本文關(guān)鍵詞：建立一種新型凝血因子Ⅴ基因突變小鼠模型:突變小鼠無顯著骨組織變化

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【摘要】：背景:研究顯示,凝血因子Ⅴ基因突變在自發(fā)性非創(chuàng)傷性股骨頭壞死的發(fā)生率比健康對照組和繼發(fā)性非創(chuàng)傷性股骨頭壞死高,血栓形成的發(fā)生率與此吻合。凝血因子Ⅴ的失活能夠加速和促進凝血酶原的激活及凝血酶的生成。其重鏈上的3個位點arg-306,arg-506,arg-679的突變導(dǎo)致血栓傾向和高凝狀態(tài)。文章將調(diào)查第506位和679位的同時突變R506Q/R679Q對骨壞死產(chǎn)生的功能和影響。目的:建立凝血因子Ⅴ第506位和679位的谷氨酰胺至精氨酸(Factor VR506Q/R679Q)點突變小鼠模型。方法:應(yīng)用分子克隆技術(shù)構(gòu)建Factor VR506Q/R679Q點突變打靶載體,將其線性化后電轉(zhuǎn)到胚胎干細胞中,然后篩選G418抗性的胚胎干細胞克隆進行胚泡顯微注射,將注射好的胚泡移植至同期發(fā)情的假孕受體母鼠輸卵管內(nèi),獲得攜帶雙側(cè)LoxP基因的Chimera小鼠。將突變鼠與CMV-cre轉(zhuǎn)基因鼠雜交后,得到只含F(xiàn)actor VR506Q/R679Q的點突變鼠。PCR法進行基因型鑒定后,將突變小鼠和野生小鼠的骨蘇木精-伊紅染色和空骨陷窩率等進行比較,對其骨組織情況及骨量進行分析。結(jié)果與結(jié)論:(1)與野生鼠相比,Factor VR506Q/R679Q點突變鼠胚胎及生后的生長發(fā)育無明顯異常,骨量及空骨陷窩率并無顯著變化;(2)結(jié)果提示,成功建立了凝血因子Factor VR506Q/R679Q點突變小鼠,但突變小鼠并無顯著骨組織變化。之后的研究應(yīng)關(guān)注在外加因素刺激下突變小鼠的骨壞死誘發(fā)率。
【作者單位】： 杭州師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院;石家莊場站醫(yī)院;石家莊市靈壽縣醫(yī)院泌尿外科;唐山市灤南縣醫(yī)院外一科;
【關(guān)鍵詞】： 模型 動物 基因 血液凝固因子 組織工程 組織構(gòu)建 骨組織工程 基因突變小鼠 凝血因子Ⅴ 顯微注射 動物模型 浙江省自然科學(xué)基金
【基金】：浙江省自然科學(xué)基金(LQ13H060003)~~
【分類號】：R681.8;R-332
【正文快照】： 文章快速閱讀: 一種新型凝血因子V基因突變小鼠模型的建立 構(gòu)變電建載轉(zhuǎn)點體入突并細pR引并B6 l7u亞入9e Qs克cRr點i5p0隆t突6 Q變到載/顯注微射準(zhǔn)備受精卵準(zhǔn)備假孕母鼠m各ic年roC齡T階骨段量的胞后進行體并篩胚胎移植突變檢測 胚胞胎克干隆細篩培養(yǎng)胚胎干細選合嵌體顯胎微，

本文編號：599171