)。建模后第一天向空白組氣囊內(nèi)注射1ml生理鹽水,其余三組小鼠氣囊內(nèi)注射等量聚乙烯顆粒懸濁液。用DMSO溶解姜黃素,并以玉米油定容,制備濃度為5mg/ml的姜黃素溶液,同時制作不含姜黃素的相同成分溶劑。建模后第2天開始,每天向姜黃素組氣囊內(nèi)注射0.2ml姜黃素溶液(姜黃素用量為50mg/kg/d),向溶劑組氣囊內(nèi)注射等量溶劑,其余兩組注射等量生理鹽水。21天后處死所有小鼠,取出背部氣囊及骨片。行TRAP染色檢測骨片中破骨細胞的數(shù)量。液氮碾磨法處理氣囊組織,分別提取總RNA和總蛋白,QPCR檢測c-FOS、NFATc1的mRNA表達水平,行western blot檢測氣囊組織中IκBα以及p-IκBα的蛋白含量。結(jié)果:TRAP染色發(fā)現(xiàn),在聚乙烯組和溶劑組骨片中染色的破骨細胞較多,而空白組和姜黃素組極少或沒有染色的破骨細胞。QPCR檢測發(fā)現(xiàn),基因表達情況:c-FOS:聚乙烯組溶劑組空白組姜黃素組,前兩組與后兩組相比,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);NFATc1:聚乙烯組溶劑組空白組姜黃素組,前兩組與后兩組相比,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。western blot檢測發(fā)現(xiàn),IκBα蛋白相對灰度值:姜黃素組空白組溶劑組聚乙烯組,前兩組與后兩組相比,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);p-IκBα蛋白相對灰度值:聚乙烯組溶劑組空白組姜黃素組,前兩組與后兩組相比,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:在小鼠氣囊植骨模型中,姜黃素可以通過抑制NF-κB的活化以及c-FOS、NFATc1的表達來抑制超高分子量聚乙烯誘導(dǎo)的骨溶解反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】:骨溶解 無菌性松動 姜黃素 小鼠氣囊植骨模型 NF-κB c-FOS NFATc1 IκBα p-IκBα
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R687.4
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-11
- 縮略語表11-12
- 1 前言12-15
- 2 材料與方法15-25
- 2.1 實驗材料15-17
- 2.1.1 實驗動物15
- 2.1.2 主要儀器與耗材15-16
- 2.1.3 主要試劑及試劑盒16-17
- 2.2 實驗方法17-24
- 2.2.1 超高分子量聚乙烯顆粒懸濁液的制備17
- 2.2.2 姜黃素注射液的制備17
- 2.2.3 小鼠皮下氣囊植骨骨溶解模型的建立17-18
- 2.2.4 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色檢測骨片中破骨細胞的表達情況18-19
- 2.2.5 QPCR檢測各組氣囊組織中c-Fos、NFATc1的表達情況19-22
- 2.2.6 western blot檢測氣囊組織IκBα、p-IκBα 的蛋白表達水平22-24
- 2.3 統(tǒng)計分析24-25
- 3 結(jié)果25-29
- 3.1 TRAP染色結(jié)果25-26
- 3.2 QPCR結(jié)果26-27
- 3.3 western blot灰度值分析27-29
- 4 討論29-32
- 5 結(jié)論32-33
- 參考文獻33-36
- 綜述36-55
- 1.前言36-37
- 2.通過調(diào)節(jié)趨化因子-配體-受體系統(tǒng)干擾單核/巨噬細胞向假體部位遷移37-38
- 3.以調(diào)節(jié)巨噬細胞的極化作用為目標(biāo)來減輕磨損顆粒誘導(dǎo)的骨溶解38-41
- 3.1 巨噬細胞極化作用的概念38-39
- 3.2 巨噬細胞在無菌性松動中的活化和極化作用39-41
- 3.3 通過調(diào)節(jié)巨噬細胞的極化作用抑制顆粒誘導(dǎo)的骨溶解41
- 4. 通過直接調(diào)節(jié)NF-κB抑制磨損顆粒誘導(dǎo)的假體周圍骨溶解41-42
- 5.討論與展望42-44
- 參考文獻44-55
- 攻讀學(xué)位期間主要研究成果55-56
- 致謝56-57
- 導(dǎo)師評閱表57
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1 樸春麗;于淼;姜U,
本文編號:787855
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