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嗅鞘細(xì)胞在大鼠坐骨神經(jīng)缺損修復(fù)中的炎性調(diào)節(jié)作用研究

發(fā)布時間:2017-08-09 04:18

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【摘要】:目的探討嗅鞘細(xì)胞(olfactory ensheathing cell,OEC)移植修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損后,其在修復(fù)過程中對坐骨神經(jīng)局部微環(huán)境內(nèi)炎性因子表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。方法取綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)轉(zhuǎn)基因SD大鼠嗅球,原代培養(yǎng)GFP-OEC并鑒定。取100只SD大鼠隨機(jī)分為兩組,制備右側(cè)坐骨神經(jīng)缺損(10 mm長)模型后,采用聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物[poly(lactic acid-co-glycolic acid),PLGA]神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)缺損處,實驗組(n=55)于導(dǎo)管兩端注入GFP-OEC與細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的混合液,對照組(n=45)注入等量DMEM與ECM的混合液。術(shù)后觀察大鼠一般情況,于6 h、1 d、3 d以及1、2、3、4、6周Western blot檢測IL-4、IL-6、IL-13和TNF-α的表達(dá);術(shù)后2、4、6周實驗組取材觀察GFP-OEC存活情況;9周兩組取材行HE染色觀察神經(jīng)組織形態(tài),并行坐骨神經(jīng)感覺及運(yùn)動功能檢測、神經(jīng)電生理檢測。結(jié)果經(jīng)免疫熒光染色鑒定,原代培養(yǎng)細(xì)胞為GFP-OEC。Western blot檢測顯示,與對照組比較,2~6周實驗組IL-4相對表達(dá)量明顯升高,3 d、1周時IL-6及TNF-α相對表達(dá)量降低,1 d以及3~6周時IL-13相對表達(dá)量升高,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后2、4、6周熒光顯微鏡下觀察,實驗組神經(jīng)移植體內(nèi)的神經(jīng)再生端均有GFP-OEC存活;術(shù)后9周,HE染色示實驗組再生神經(jīng)組織較松散,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則;對照組再生神經(jīng)組織成泡狀空隙,細(xì)胞明顯減少。術(shù)后9周,實驗組大鼠坐骨神經(jīng)功能恢復(fù)程度優(yōu)于對照組,后足回縮時間、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)、肌肉動作電位潛伏期及復(fù)合肌肉動作電位波幅比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論坐骨神經(jīng)缺損后植入OEC可促進(jìn)抗炎因子IL-4和IL-13的表達(dá),同時抑制促炎因子IL-6和TNF-α的表達(dá),改善了坐骨神經(jīng)局部的炎癥微環(huán)境,進(jìn)而有效地促進(jìn)坐骨神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能的修復(fù)重建。
【作者單位】: 西南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點實驗室;第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點實驗室;重慶市畜牧科學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】周圍神經(jīng)再生 嗅鞘細(xì)胞 抗炎因子 促炎因子 大鼠
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(31271036、81371341) 國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973)資助項目(2012CB518106) 全軍后勤科研計劃重大專項資助項目(AWS14C003-5) 創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點實驗室Ⅰ類研究課題(SKLZZ201003) 第三軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院院所青年創(chuàng)新基金(2014YQN07)~~
【分類號】:R688
【正文快照】: 周圍神經(jīng)損傷是顯微外科常見疾病[1],常需要神經(jīng)移植修復(fù),但效果常不理想。分析原因除與神經(jīng)組織高度分化、神經(jīng)纖維再生緩慢有關(guān)外,炎癥/免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用也引起了廣泛關(guān)注[2]。軸突再生受炎性因子調(diào)控[3],整體把握和維持炎性因子的動態(tài)平衡[4-5]是了解周圍神經(jīng)修復(fù)中炎癥/

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