發(fā)布時間：2017-08-07 15:11

  本文關(guān)鍵詞：海水浸泡后切口牽拉痛大鼠疼痛行為的變化及其機理的探討

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【摘要】：目的：1.觀察海水浸泡對切口牽拉痛(SMIR)大鼠疼痛行為的影響,進一步研究其疼痛性質(zhì),并探討其內(nèi)在機理與神經(jīng)形態(tài)學(xué)改變的關(guān)系。2.探討海水浸泡后SMIR模型大鼠疼痛行為改變與背根神經(jīng)節(jié)＼脊髓TRPV1、小膠質(zhì)細胞激活的相關(guān)性,進一步探討其內(nèi)在機制。3.不同沖洗液對海水浸泡后的SMIR模型大鼠術(shù)后疼痛行為和切口愈合時間的影響。方法：1.不同時間海水浸泡后SMIR模型大鼠疼痛行為變化的觀察：24只健康雄性SD實驗大鼠隨機分為四組：SMIR組(只建立SMIR模型)、SI5組(建立SMIR模型后,局部傷口予以海水浸泡5分鐘)、SI20組(建立SMIR模型后,局部傷口予海水浸泡30分鐘)、SI60組(建立SMIR模型后,局部傷口予海水浸泡60分鐘)。于術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d、21d、35d測定各組大鼠50%的機械縮足反射閡值(PMWT)和熱痛閡值(PTWL)。2.觀察海水浸泡后SMIR模型大鼠疼痛行為變化的神經(jīng)形態(tài)學(xué)改變：選用健康雄性SD大鼠48只,基礎(chǔ)痛閾值篩選后,隨機分為三組：模型組(MC組)、生理鹽水浸泡組(NS組)、海水浸泡組(SW組),建立SMIR模型后,生理鹽水浸泡組大鼠切口予生理鹽水浸泡60分鐘；海水浸泡組予海水浸泡60分鐘；模型組建立模型后不做特殊處理。于術(shù)后Id、3d、5d、7d、14d、21d、35d測定各組大鼠50%的機械縮足反射閾值(PMWT)和熱痛閾值(PTWL)。每組分別于術(shù)后3d、35d隨機選取4只大鼠,處死后取術(shù)側(cè)隱神經(jīng)做HE染色、術(shù)側(cè)背根神經(jīng)節(jié)應(yīng)用電鏡技術(shù)觀察其超微結(jié)構(gòu)的改變。觀察記錄術(shù)口愈合時間。3.背根神經(jīng)節(jié)\脊髓TRPV1的表達及小膠質(zhì)細胞激活的情況與疼痛行為學(xué)改變的關(guān)系：分別于術(shù)后3d、35d隨機選取MC組、NS組、SW組各4只大鼠,處死后取術(shù)側(cè)背根神經(jīng)節(jié)和腰膨大處脊髓背角做免疫組化實驗測定TRPV1的表達情況,并運用免疫熒光染色方法標記OX-42測定背根神經(jīng)節(jié)和腰膨大處脊髓背角小膠質(zhì)細胞的活化水平。4.觀察不同沖洗液對海水浸泡后SMIR模型大鼠術(shù)后疼痛行為和術(shù)口愈合時間的影響：選用健康雄性SD大鼠48只,篩選其基礎(chǔ)痛閾值后隨機分為海水浸泡組(SW組)、海水浸泡+蒸餾水沖洗組(SW+DW組)、海水浸泡+低滲透鹽水沖洗組(SW+HS組)、海水浸泡+生理鹽水沖洗組(SW+NS組),建立SMIR模型后,除海水浸泡組外,其余各組分別予蒸餾水、低滲透鹽水、生理鹽水沖洗。于術(shù)后于術(shù)后Id、3d、5d、7d、14d、21d、35d測定各組大鼠50%的機械縮足反射閾值(PMWT)和熱痛閾值(PTWL)。實驗過程觀察大鼠的一般情況,并記錄大鼠術(shù)口的愈合時間。結(jié)果：1.SI5組術(shù)后第一天的術(shù)側(cè)PMWT值與SMIR組比較明顯降低(P0.05)。與SMIR組比較,SI20組術(shù)后1d、3d、5d、7d對應(yīng)的術(shù)側(cè)PMWT值下降(P0.05)。SMIR組、SI5組、SI20組均能于術(shù)后35d恢復(fù)術(shù)側(cè)的基礎(chǔ)PMWT值水平。SI60組術(shù)后1d至35d各時間點的術(shù)側(cè)PMWT值均較SMIR組和SI5組下降(P0.05)；而與SI20比較,SI60組術(shù)后1d、14d、21d、35d術(shù)側(cè)PMWT值均下降(P0.05),且術(shù)后35d不能恢復(fù)到術(shù)前基礎(chǔ)MWT值。SMIR組、SI5組、SI20組各時點對側(cè)PMWT值與造模前比較未見明顯差異。SI60組術(shù)后Id至I4d各時點對側(cè)PMWT值與SMIR組、SI5組、SI20組及DO時點比較均明顯下降(P0.05),術(shù)后21d恢復(fù)基礎(chǔ)水平。SMIR組、SI5組、SI20組各時間點術(shù)側(cè)和對側(cè)PTWL值差異無統(tǒng)計學(xué)意義；SI60組術(shù)后1d至14d各時點術(shù)側(cè)PTWL值比SMIR組、SI5組、SI20組及造模前稍有降低(P0.05)；而其對側(cè)術(shù)后1d、3d、5d、7d的PTWL值亦較SMIR組、SI5組、SI20組及造模前稍降低(P0.05)。2.SW組術(shù)后1d至35d內(nèi)對應(yīng)觀察時點的術(shù)側(cè)PMWT值與NS組和SW組比較均明顯降低(P0.05),且術(shù)后35d不能恢復(fù)到術(shù)前基礎(chǔ)MWT值；SW組術(shù)后第一天至第21天對側(cè)的PMWT值與基礎(chǔ)值比較均明顯下降(P0.05),其術(shù)后對側(cè)PMWT值與MC組、NS組比較均明顯降低(P0.05),術(shù)后35天恢復(fù)基礎(chǔ)機械痛閾值水平。SW組術(shù)后第1至第14天各時間點的術(shù)側(cè)PTWL值均比造模前和MC組、NS組明顯降低(P0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,而其對側(cè)第1、3、5、7天的PTWL值亦較造模前和MC組、NS組稍降低,MC組、NS組各時間點術(shù)側(cè)和對側(cè)PTWL值差異無統(tǒng)計學(xué)意義；3.MC組和NS組術(shù)后3d、35d的隱神經(jīng)外膜光滑完整,與神經(jīng)纖維緊密連接,神經(jīng)纖維排列緊密。SW組術(shù)后3d隱神經(jīng)術(shù)隱神經(jīng)外膜明顯褶皺,與神經(jīng)纖維間隙增寬,神經(jīng)纖維變細排列松散、部分神經(jīng)纖維缺失,纖維密度不均勻；SW組術(shù)后35d隱神經(jīng)外膜稍有褶皺,神經(jīng)纖維變細,波浪樣松散排列,密度均勻。MC組和NS組術(shù)后3d、35d背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元偶見個別腫脹的線粒體和自噬小體,線粒體嵴清晰可見。SW組術(shù)后3d可見大量的空泡化的線粒體和自噬小體或自噬小泡,線粒體嵴消失,術(shù)后35d,神經(jīng)元內(nèi)可見少量腫脹的線粒體及自噬小體,線粒體嵴模糊不清。SW組術(shù)后第3天及術(shù)后第35天背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元內(nèi)異常線粒體及溶酶體計數(shù)均比MC組、NS組顯著增高(P0.05),對比術(shù)后第三天,三組術(shù)后第35天異常線粒體和溶酶體數(shù)量均有明顯下降(P0.05)。MC組和NS組大鼠均能在7天左右愈合,而SW組則需約9天愈合,平均延長愈合2天(P0.05)。4.SW組術(shù)后第3天及第35天術(shù)側(cè)背根神經(jīng)節(jié)/腰膨大處脊髓背角上TRPV1累積光密度值要明顯大于MC組和NS組(P0.05)。對比術(shù)后第3天,三組術(shù)后第28天TRPV1的累計光密度值均下降(P0.05)。術(shù)后第3天及第35天,SW組術(shù)側(cè)背根神經(jīng)節(jié)及腰膨大處脊髓背角上小膠質(zhì)細胞特異性標志蛋白OX-42的平均光密度值要明顯大于MC組和NS組(P0.05)5.與造模前基礎(chǔ)機械痛閾值比較,四組大鼠術(shù)后第1天至35天的術(shù)側(cè)PMWT值均下降(P0.05),與SW組比較,SW+DW組、SW+HS組、SW+NS組術(shù)后第1至第35天術(shù)側(cè)對應(yīng)的PMWT值均升高(P0.05)；而與SW+DW組、SW+HS組比較,SW+NS組術(shù)后第1至第35天術(shù)側(cè)各時間點對應(yīng)的PMWT值均升高(P0.05)。與造模前基礎(chǔ)PMWT值比較,SW組比較、SW+DW組、SW+HS組、SW+NS組術(shù)后第1天至第7天對側(cè)PMWT值均有不同程度的下降(P0.05),與SW組比較,SW+DW組術(shù)后第1天及第7天的對側(cè)PMWT值明顯較高(P0.05),SW+NS組術(shù)后第1至第7天各時點對應(yīng)的PMWT值均比Sw組降低(P＜0.05);SW+DW組和SW+HS組術(shù)后各時間點對側(cè)PMWT值比較無差異,而SW+NS組組術(shù)后術(shù)后第1天、第3天、第5天的PMWT值均比SW+DW組和SW+HS組顯著升高(P＜0.05)。SW+DW組、SW+HS組、SW+NS組術(shù)后第一天至第14天各時點的術(shù)側(cè)PTWL值與比Sw組比較均升高(P＜0.05), SW+NS組術(shù)后第1天至第7天術(shù)側(cè)對應(yīng)PTWL值均比SW+DW組、SW+HS組高(P＜0.05)。SW+NS組術(shù)后各時點對應(yīng)對側(cè)PTWL值與基礎(chǔ)水平相當無明顯差異,SW+NS組術(shù)后各第一天、第3天、第5天與SW組、SW+DW組、SW+HS組比較明顯升高(P0.05)。SW組、SW+DW組、SW+HS組三組愈合時間無差異,而SW+NS組愈合時間要比SW組、SW+DW組、SW+HS組約提前2天。結(jié)論：短時間(5分鐘、20分鐘)海水浸泡會降低SMIR模型大鼠急性期(術(shù)后前三天)同側(cè)機械痛閾值水平,長時間(60分鐘)海水浸泡可以加劇SMIR模型大鼠的疼痛情況,術(shù)側(cè)足出現(xiàn)持續(xù)性痛覺過敏,對側(cè)組出現(xiàn)鏡像痛。海水浸泡(60分鐘)導(dǎo)致大鼠外周神經(jīng)損傷、背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的改變可能參與了疼痛加重和神經(jīng)病理疼痛產(chǎn)生的過程。脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)TRPV1過度表達使小膠質(zhì)細胞持續(xù)活化的通路可能是這種疼痛持續(xù)的內(nèi)在機制；長時間海水浸泡(60分鐘)會延遲SMIR模型大鼠切口的愈合,即刻的沖洗不僅可以緩解術(shù)后疼痛加重的情況,其中用生理鹽水沖洗的效果較好,而且對切口愈合也有一定的改善作用。
【關(guān)鍵詞】：海水浸泡 疼痛 神經(jīng)病理性疼痛 TRPV1 小膠質(zhì)細胞
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614
【目錄】：

• 摘要3-6
• Abstract6-14
• 引言14-16
• 第一部分 文獻綜述16-20
• 1.1 概述16
• 1.2 神經(jīng)病理性疼痛的免疫調(diào)節(jié)機制16-18
• 1.2.1 周圍神經(jīng)損傷時免疫細胞作為NP形成的啟動者16
• 1.2.2 細胞因子與神經(jīng)病理性疼痛16-17
• 1.2.3 趨化因子與神經(jīng)病理性疼痛17
• 1.2.4 外周神經(jīng)免疫反應(yīng)17-18
• 1.2.5 外周神經(jīng)損傷后的中樞小膠質(zhì)細胞神經(jīng)免疫作用18
• 1.3 基于免疫調(diào)節(jié)的NP的治療18-19
• 1.3.1 基于免疫調(diào)節(jié)治療的機理和挑戰(zhàn)18-19
• 1.3.2 皮質(zhì)類固醇藥物19
• 1.3.3 靜脈注射免疫球蛋白19
• 1.3.4 以細胞因子為靶向的治療19
• 1.4 問題和展望19-20
• 第二部分 不同時間海水浸泡對SMIR模型大鼠疼痛行為學(xué)的影響20-29
• 2.1 前言20
• 2.2 實驗材料20-21
• 2.2.1 實驗動物20-21
• 2.2.2 主要的實驗儀器、設(shè)備21
• 2.2.3 人工海水配制21
• 2.3 實驗方法21-22
• 2.3.1 實驗動物分組21
• 2.3.2 動物模型的建立21
• 2.3.3 疼痛行為學(xué)測試21-22
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)方法22
• 2.5 實驗結(jié)果22-27
• 2.5.1 疼痛行為學(xué)測定結(jié)果22-26
• 2.5.2 大鼠一般情況26-27
• 2.6 討論27-28
• 2.7 實驗結(jié)論28-29
• 第三部分 海水浸泡后SMIR模型大鼠術(shù)后疼痛行為學(xué)改變的神經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)機理的探討29-45
• 3.1 前言29-30
• 3.2 實驗材料30-31
• 3.2.1 實驗動物30
• 3.2.2 主要儀器和設(shè)備30-31
• 3.2.3 人工海水配制31
• 3.3 實驗方法31-32
• 3.3.1 實驗動物分組31
• 3.3.2 動物模型的建立31
• 3.3.3 取材31
• 3.3.4 疼痛行為學(xué)測試31
• 3.3.5 HE染色31
• 3.3.6 電鏡實驗31
• 3.3.7 免疫熒光檢測脊髓腰膨大及背根神經(jīng)節(jié)OX-42的表達31-32
• 3.3.8 EnVision酶免疫組化法顯色檢測脊髓及背根神經(jīng)節(jié)TRPV1受體表達32
• 3.4 統(tǒng)計學(xué)方法32
• 3.5 實驗結(jié)果32-42
• 3.5.1 機械痛閾測定情況32-34
• 3.5.2 熱痛閡值測定34-36
• 3.5.3 隱神經(jīng)HE染色情況36
• 3.5.4 DRG神經(jīng)元電鏡觀察情況36-38
• 3.5.5 術(shù)側(cè)背根神經(jīng)節(jié)(DRG)和脊髓要膨大處背角TRPV1的表達情況38-41
• 3.5.6 大鼠一般情況(體重、術(shù)口愈合時間等)41-42
• 3.6 討論42-44
• 3.6.1 海水浸泡后SMIR模型大鼠疼痛性質(zhì)：神經(jīng)病理性疼痛?42-43
• 3.6.2 背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的改變可能是海水浸泡后SMIR模型大鼠疼痛行為學(xué)改變的機理之一43
• 3.6.3 外周和脊髓水平的TRPV1和小膠質(zhì)細胞參與海水浸泡后SMIR模型大鼠疼痛改變的分子機制43-44
• 3.7 實驗結(jié)論44-45
• 第四部分 不同沖洗液對局部海水浸泡后的SMIR模型大鼠疼痛行為學(xué)和術(shù)口愈合時間的影響45-53
• 4.1 前言45
• 4.2 實驗材料45-46
• 4.2.1 實驗動物45
• 4.2.2 主要儀器和設(shè)備45-46
• 4.2.3 人工海水配制46
• 4.3 實驗方法46
• 4.3.1 實驗動物分組46
• 4.3.2 動物模型的建立46
• 4.3.3 疼痛行為學(xué)測試46
• 4.4 統(tǒng)計學(xué)方法46
• 4.5 實驗結(jié)果46-51
• 4.5.1 疼痛行為學(xué)測試結(jié)果46-50
• 4.5.2 大鼠一般情況記錄50-51
• 4.6 討論51-52
• 4.6.1 不同沖洗液沖洗對海水浸泡后SMIR模型大鼠術(shù)后疼痛的緩解作用分析51-52
• 4.6.2 海水浸泡延長SMIR模型大鼠切口愈合時間的原因分析52
• 4.7 實驗結(jié)論52-53
• 總結(jié)53-54
• 參考文獻54-57
• 附錄57-59
• 在校期間發(fā)表論文情況59-60
• 致謝60-61
• 統(tǒng)計學(xué)審核證明61

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8 盧青軍;海水浸泡火器傷合并失血性休克傷情特點及溫度、滲透壓對其的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

9 楊芬;封閉負壓引流技術(shù)在海水浸泡爆炸傷創(chuàng)面治療中的應(yīng)用研究（一）[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

10 詹剛;海水浸泡燒沖復(fù)合傷的傷情特點及早期救治的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

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本文編號：635251