本文關(guān)鍵詞：力學(xué)刺激對(duì)纖維環(huán)源干細(xì)胞基質(zhì)代謝以及纖維環(huán)損傷修復(fù)的影響

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【摘要】：目的:比較各種力學(xué)拉伸強(qiáng)度下纖維環(huán)源干細(xì)胞(AFSCs)基質(zhì)代謝基因的表達(dá)情況;評(píng)價(jià)力學(xué)刺激后的AFSCs修復(fù)兔損傷纖維環(huán)的療效。方法:獲取1.5kg新西蘭大耳白兔的纖維環(huán)組織,分離培養(yǎng)其AFSCs;對(duì)培養(yǎng)的AFSCs分別進(jìn)行0%、2%、5%、12%(0.5Hz,4h/d,3d)力學(xué)刺激,通過細(xì)胞骨架染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化,通過RT-PCR檢測(cè)力學(xué)刺激培養(yǎng)后的AFSCs合成代謝基因(Collage-I,Collage-II,Aggrecan)的變化,篩選合適的拉伸力學(xué)刺激條件;選取18只健康新西蘭大白兔,按培養(yǎng)周期隨機(jī)分成3組(2周,4周,6周)。3組兔均建立纖維環(huán)缺損模型:L3-4不做任何處理作為空白組;L4-5填塞明膠海綿作為明膠海綿組;L5-6:注射力學(xué)刺激后的AFSCs并行明膠海綿填塞作為力學(xué)刺激AFSCs組;L6-7:注射未給予力學(xué)刺激的AFSCs并行明膠海綿填塞作為AFSCs組。分別于術(shù)后第2周,4周,6周各處死6只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,拍攝腰椎側(cè)位X線片及MRI,分別測(cè)量3組實(shí)驗(yàn)兔治療后的髓核含水量和面積、椎間盤高度指數(shù)(DHI),并對(duì)損傷修復(fù)部位行H-E染色和Masson染色,分析比較各組的修復(fù)情況。結(jié)果:經(jīng)0%、2%、5%、12%(0.5Hz,4h/d,3d)拉伸力學(xué)刺激后的AFSCs,其細(xì)胞骨架染色顯示各組間細(xì)胞形態(tài)未見明顯變化,但2%和12%拉伸強(qiáng)度下的細(xì)胞骨架更為模糊。此外,2%和12%拉伸強(qiáng)度下的基質(zhì)代謝基因(Collage-I,Collage-II,Aggrecan)表達(dá)較對(duì)照組下降,而經(jīng)5%拉伸力學(xué)刺激后的AFSCs合成代謝基因較其余各組則顯著增高,我們認(rèn)為5%拉伸幅度,0.5Hz,4h/d持續(xù)刺激3d為較合適的力學(xué)刺激強(qiáng)度;MRI檢查結(jié)果顯示拉伸AFSCs組和AFSCs組可以延緩椎間盤的退變;空白組及明膠海綿組的髓核含水量及面積在術(shù)后2周時(shí)即明顯下降并呈現(xiàn)續(xù)降低趨勢(shì),而拉伸AFSCs組和AFSCs組在各時(shí)段均顯著高于空白組及明膠海綿組,但AFSCs處理組間并無顯著差異;空白組、明膠海綿組椎間盤高度呈降低趨勢(shì),拉伸AFSCs組、AFSCs組經(jīng)注射后2周椎間盤高度下降緩慢,與前兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病理結(jié)果顯示拉伸AFSCs組、AFSCs組2周和4周時(shí)髓核保留相對(duì)完整,纖維環(huán)形態(tài)規(guī)則,髓核纖維環(huán)邊界較清晰,缺損部位由成纖維細(xì)胞及軟骨細(xì)胞填充。6周內(nèi)拉伸AFSCs組、AFSCs組髓核組織顯著退變并較前明顯減少。結(jié)論:5%力學(xué)刺激能夠有效促進(jìn)AFSCs基質(zhì)代謝基因的表達(dá);將AFSCs種植于纖維環(huán)缺損部位后,可起到延緩椎間盤退變,促進(jìn)缺損纖維環(huán)修復(fù)的作用。但力學(xué)刺激對(duì)AFSCs缺損修復(fù)的影響缺乏統(tǒng)計(jì)學(xué)支持,有待進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。
【關(guān)鍵詞】：纖維環(huán)源干細(xì)胞 纖維環(huán)缺損 修復(fù) 力學(xué)刺激 增殖分化
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R681.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-13
• 材料與方法13-28
• 結(jié)果28-41
• 討論41-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 綜述51-70
• 參考文獻(xiàn)62-70
• 中英文縮略詞對(duì)照表70-73
• 攻讀碩士學(xué)位期間論文發(fā)表情況73-74
• 致謝74-75

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