本文關(guān)鍵詞：透明質(zhì)酸水凝膠包封對攜帶BMP-2基因的腺病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞增殖活性及其表達的影響

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【摘要】：目的:探討攜帶骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因的腺病毒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后應(yīng)用透明質(zhì)酸水凝膠(hyaluronic acid hydrogel,HAH)包封對BMSCs增殖能力及其表達目標蛋白BMP-2的影響。方法:體外分離、提取、鑒定BMSCs,并將提前構(gòu)建好的Ad-BMP-2轉(zhuǎn)染BMSCs并使用HAH進行包封,激光共聚焦顯微鏡下觀察Ad-BMP-2轉(zhuǎn)染的BMSCs在HAH包封下的三維形態(tài)。實驗分為4組(各組培養(yǎng)條件無差異):A組(未轉(zhuǎn)染BMP-2的BMSCs);B組(HAH+未轉(zhuǎn)染BMP-2的BMSCs);C組(轉(zhuǎn)染BMP-2的BMSCs);D組(HAH+轉(zhuǎn)染BMP-2的BMSCs)。分別一周內(nèi)不同時相點(1d、2d、3d……7d)使用CCK-8法檢測各組OD值來評價細胞增殖活性;ELISA法檢測各組BMP-2的量(pg/ml)來評價目標蛋白的表達狀況。結(jié)果 :激光共聚焦顯微鏡三維重建可觀察到BMSCs可在HAH中任意平面鋪展,有充足的生長空間。BMSCs的增殖活性檢測顯示,隨著培養(yǎng)時間延長,細胞增殖活性逐漸增強,A組、C組4d后的OD值較1d時明顯增大(P0.05);B組和D組5d后的OD值較1d時明顯增大(P0.05);至7d時,A組OD值為1.283±0.061,B組為1.844±0.075;C組為1.570±0.099;D組為1.976±0.142,包封HAH的B、D組OD值均優(yōu)于沒有包封HAH的A、C組(P0.05)。BMP-2的表達在A、B組較弱,不同時間點間無顯著性差異(P0.05);C、D組的BMP-2表達各時間點均明顯高于A、B組(P0.05);從4d時起,C、D兩組的BMP-2表達顯著增加(與1d時比較P0.05),且D組明顯優(yōu)于C組,差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論 :三維環(huán)境下(即包封HAH后),Ad-BMP-2轉(zhuǎn)染的BMSCs不僅有較強的增殖活性;而且對BMP-2的表達具有一定的促進作用。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學院;濟寧醫(yī)學院附屬醫(yī)院脊柱外科;濟寧醫(yī)學院附屬醫(yī)院創(chuàng)傷骨科;
【關(guān)鍵詞】： 透明質(zhì)酸水凝膠 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 骨髓間充質(zhì)干細胞 髓核組織工程
【基金】：山東省高等學�？萍加媱濏椖�(編號:J14LL04) 山東省自然科學基金青年基金(編號:ZR2014CQ042)
【分類號】：R681.5
【正文快照】： of Jining Medical University,Jining,Shandong,272000,China頸椎及腰椎椎間盤退變是脊柱退行性疾病發(fā)生的第一步,被認為是頸背痛及腰痛的常見原因之一,嚴重影響著患者的生活質(zhì)量[1];如何有效地減緩甚至逆轉(zhuǎn)椎間盤的退變是當前骨科醫(yī)生的夢想和挑戰(zhàn)。生長因子在椎間盤修復(fù)領(lǐng)

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