本文關鍵詞：17β-雌二醇對骨性關節(jié)炎軟骨細胞mTOR信號通路影響的實驗研究

  更多相關文章： 17β-雌二醇 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白 軟骨細胞 AKT和非AKT依賴途徑

【摘要】：目的:研究17β-雌二醇(E2)是否可以激活人軟骨細胞中哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路,以及如何激活或通過什么樣的途徑激活mTOR信號通路。通過對這一新的分子機制的探索可能揭示雌二醇對人軟骨細胞的生理作用。我們的研究可能為mTOR作為OA治療的潛在靶點提供依據(jù)及對mTOR有效的抑制劑的研究提供參考。方法:對人永生化軟骨細胞細胞系TC28a2和C28/I2E2在雷帕霉素(mTOR抑制劑)、E2、LY294002(PI3K抑制劑)、或E2與雷帕霉素或LY294002等聯(lián)合治療條件下進行孵育。然后,對S6K1、p-S6K1蛋白、蛋白激酶B(AKT),和p-AKT的蛋白水平進行Western blot分析,MMP3或MMP13的mRNA水平進行實時熒光定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)、免疫共沉淀(CO-IP)和蛋白質(zhì)印跡法(WB)分析以驗證雌激素受體α和mTOR信號通路之間的相互作用。結果:p-S6K1和p-AKT(半小時和一小時)在與E2一起培養(yǎng)的細胞系TC28a2和C28/12E2中均明顯升高。mTOR不影響p-AKT的水平,但當與LY294002(PI3K抑制劑)、或E2與LY294002組合的條件下培養(yǎng),其水平明顯減少。當與LY294002一起培養(yǎng)的條件下p-S6K1水平明顯減少,但這種影響可由E2與LY294002組合條件下逆轉(zhuǎn)。在與E2一起培養(yǎng)的條件下兔抗mTOR抗體可以與ERα發(fā)生共沉淀反應。另外,E2可以通過mTOR信號通道抑制MMP3和MMP13的mRNA水平。結論:17β-雌二醇可激活人軟骨細胞mTOR信號通路,其是通過AKT依賴性及非依賴性途徑激活人軟骨細胞中mTOR信號通路的。
【關鍵詞】：17β-雌二醇 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白 軟骨細胞 AKT和非AKT依賴途徑
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R684.3
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對照表9-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-16
• 1.主要實驗材料、試劑及儀器、設備11-13
• 2.實驗方法13-16
• 結果16-19
• 討論19-21
• 結論21-22
• 參考文獻22-26
• 綜述26-43
• 參考文獻35-43
• 致謝43-44
• 在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果44-45
• 個人簡歷45

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 何清義,李起鴻,許建中,楊柳;轉(zhuǎn)化軟骨細胞與正常軟骨細胞的生物特性比較[J];中國臨床康復;2002年10期

2 王小虎;衛(wèi)小春;陳維毅;;軟骨細胞力學特性的研究進展[J];中華醫(yī)學雜志;2006年21期

3 沈雁,唐毅,李斯明,鐘燦燦,梁佩紅;堿性成纖維細胞生長因子與透明質(zhì)酸對培養(yǎng)兔軟骨細胞的作用[J];中華創(chuàng)傷雜志;2000年06期

4 林建華,吳朝陽,許衛(wèi)紅;不同培養(yǎng)時間軟骨細胞的生物學特性[J];福建醫(yī)科大學學報;2000年02期

5 張文濤,盧世璧,黃英,李楠;軟骨細胞形態(tài)對其縫隙連接的影響[J];中國創(chuàng)傷骨科雜志;2000年04期

6 楊物鵬,許建中;軟骨細胞培養(yǎng)及其調(diào)控[J];中國矯形外科雜志;2000年08期

7 楊彩榮;軟骨細胞培養(yǎng)及其調(diào)控因素研究進展[J];國外醫(yī)學.耳鼻咽喉科學分冊;2002年03期

8 張文濤,盧世璧,黃英,李楠;軟骨細胞形態(tài)、表型與胞間通訊研究[J];中國修復重建外科雜志;2002年05期

9 楊運東 ,陳基長;不同施加因素對軟骨細胞的影響[J];中醫(yī)正骨;2002年09期

10 張艷,柴崗,崔磊,劉偉,曹誼林;不同類型人軟骨細胞體外生物學特性比較[J];中華實驗外科雜志;2003年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張春雷;孫美樂;姚洪菊;;抗氧化劑和透明質(zhì)酸對軟骨細胞的保護作用[A];中國細胞生物學學會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

2 任宏造;;軟骨細胞的超生結構病理[A];第六次全國電子顯微學會議論文摘要集[C];1990年

3 張楊;崔麗;郭悅;孫曉雷;李秀蘭;;滑膜細胞微環(huán)境對軟骨細胞生物學活性的影響[A];第十八屆全國中西醫(yī)結合骨傷科學術研討會論文匯編[C];2011年

4 柏濤;;骨髓間充質(zhì)干細胞誘導表達軟骨細胞表型的研究進展[A];玉溪市第三屆二次骨科學術研討會論文匯編[C];2009年

5 周紅輝;萬福生;;人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為軟骨細胞的實驗研究[A];華東六省一市生物化學與分子生物學學會2006年學術交流會論文集[C];2006年

6 王正輝;吳寶俊;許珉;;殼聚糖/明膠復合不同軟骨細胞體外構建組織工程軟骨的實驗研究[A];全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學術會議論文匯編[C];2012年

7 馬劍雄;馬信龍;張華鋒;張園;王志鋼;楊陽;;生物力學因素在激素性股骨頭壞死中對軟骨細胞的作用[A];2009第十七屆全國中西醫(yī)結合骨傷科學術研討會論文匯編[C];2009年

8 李建華;黃建榮;康奕飛;許繼德;涂永生;;體外誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為軟骨細胞的研究[A];中南地區(qū)第六屆生理學學術會議論文摘要匯編[C];2004年

9 石印玉;曹月龍;馮偉;鄭昱新;石瑛;王翔;;補腎、柔肝中藥對軟骨細胞生物功能的影響[A];2004'中華中醫(yī)藥科技成果專輯[C];2004年

10 許道榮;金丹;肖庭輝;余斌;;長時間拉伸應變對軟骨細胞生化環(huán)境的影響[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復學術年會論文選集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 聶翠蓉;英科學家從成人骨骼中找到軟骨干細胞[N];科技日報;2008年

2 吳一福;西安交大：用人胎兒軟骨細胞培養(yǎng)成功軟骨組織工程種子細胞[N];中國醫(yī)藥報;2006年

3 中文;人體軟骨舉足輕重[N];廣東科技報;2000年

4 劉霞;英用患者組織細胞成功培育出再生軟骨[N];科技日報;2010年

5 保健時報特約記者 方序;體外“養(yǎng)”一塊軟骨補膝蓋[N];保健時報;2011年

6 記者 張可喜;培養(yǎng)軟骨細胞[N];新華每日電訊;2002年

7 健康時報記者 李海清;軟骨破了打“補丁”[N];健康時報;2009年

8 楊春;藥物增高不可信[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

9 黃楓 謝國平;中醫(yī)藥治療膝骨關節(jié)炎實驗研究進展[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

10 記者 何屹;英國用干細胞成功培育出軟骨組織[N];科技日報;2005年

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1 王曉鳳;自噬在軟骨發(fā)育不全與軟骨生成中的作用與機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

2 王勝楠;杜仲苷對IL-1β誘導的軟骨細胞分解代謝和凋亡的影響及其作用機制[D];南方醫(yī)科大學;2015年

3 張元民;MiR-145在原發(fā)性膝關節(jié)骨性關節(jié)炎軟骨中的表達及其意義[D];天津醫(yī)科大學;2015年

4 張龍強;整合素β1促進GIT1表達而影響軟骨細胞增殖凋亡的研究[D];山東大學;2015年

5 馬中希;周期性張應力對大鼠生長板軟骨細胞的增殖和凋亡作用[D];華中科技大學;2015年

6 劉艷;BMP-2在骨性關節(jié)炎中表達的意義及其誘導凋亡及增殖的研究[D];吉林大學;2016年

7 梁錦前;瘦素對于人OA軟骨細胞RhoA/LIMK1/Cofilin細胞骨架調(diào)控通路的作用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

8 楊運東;骨炎定對體外培養(yǎng)軟骨細胞的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學;2001年

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本文編號：734273