發(fā)布時間：2017-08-03 09:04

  本文關(guān)鍵詞：髓核細(xì)胞來源外泌體對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向髓核樣細(xì)胞分化的作用

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【摘要】：目的:探討人髓核細(xì)胞(NPCs)外泌體對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向髓核樣細(xì)胞分化的作用。方法:取腰椎間盤突出癥患者手術(shù)切除的髓核組織,體外分離培養(yǎng)人NPCs,采用差速離心法提取NPCs的外泌體,利用透射電鏡及Western blot對外泌體進(jìn)行大小形態(tài)及標(biāo)志蛋白的檢測,同時用PKH67熒光染料標(biāo)記外泌體后與BMSCs共孵育0.5h、2h、4h,在激光共聚焦顯微鏡下觀察BMSCs對NPCs外泌體的攝取情況;取人BMSCs經(jīng)NPCs外泌體誘導(dǎo)3d、7d、10d、14d后應(yīng)用RT-PCR檢測BMSCs中蛋白聚糖(ACAN)、SOX-9、Ⅱ型膠原(COL2A1)、角蛋白19(KRT19)及缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)的m RNA表達(dá)情況。結(jié)果:提取的人NPCs外泌體為直徑為30~100nm的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu),其表達(dá)CD63和Tsg101,不表達(dá)Calnexin蛋白。經(jīng)PKH67標(biāo)記的NPCs外泌體可以被BMSCs攝取;經(jīng)NPCs外泌體誘導(dǎo)后7d開始BMSCs中的ACAN、SOX-9、COL2A1、KRT19及HIF-1α基因m RNA表達(dá)均顯著性高于未經(jīng)誘導(dǎo)的BMSCs(P0.05)。結(jié)論:在體外實驗中,人NPCs可以分泌外泌體并被BMSCs所攝取,誘導(dǎo)BMSCs分化為髓核樣細(xì)胞,可為椎間盤退變的組織工程修復(fù)提供更為簡單有效的NPCs來源。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)附屬新橋醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 椎間盤退變 外泌體 髓核細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81572208)
【分類號】：R681.5
【正文快照】： qing,400037,China椎間盤退變性疾病(degenerative disc dis-ease,DDD)是引起腰痛的重要原因之一[1]。目前針對DDD的治療方式為保守治療、椎間盤切除術(shù)、椎間盤置換術(shù)以及椎間融合術(shù)。這些措施僅能一定程度改善疾病的臨床癥狀,不能從根本上減緩、終止甚至逆轉(zhuǎn)椎間盤退變的進(jìn)程

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